夏桑菊浸膏对高渗诱导干眼模型人角膜上皮细胞保护机制研究

目的研究夏桑菊浸膏对高渗诱导下人角膜上皮细胞的保护作用及机制。方法采用NaCl构建高渗模型,通过MTS法检测细胞活力;利用RT-qPCR及酶联免疫吸附测定法检测相关炎症因子IL^(-1)β、IL-6、IL^(-1)8的表达;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针法检测细胞内活性氧水平。结果对比对照组,模型组600 mOsm·L^(-1)中细胞活力明显下降,经夏桑菊浸膏处理后,细胞活力明显上升;在炎症指标中,与对照组相比,模型组450 mOsm·L^(-1)细胞中IL^(-1)β、IL-6及IL^(-1)8的分泌水平与IL^(-1)β表达水平明显升高。夏桑菊浸膏处理细胞后,以上指标较450 mOsm·L^(-1)模型组明显下降;抗氧化研究中,模型组450 mOsm·L^(-1)中的细胞活性氧水平明显上升,夏桑菊浸膏处理后,细胞活性氧水平明显降低。结论夏桑菊浸膏对高渗诱导下的人角膜上皮细胞活力下降起到抑制作用,在高渗环境下具有保护人角膜上皮细胞的能力,保护作用通过抑制炎症因子产生和活性氧水平升高实现。

阿魏酸在烟曲霉菌诱导人角膜上皮细胞中的抗炎作用

目的探讨阿魏酸(FA)在烟曲霉菌诱导的人角膜上皮细胞中的抗炎作用。方法采用CCK-8方法检测不同浓度FA(0、50、100、150、200、250、300μmol/L)溶液对人角膜上皮细胞(HCEC)活力的影响;采用RT-PCR方法检测灭活的烟曲霉菌菌丝感染HCEC后,FA对炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA表达的影响;采用ELISA方法检测FA对炎症因子IL-6及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)蛋白表达的影响。结果300μmol/L的FA溶液处理组HCEC存活率低于其他各组(F=5.390,P<0.05),250μmol/L及以下浓度FA溶液处理对HCEC活力无影响(P>0.05)。250μmol/L FA处理可显著升高Nrf2 mRNA表达,降低IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达水平,并显著降低IL-6及MCP-1蛋白表达(F=4.720~990.967,P<0.05)。结论FA可能通过上调Nrf2的表达,抑制烟曲霉菌诱导的HCEC炎症反应中促炎因子的表达,发挥抗炎作用。

蒙花苷对CXCL12诱导人角膜上皮细胞表达VEGF的影响

目的:探讨蒙花苷对基质细胞衍生因子(CXCL12)诱导人角膜上皮细胞(HCEC)表达血管生成因子(VEGF)的抑制作用。方法:培养HCEC,ELISA检测不同滴度CXCL12慢性病毒基因转染HCEC上清液中VEGF含量,并建立细胞模型。ELISA检测不同浓度的蒙花苷干预后细胞上清液VEGF含量,Western Blot检测细胞中的VEGFA蛋白的表达,实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测细胞中的VEGFA mRNA水平的表达。结果:在CXCL12慢性病毒基因滴度为1.775 TU/mL时,HCEC分泌的VEGF的含量明显高于正常细胞组及阴性对照组(P<0.05),具有显著性差异。选用1.775 TU/mL滴度的CXCL12慢性病毒基因对HCEC进行造模。与模型组及阴性对照组比较,不同浓度的蒙花苷均能减少HCEC分泌VEGF,减少VEGFA蛋白含量和VEGFA mRNA表达量(P<0.05)。不同浓度的蒙花苷作用比较差异有统计学意义(P<0.05),随蒙花苷浓度增加,呈先增强后减弱的趋势,且当浓度为66.7μmol/L时对VEGFA蛋白及mRNA表达抑制力最为显著。结论:蒙花苷能够抑制CXCL12诱导HCEC分泌VEGF,减少VEGFA蛋白及VEGFA mRNA的表达,这为中药密蒙花“消目中赤脉”作用提供实验佐证。

HIF-1α的RNA干涉可引起缺氧条件下人角膜上皮细胞VEGF表达下调和PEDF表达上调

目的探讨shRNA干扰HIF-1α表达对缺氧条件下人角膜上皮细胞(h CEC)血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法针对HIF-1αmRNA序列靶点设计及合成3个小发夹RNA(shRNA),分别在体外转染自发永生化人角膜上皮细胞(S-ihCEC),转染后的S-ihCEC在1 mmol/L Co Cl2中缺氧诱导培养6 h,实时定量PCR检测HIF-1α、VEGF、PEDF的mRNA表达,Western blot法检测HIF-1α、VEGF的蛋白表达,ELISA检测PEDF的水平。结果与缺氧组比较,转染HIF-1αshRNA的S-ihCEC中HIF-1αmRNA表达下调、HIF-1α蛋白表达下调,VEGF mRNA表达下调、VEGF蛋白表达下调,PEDF mRNA表达上调(1. 22±0. 18)倍,PEDF水平升高。结论针对HIF-1α的shRNA能有效干扰S-ihCEC中HIF-1α的表达,并下调VEGF表达、上调PEDF的表达。

苯扎氯胺对体外培养的人角膜上皮细胞毒性作用的研究

目的观察滴眼液中最常用的防腐剂-苯扎氯胺(BAC)对体外培养的人角膜上皮细胞的毒性作用。方法建立人角膜上皮细胞的体外培养模型。不同质量浓度的BAC(0.1%、0.01%、0.001%、0.0001%)与细胞共同孵育,时间分别为10min、30min,2、6、24、48h。评估细胞毒性的方法:MTT分析,光镜和扫描电镜观察细胞形态学改变。结果0.1%BAC导致细胞立即死亡,MTT值在暴露时间为10min时显著下降(P<0.01),30min降至最低(P<0.01);光镜下细胞迅速脱壁。0.01%BAC在24h内导致细胞缓慢死亡,MTT值逐渐下降;扫描电镜示细胞的形态学改变为表面微绒毛脱落,细胞膜破损;0.001%～0.0001%BAC对细胞的损害出现在24h后。结论BAC对体外培养的人角膜上皮细胞具有明确的毒性作用,即使在滴眼液中含有的常规质量浓度(0.01%)及低于常规质量浓度下仍可出现。部分临床长期使用含有BAC滴眼液患者可出现眼表问题。

Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及意义

目的:探讨Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及其相关分子机制。方法:人角膜上皮细胞经复苏、培养,连续传代2次后共培养12个T25细胞培养瓶,4个培养瓶一组,共3组,分别加入25 ng/m L的重组人Wnt1蛋白和50 ng/m L的重组人Wnt1蛋白,一组不加入重组人Wnt1蛋白作为对照,于不同时间点(6、24、48和72 h)各取一个T25培养瓶的细胞,计算各组角膜上皮细胞总数并采用Western blot方法检测角膜上皮细胞中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果:对照组Cyclin D1蛋白的表达在0~48 h内随着时间的延长呈现逐步降低的趋势,在48 h达到最低状态,在72 h有所提高。加入Wnt1后6 h,25 ng/m L组未检测到Cyclin D1蛋白表达,50 ng/m L组Cyclin D1蛋白表达有所提高。在24,48和72 h时间点,25 ng/m L组和50 ng/m L组Cyclin D1蛋白表达均提高,48 h达到最高峰,72 h有所回落。添加Wnt1后与对照组比较,25 ng/m L组及50 ng/m L组角膜上皮细胞生长速度均加快,但在6、24及48 h时间点差异无显著性,在72 h差异有显著性。结论:Wnt1蛋白的刺激可在一定时间范围内增强人角膜上皮细胞Cy-clin D1的表达,且与Wnt1蛋白量呈正相关。Cyclin D1的表达强弱,在角膜上皮损伤修复及其细胞增殖分化过程中可能起重要作用。

BIGH3基因突变子R124C的过表达及其对人角膜上皮细胞的影响

目的对我国常见的BIGH3基因相关性人角膜营养不良的热点突变R124C进行体外定点诱变研究,并构建其真核表达载体,探讨其过表达对人角膜上皮细胞的影响。方法以pMD18-T/BIGH3载体为模板扩增野生型BIGH3基因全长编码序列,克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP上,采用快速体外定点诱变技术获得R124C突变体。瞬时转染体外培养的人角膜上皮细胞,免疫印迹检测野生与突变型BIGH3基因的表达,分别检测细胞培养基中TNF-α的含量,并收集细胞,分析caspase-3活性。结果 PCR成功扩增了野生型和R124C突变型的BIGH3基因,两种重组表达质粒转染人角膜上皮细胞后,免疫印迹检测结果证实其均在细胞中表达。细胞因子TNF-α分泌量增加,同时R124C型突变也可导致caspase-3酶活性增高。结论应用快速体外定点诱变技术,成功获得突变型R124C-BIGH3基因,转染人角膜上皮细胞后,通过caspase-3途径引起细胞凋亡,并上调分泌因子TNF-α。

高渗透压对人角膜上皮细胞MMP-9的上调作用

目的评价人上皮细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对高渗透压反应的表达特性.方法在正常渗透压的培养液中培养人角膜上皮细胞,然后在4组细胞培养液中分别加入40、60、80和100 mmol/L的NaCl,使培养液渗透压达到400～500 mOsm,运用酶图法和ELISA法测定加入高渗剂24 h后的培养液中MMP-9的质量浓度.结果不同渗透压组MMP-9的质量浓度有显著差异,培养液渗透压越高,MMP-9的质量浓度也就越高.结论高渗透压反应性刺激人角膜上皮细胞MMP-9的表达和产物.证实了眼表高渗透压是干眼症导致眼表面炎症的发病机制.

神经生长因子对人角膜上皮细胞增殖的影响

目的研究神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)在体外培养的人角膜上皮细胞中的表达,观察外源性给予NGF对人角膜上皮细胞增殖的作用,进一步探讨NGF在角膜疾病治疗中的意义。方法采用刮片法进行人角膜上皮细胞培养,外源性给予NGF作用于第2代～第3代培养的人角膜上皮细胞,通过四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法测定其对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测角膜上皮细胞中细胞增殖核抗原的表达情况。结果本实验成功培养出人角膜上皮细胞,加入外源性NGF后,培养的人角膜上皮细胞的增殖率较对照组明显增加(P<0.01),流式细胞仪检测到的细胞增殖核抗原的表达也较对照组明显增多(P<0.01)。结论外源性给予NGF对体外培养的人角膜上皮细胞的细胞增殖有明显的促进作用。

高糖对人角膜上皮细胞创伤修复中Cyclin D1蛋白表达的影响

目的:研究高糖环境对人角膜上皮细胞损伤修复的影响,初步探讨Cyclin D1蛋白在高糖培养的角膜上皮细胞创伤愈合中表达的意义。方法:模拟糖尿病角膜病变的高糖微环境,人角膜上皮细胞经复苏、培养传代后,分别设置等体积蒸馏水的DMEM完全培养基的正常对照组和含25mmol/L葡萄糖的DMEM完全培养基高糖处理组的两组细胞,细胞长满后进行划伤刺激,倒置相差显微镜下观察比较各组细胞生长状况及其变化,于不同时间点(0、12、24、48和72h)利用Western blot检测分析高糖培养的角膜上皮细胞中Cyclin D1蛋白的表达,qRT-PCR检测Cyclin D1 mRNA水平相对表达情况。结果:体外高糖处理条件下,人角膜上皮细胞划伤后修复速度减慢,漂浮细胞增多,细胞重新贴壁少,细胞间距增加,随着高糖处理时间的延长,细胞状态变差,生长速度慢;正常组细胞损伤修复较快,细胞密度增大,且形态规则,细胞膜光滑。Western blot检测划伤刺激上调Cyclin D1的表达,但随着时间延长上调作用呈逐渐减弱,两组Cyclin D1最高表达量均出现在12h。高糖处理组Cyclin D1表达量低于正常对照组。qRT-PCR结果显示:高糖处理后,Cyclin D1 mRNA表达呈上调趋势,但随着高糖处理时间延长,上调作用减弱,且在48h处mRNA水平恢复至与对照组同一水平。结论:在角膜上皮细胞创伤愈合过程中,高糖呈负性调节,抑制Cyclin D1蛋白的表达,且与角膜上皮细胞增殖能力下降及凋亡相关。

人角膜上皮细胞体外培养的研究进展

角膜上皮细胞位于角膜外表面,人角膜上皮细胞体外培养有助于充分了解角膜细胞的生物学特性、构建体外疾病模型以及更好地发挥其临床作用。我们就近年来关于人角膜上皮细胞体外培养提取部位,提取方法,培养基、细胞因子与底物以及鉴别方法研究进展进行综述。

强力霉素对人角膜上皮细胞FasL表达的影响

目的观察正常人角膜FasL蛋白的表达情况,评价人角膜上皮细胞FasL蛋白对强力霉素反应的表达特性。方法使用免疫组织化学染色观察正常人角膜上皮FasL的表达;用组织块培养法培养人角膜上皮细胞,将得到的细胞随机分为两组,一组使用含200μg/ml强力霉素的培养液,另一组不含强力霉素,分别再培养24h。运用流式细胞技术测定24h后FasL的表达情况。结果FasL在正常人角膜上皮细胞中呈阳性表达;经强力霉素干预的角膜上皮细胞FasL的表达高于未经强力霉素干预的角膜上皮细胞(P<0·01)。结论正常人角膜上皮细胞有FasL的表达;强力霉素可使体外培养的人角膜上皮细胞FasL的表达增高,有望降低临床角膜上皮细胞移植后的免疫排斥反应。

EGF联合KGF促进人角膜上皮细胞生长

目的:寻找促进角膜上皮损伤修复,治疗持续性角膜上皮缺损的有效药物方法:用~3H—胸腺嘧啶核苷(~3H—TDR)掺入及液体闪烁技术,观察外源性表皮生长因子(EGF)联合角蛋白细胞生长因子(KGF)对体外培养的角膜上皮细胞DNA合成的影响,并计算细胞倍增时间。结果:10ng/mlEGF,10ng/mlKGF单独或联合应用均有明显促进人角膜上皮细胞DNA合成的作用(与对照组比较 P【0.01),联合用药,作用更强(P【0.05)。应用EGF与KGF明显缩短了细胞倍增时间。结论:外源性EGF与KGF对体外培养的人角膜上皮细胞有明显的促细胞增生作用,联合用药,效果更佳。表明EGF与KGF具有应用于临床,促进角膜上皮损伤修复的可能性。眼科学报1996; 12:107-109。

重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子促进人角膜上皮细胞的增殖

背景:重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子的制剂临床上已经用于眼表创伤的修复,但是对于使用何种浓度的生长因子就能够最大程度的促进愈合以及两种生长因子促进创面愈合的效果比较一直存在争议。目的:初步观察重组人表皮生长因子、碱性成纤维生长因子对培养的人角膜上皮细胞克隆的影响。方法:用不同浓度的重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子作用于体外培养的人角膜上皮细胞,应用四甲基偶氮唑盐比色法分别在不同浓度的生长因子作用人角膜上皮细胞3,5,7 d后检测人角膜上皮细胞的增殖能力;平板克隆形成实验法观察细胞克隆形态及计算细胞克隆形成率。结果与结论:不同质量浓度的重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子分别对人角膜上皮细胞干预5 d后,重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子在10μg/L质量浓度时MTT值最大;质量浓度10μg/L重组人表皮生长因子促进人角膜上皮细胞克隆形成率高于质量浓度10μg/L碱性成纤维生长因子(P=0.02)。结果证实,重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子均能促进人角膜上皮细胞增殖并增加其克隆形成能力。质量浓度10μg/L重组人表皮生长因子干预5 d促进人角膜上皮细胞克隆形成效果最好。

茄病镰刀菌对人角膜上皮细胞NOD2表达及相关炎症因子分泌水平的影响

目的探讨茄病镰刀菌对人角膜上皮细胞(hCEC)中NOD2表达及下游炎症因子分泌水平的影响。方法将对数生长期的hCEC分为对照组(无真菌刺激)、真菌刺激组(根据加入真菌浓度不同分为10^(3)、10^(4)、10^(5)、10^(6) CFU·mL^(-1)刺激组),真菌刺激组分别刺激hCEC 4 h、8 h、12 h、16 h,RT-qPCR检测各组hCEC中NOD2 mRNA表达;10^(5) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激12 h、24 h、36 h,Western blot检测各组hCEC中NOD2蛋白表达;细胞免疫荧光法检测NOD2分子定位和表达;10^(3)、10^(4)、10^(5)、10^(6) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 36 h,ELISA法检测各组hCEC培养上清液中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白含量。结果随着茄病镰刀菌孢子刺激浓度的升高和刺激时间的延长,hCEC中NOD2 mRNA表达逐渐升高,10^(5) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激8 h,hCEC中NOD2 mRNA相对表达水平达到峰值,差异有统计学意义(P<0.05);10^(5) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 12 h、24 h、36 h,hCEC中NOD2蛋白相对表达水平逐渐增多,与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);10^(5) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激24 h后,NOD2主要表达在hCEC细胞质中,其荧光分子表达强度显著增加。随着茄病镰刀菌孢子刺激浓度的增加,hCEC中相关炎症因子的分泌水平增加,10^(4)、10^(5)、10^(6) CFU·mL^(-1)茄病镰刀菌孢子刺激hCEC 36 h,IL-6、IL-8、TNF-α蛋白含量与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论茄病镰刀菌孢子刺激可上调hCEC中NOD2表达并促进相关炎症因子分泌,NOD2参与了hCEC抗茄病镰刀菌的固有免疫反应。

高糖和糖浓度波动对人角膜上皮细胞中MMP-9表达及真菌黏附的影响

目的探讨不同浓度葡萄糖环境下茄病镰刀菌和尖端赛多孢子菌对人角膜上皮细胞(HCEC)的黏附能力和HCEC中MMP-9表达的影响。方法将处于对数生长期的HCEC分为3组低糖组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖培养基培养)、高糖组(25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖培养基培养)和糖波动组(5.5 mmol·L^(-1)和50.0 mmol·L^(-1)葡萄糖培养基交替培养),根据干预真菌的不同共分9小组(低糖-对照组、高糖-对照组、糖波动-对照组、低糖-茄病镰刀菌组、高糖-茄病镰刀菌组、糖波动-茄病镰刀菌组、低糖-尖端赛多孢子菌组、高糖-尖端赛多孢子菌组、糖波动-尖端赛多孢子菌组)。真菌干预组均加入相应真菌孢子悬液,且孢子与HCEC的比例为10:1,对照组加入等量的无菌生理盐水。观察真菌在培养板上的生长状况,倒置显微镜下观察每组HCEC的形态,荧光白染色法和平板稀释涂布法用于HCEC的黏附真菌计数,利用qRT-PCR检测各组HCEC中MMP-9 mRNA的表达、Western blot检测各组HCEC中MMP-9蛋白的表达。结果倒置显微镜下可见与真菌共培养的HCEC出现不同程度的形变和脱落,尤以高糖-茄病镰刀菌组和糖波动-茄病镰刀菌组最为显著。荧光白染色法和平板稀释涂布法计数结果显示,两种真菌高糖组和糖波动组对HCEC的黏附量均大于低糖组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);高糖和糖波动条件下,尖端赛多孢子菌黏附量大于茄病镰刀菌,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,MMP-9 mRNA和蛋白在各组HCEC中均有表达,与低糖组相比,高糖组和糖波动组HCEC中MMP-9 mRNA和蛋白表达均增多;高糖和糖波动条件下,真菌干预组HCEC中MMP-9 mRNA和蛋白表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而两种真菌干预组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论高糖和糖波动环境能够促进HCEC分泌更多的MMP-9,并增加真菌对HCEC的黏附。

高原城市室内灰尘对人角膜上皮细胞损伤研究

收集高海拔城市昆明不同功能区室内灰尘,利用等离子发射光谱仪分析不同粒径(F1~F4:100~2000,75~100,63~75,45~63μm)灰尘中Pb,Cu,Cd,Zn,Cr,Ni,Co,As和Mn的含量,借助人工泪液提取的方法,测定目标重金属的可溶出率(生物可给性),并分析室内灰尘人工泪提取液对人角膜上皮细胞的毒性效应.结果表明,办公室灰尘中Ni,Mn,Zn显著高于家庭及学生宿舍(P<0.01),且Cd,Ni,Zn的含量高于昆明市土壤背景值的39.3、9.5、12.3倍.居民住宅Co(10.6%)、办公室As(16.1%)及学生宿舍Mn(36.0%)溶出率最高.重金属元素在粒径分布规律上表现出不同特征,办公室及宿舍灰尘重金属易在63~100μm粒径范围内富集.人角膜上皮细胞经室内灰尘人工泪提取液暴露24h后,低浓度(20μg/mL)、高浓度(1280μg/mL)分别促进和抑制细胞增殖,与对照组相比较均具有统计学意义(P<0.05).细胞炎症因子IL-1β和TNF-α相对表达量显著增加,提示昆明室内灰尘暴露有诱发角膜炎症疾病发生的风险.

龟分枝杆菌脂葡聚糖对人角膜上皮细胞IL-8和IL-6表达的影响及其信号转导通路

目的:研究龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖对人角膜上皮细胞IL-6和IL-8表达的影响及其可能信号转导通路。方法:提取龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖作用于原代培养人角膜上皮细胞(human corneal epithelia,HCE)。实验分为实验组(脂葡聚糖样品处理组)、阳性对照组(LPS处理组)和空白组。脂葡聚糖处理后的0,6,12h各时间点采用RT-PCR法在mRNA水平检测实验组中IL-6和IL-8的表达水平;脂葡聚糖处理后的0,6,12,24h各时间点采用ELISA法在蛋白水平检测实验组、阳性对照组和空白组中IL-6和IL-8的表达。免疫细胞化学法检测空白组与实验组(时间点24h)HCE细胞内NF-κB的表达与定位。结果:实验组中,12h内IL-6和IL-8在mRNA水平明显增加,6h时即达到峰值(IL-6是空白组的32.7倍,IL-8是对照组的36.8倍);在蛋白质水平,培养上清内IL-6和IL-8含量在24h内呈现时间依赖性上升(6,12,24h各时间点与对照组之间均有统计学差异,P<0.05),与阳性对照组变化一致。空白组NF-κB定位于细胞浆内,实验组NF-κB被激活,移位至细胞核内。结论:龟分枝杆菌来源的脂葡聚糖可以促使人角膜上皮细胞过表达IL-6和IL-8,其信号转导通路可能是通过核转录因子NF-κB进行的。

组织工程人角膜上皮体外重建的研究进展

从种子细胞的来源和载体支架的筛选两个方面对组织工程人角膜上皮的体外重建及其研究中所存在的问题与解决途径进行综述。

重组人表皮生长因子促人角膜缘上皮细胞生长的研究

目的:探讨重组表皮生长因子(rhEGF)对人角膜缘上皮细胞生长的影响。方法:采用rhEGF作用于体外培养的人角膜缘上皮细胞,记录细胞生长曲线,并用四唑氮盐(MTT)法测定细胞增殖状况。结果:rhEGF浓度为10ng/ml时对人角膜缘上皮细胞的促增殖作用最强(P<0.05)。MTT法48h的吸光度值实验组均高于对照组(P<0.01)。结论:rhEGF对体外培养人角膜上皮细胞有明显促增生作用。