不同拉伸模式对人角膜上皮细胞形态及增殖、迁移的影响

目的生理状态下,角膜受到眼压及其产生的拉伸力作用。当疾病或外力引起角膜所受拉伸力改变,可能影响角膜上皮细胞间连接,破坏上皮结构完整性及其屏障功能。已有研究表明,角膜细胞对不同拉伸模式的响应存在差异,但具体机制尚不清楚。因此,本工作拟通过研究不同拉伸模式对角膜上皮细胞相关功能的影响及其机制,为构建体外角膜近生理力学加载模型和探究角膜上皮细胞在力学刺激下的响应机制提供依据。方法以0.1 Hz频率、5%幅度对人角膜上皮细胞分别加载单轴拉伸、等轴拉伸12 h。通过光学显微镜观察细胞形态,利用CCK-8、划痕实验检测细胞增殖与迁移能力,采用免疫荧光染色对细胞骨架、力学相关通路蛋白YAP的表达进行检测。结果与等轴拉伸相比,单轴拉伸作用下人角膜上皮细胞面积更大,骨架荧光强度更高,应力纤维数量增多,细胞的增殖与迁移速度显著降低,YAP荧光强度和核质比显著增高。结论人角膜上皮细胞对不同拉伸模式的响应存在差异,与等轴拉伸相比,单轴拉伸增大了细胞面积、促进应力纤维形成,抑制细胞增殖与迁移;YAP可能参与其中的调控。

渗透压对角膜上皮细胞迁移、增殖及相关分子表达的影响

目的角膜表面的泪液渗透压构成眼表重要力学微环境,其异常改变会对角膜上皮的损伤修复产生重要影响。本工作拟通过研究渗透压对角膜上皮细胞迁移和增殖的影响,及损伤修复过程中起关键作用的黏附分子表达以及力敏感转录因子YAP相关通路的变化,探究渗透压影响角膜上皮损伤修复的机制。方法通过添加不同浓度葡萄糖溶液建立人角膜上皮细胞系的高渗、等渗、低渗培养体系。使用划痕法观察24 h内细胞迁移能力,CCK-8法检测48h内细胞增殖功能,通过免疫荧光染色观察1 h时细胞皮质骨架变化、钙黏蛋白和YAP分子的表达及分布变化。结果与等渗组的角膜上皮细胞相比,高渗组细胞的划痕愈合速度显著减慢,增殖实验OD值显著降低,皮质骨架的荧光强度在细胞膜侧显著增强,分布更集中,钙黏蛋白和YAP分子的表达及分布无明显差异;而低渗组细胞的划痕愈合速度显著加快,增殖实验OD值无明显差异,皮质骨架的荧光强度无明显变化,分布更分散,钙黏蛋白的荧光强度显著升高,呈现点状分布,YAP的荧光强度显著升高,核质比显著增大。结论渗透压会影响角膜上皮细胞的迁移和增殖、改变细胞骨架排列以及钙黏蛋白和YAP分子的表达及分布,可能是其影响角膜上皮损伤修复的机制之一。

剪切力对骨髓间充质干细胞向角膜上皮细胞方向分化的影响

目的干细胞在角膜修复中起到了重要作用,在体外生化因素或共培养等可以诱导干细胞向角膜上皮细胞方向分化,力学因素可以影响干细胞的生物学功能,本文主要研究流体剪切力对兔骨髓间充质干细胞(rabbit bone marrow-derived mesenchymal stem cells,RBMSCs)向角膜上皮细胞方向分化的影响。方法使用含有表皮生长因子、胰岛素、兔角膜上皮细胞培养上清液的条件培养基诱导RBMSCs向角膜上皮细胞方向分化;利用平行平板流动腔对诱导或者不诱导的RBMSCs加载5、10、15 dyn/cm^(2)流体剪切力;通过倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜观察剪切力对细胞形态和骨架的影响,通过RTPCR和免疫组化等检测剪切后细胞表达角膜上皮相关基因和蛋白的情况。结果剪切后的细胞表现出更加突出和伸长的肌动蛋白丝,且平行于剪切力方向排列。剪切力可以上调CK3、CK12和PAX6等角膜上皮细胞标志物的基因和蛋白表达,尤其是5 dyn/cm^(2)剪切力的作用更为显著。结论适当的剪切应力可以促进RBMSCs向角膜上皮细胞方向分化,但其机制还有待进一步的深入探究,以期为干细胞应用于角膜上皮损伤修复的治疗提供参考。

小鼠角膜上皮细胞永生化细胞系的建立及表型鉴定

目的探讨小鼠角膜上皮细胞永生化细胞系的建立方法,并鉴定其表型的稳定性。方法提取小鼠角膜上皮原代细胞,以猴空泡病毒40大T抗原(SV40-LT)慢病毒感染小鼠角膜上皮原代细胞建立永生化细胞系。通过HE染色与免疫荧光染色对角膜上皮组织表型和标记物(K12、Pax6、Ki-67)进行鉴定。提取原代角膜上皮细胞并对其角膜上皮细胞分层蛋白K14进行鉴定,观察细胞明场视野评估细胞形态学特征。对转染后的P1和P8代细胞的部分标志物(K12、Pax6、Ki-67、ABCG2、K14)进行鉴定。采用结晶紫染色法观察转染后的P1和P8代细胞克隆的形成能力。结果小鼠角膜上皮组织中K12、Pax6、Ki-67染色阳性;P1、P8代小鼠角膜上皮细胞中K12、Pax6、Ki-67、K14和ABCG2染色阳性,上述标志物阳性率比较,差异均无显著性(P>0.05),P1与P8代小鼠角膜上皮细胞克隆能力无明显差异(P>0.05)。结论使用SV40-LT慢病毒转染小鼠角膜上皮,成功建立永生化小鼠角膜上皮细胞系,表型稳定且稳定增殖。

模拟角膜缘干细胞微环境诱导人多潜能干细胞分化为角膜上皮细胞的研究

目的:探讨模拟角膜缘干细胞(LSCs)微环境诱导人多潜能干细胞(hiPSCs)分化为角膜上皮细胞的可行性。方法:体外建立hiPSCs细胞系,利用transwell体系将hiPSCs与角膜基质细胞共培养模拟角膜缘干细胞微环境,添加小分子骨形态发生蛋白4(BMP4)和特异性转化生长因子β抑制剂(SB431542),诱导hiPSCs向角膜上皮细胞分化。采用免疫荧光染色、流式细胞方法检测角膜上皮细胞特异标志物CK3和CK12,角膜上皮细胞前体CK15,角膜缘干细胞标志物ABCG5的表达。结果:hiPSCs体外培养增殖活跃,免疫荧光染色显示干细胞特异性标志物OCT4、SOX2、TRA-1-60、NANOG呈阳性。采用transwell体系将hiPSCs与角膜基质细胞共培养,免疫荧光染色结果显示角膜缘干细胞标志物ABCG5及角膜上皮细胞前体标志物CK15阳性,角膜上皮细胞标志物CK3及CK12阴性;在共培养的基础上添加小分子BMP4和SB431542,免疫荧光染色及流式细胞检测结果显示角膜上皮细胞特异性标志物CK3阳性表达,且随分化时间延长表达比例增高。结论:模拟角膜缘干细胞微环境同时添加小分子SB431542及BMP4,可成功诱导体外培养的hiPSCs向角膜上皮细胞分化。

角膜绷带镜对翼状胬肉切除联合自体干细胞移植术后患者角膜上皮愈合的影响

目的分析角膜绷带镜对翼状胬肉切除联合自体干细胞移植术后患者角膜上皮愈合的影响。方法选取贵阳市花溪区人民医院眼科2017年11月-2022年7月收治的78例翼状胬肉患者,根据随机数字表法分为2组,每组39例。所有患者均在贵阳市花溪区人民医院接受翼状胬肉切除联合自体干细胞移植术治疗,对照组应用弹性绷带绑眼,观察组术后放置角膜绷带镜。比较2组患者角膜上皮修复情况、主观症状恢复情况[视觉模拟评分法(visual analogus scale,VAS)评分、眼表疾病指数量表(ocular surface disease index,OSDI)评分、泪膜破裂时间(break-up time of tearfilm,BUT)、裸眼视力(uncorrected visual acuity,UCVA)]。结果观察组角膜上皮完全愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组患者角膜上皮修复总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后1 d、术后3 d、术后14 d、术后28 d,观察组VAS评分、OSDI各项评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1 d、术后7 d、术后14 d、术后28 d,观察组BUT、UCVA值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论角膜绷带镜应用于翼状胬肉切除联合自体干细胞移植术后辅助治疗,有助于促进角膜上皮愈合,缓解眼痛、眼部刺激等症状,恢复视力和眼表泪膜的稳定性。

诱导骨髓间质干细胞分化为角膜上皮样细胞的初步研究

目的:观察人骨髓间质干细胞(MSCs)移植到兔角膜基质后的分化发育情况,探讨MSCs分化为角膜上皮细胞的可行性。方法:24只新西兰兔随机分为2组。实验组:将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d,用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植到兔角膜基质;对照组:采用保存羊膜移植到兔角膜基质。分别于移植后1、2、3、4、6和8周,摘取各组实验眼行组织学和免疫组织化学检查,检查移植到兔角膜基质的MSCs的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到角膜基质的带有BrdU标记的细胞角蛋白K3/12(CK3/CK12)和角蛋白K13(CK13)的表达。结果:MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长,与羊膜共培养4d后,MSCs贴附羊膜生长迅速,组织学特征无明显改变。羊膜负载MSCs移植到兔角膜基质表面,术后免疫组织化学检测角膜上皮层CK3/CK12表达阳性,CK13表达阴性,在重建的角膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞并同时表达角膜上皮细胞特异性表面标志蛋白K3/K12,未发生免疫排斥反应,未见异常增殖细胞。结论:羊膜负载MSCs移植到兔眼表角膜基质后,MSCs能存活、增殖并向角膜上皮样细胞分化。

大鼠骨髓间充质干细胞体外可诱导分化为角膜上皮细胞

目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可能性。方法:用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSC,经体外与角膜基质细胞共培养诱导分化,免疫荧光法检测角膜上皮细胞特异标志物K12的表达。结果:体外培养的大鼠骨髓MSC表现出很强的增殖潜能,原代培养的骨髓MSCCD29免疫荧光染色阳性,CD34和CD45为阴性,符合骨髓MSC的特征。MSC与角膜基质细胞共培养1wk后大部分细胞分化为间质细胞,少部分细胞形态上相对偏小,免疫荧光检测这部分细胞表达角膜上皮细胞特异性标志角蛋白K12。结论:体外培养的MSC在角膜基质细胞的诱导下可横向分化为角膜上皮细胞。

LASEK与Epi-LASIK角膜上皮瓣细胞培养及增生能力检测

目的探讨准分子激光上皮下角膜磨镶术(LASEK)与上皮角膜切割激光矫视术(Epi-LASIK)后角膜上皮的愈合方式。方法取行LASEK及Epi-LASIK的人角膜上皮瓣各20例,兔角膜上皮瓣12例,兔角膜缘组织12例,采用细胞法和组织块法进行上皮瓣细胞及角膜缘细胞培养,并采用WST-8(可溶性噻唑盐)法检测和比较细胞增生能力。结果人和兔上皮瓣细胞连续观察2周仅见少量细胞生长或未见细胞生长,人LASEK组细胞增生能力较Epi-LASIK组低,差异有统计学意义(P<0.05)。兔LASEK组细胞增生能力较Epi-LASIK组低,但差异无统计学意义(P=0.06),兔LASEK、Epi-LASIK组细胞增生能力均低于角膜缘组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论离体角膜上皮瓣细胞增生能力低下,且LASEK术后上皮瓣细胞增生能力低于Epi-LASIK,分析显示LASEK和Epi-LASIK术后角膜创伤愈合过程并非依靠角膜上皮瓣的原位生长,而是以角膜缘干细胞的分裂增生为主导。

重组人角质细胞生长因子-2对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用

目的:研究外用旋滴重组人角质细胞生长因子-2(KGF-2)对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用,为角膜上皮损伤的早期治疗探索新方法。方法:制备兔角膜碱烧伤模型,60只日本大耳白兔随机分为碱烧伤对照组和KGF-2组(25mg·mL-1)(n=30);各组日本大耳白兔于造模后以50μL药物滴眼,每日3次。7和14d裂隙灯观察角膜烧伤面积以及角膜新生血管的形成,MTT法检测角膜上皮细胞活性,免疫组化方法进行病理组织学检查。结果:碱烧伤后7和14d,KGF-2组角膜烧伤面积小于碱烧伤对照组,差异有显著性(P<0.01)。碱烧伤对照组7d角膜新生血管发生率为17.50%,KGF-2组为7.32%;碱烧伤对照组14d角膜新生血管发生率为41.67%,KGF-2组为32.50%。MTT检测结果显示:碱烧伤后7和14d,KGF-2组492nm吸光度与碱烧伤对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。碱烧伤后7和14d,病理切片HE染色显示:对照组角膜基质水肿,板层纤维排列松散、紊乱,炎症反应反复出现,角膜上皮层变薄,部分脱落,角膜内皮层内侧有大量成纤维细胞增生;KGF-2组碱烧伤后7d,角膜上皮细胞生长良好,基质轻度增厚,无明显的炎症反应;碱烧伤后14d,未出现炎症复发,角膜上皮细胞生长良好,排列整齐,角膜基质仅有轻度增厚。结论:外用旋滴25mg·mL-1KGF-2可加速角膜上皮损伤的恢复,减轻角膜烧伤的各种炎症反应症状;减轻角膜基质水肿和纤维化,同时KGF-2亦表现出显著的抑制角膜新生血管形成的作用;KGF-2有可能成为另一个对角膜上皮损伤具有重要调控作用的生长因子。

角膜缘部干细胞对角膜上皮创伤愈合的影响

利用角膜缘上皮移植、结膜移植和非手术的方法分别对角膜上皮创伤伴随角膜缘损伤的兔眼进行实验研究,结果表明角膜缘上皮移植组上皮愈合时间短(平均8.5天),且无杯状细胞,无或极少量新生血管;结膜移植组,上皮愈合时间延长(平均11.5天),含有杯状细胞和新生血管;非手术组形成角膜血管翳性混浊。而不伴随角膜缘损伤仅有角膜中央上皮创伤的兔眼愈合时间最短(平均3.5天),愈合后无新生血管及杯状细胞。结果证实角膜缘部干细胞的存在并对角膜上皮再生有直接作用。

人羊膜上皮细胞体外培养重建角膜上皮的实验研究

目的:探讨人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,HAECs)诱导分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可行性。方法:取足月产人羊膜,通过胶原酶、胰蛋白酶和EDTA消化获得HAECs,将细胞在体外培养扩增、传代,将2～3代HAECs接种于去上皮的兔角膜基质上培养,待HAECs融合形成单层后,置于插入式培养皿中进行气液界面培养14 d。对角膜基质上培养的HAECs用光镜、扫描电镜和透射电镜进行形态学及超微结构观察,以及细胞角蛋白(CK)3/12的免疫组织化学检测。结果:HAECs可在角膜基质上生长,培养1～2 d可形成单层,气液界面培养14 d可形成4～5层细胞的复层上皮,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,透射电镜下可见上皮细胞之间有桥粒连接,免疫组化检测复层细胞表达CK3/12,所形成的复层结构与正常角膜上皮相似。结论:HAECs有可能作为种子细胞用于组织工程角膜上皮重建。

准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术对兔角膜基质细胞凋亡的影响

目的观察兔行不同切削深度的准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)后角膜基质细胞凋亡的变化。方法健康新西兰白兔随机分为3组,随机选择一只眼行LASEK术,分别按近视-3.00、-9.00和-15.00D设计切削,另一只眼为对照眼。24h和7d后常规取角膜制成石蜡切片,采用核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口标记(TUNEL)法检测基质细胞凋亡,计数凋亡细胞,计算凋亡指数进行分析。结果凋亡细胞呈棕黄色,体积缩小,核固缩成团。术后24h-3.00、-9.00和-15.00D三组激光切削眼凋亡指数分别为0.39±0.10、0.55±0.08和0.54±0.12,均分别高于对照眼;-9.00D的切削较-3.00D组凋亡细胞增多,-15.00D组凋亡指数与-9.00D无显著性差异;术后7d激光切削组的凋亡指数与对照眼无显著性差异,且较24h减轻。结论LASEK术可导致兔角膜基质细胞凋亡,且随切削深度的增加,细胞凋亡呈增加趋势。

毛囊bulge细胞在角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的初步研究

目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bulge细胞保持高增殖,低分化状态。经过2周左右的共培养,毛囊bulge细胞逐渐分化,部分细胞K12表达阳性。结论角膜缘基质细胞可以诱导毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化。

兔和牛角膜上皮、基质及内皮细胞体外培养和增殖的研究

目的:研究兔和牛角膜上皮、基质及内皮细胞等3种细胞体外培养的生物学特性,探索和改进这3种细胞体外培养的方法,为组织工程角膜奠定基础。方法:采用消化法分离培养兔和牛角膜上皮、内皮和基质细胞,观察细胞贴壁生长情况,同时对生长良好的原代细胞进行消化传代,进一步观察传代细胞的形态和生长情况。结果:角膜上皮、内皮和基质细胞均在培养4 8～72h贴壁生长,培养6～9d能形成良好单层,细胞形态典型,进行多次传代后细胞仍维持原有形态和功能,获得的细胞能进行长期培养。结论:为兔和牛角膜上皮、内皮和基质细胞体外培养。

经角膜基质细胞诱导的大鼠骨髓间充质干细胞在人羊膜上构建角膜上皮移植片

目的:研究将骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)诱导分化后在羊膜表面培养构建角膜上皮移植片的可行性。方法:取SD大鼠骨髓间充质干细胞和角膜基质细胞,分别培养并传2代后进行共培养,取共培养7d后的MSC覆载于新鲜人羊膜,再培养7d。对MSC及诱导后MSC进行免疫荧光染色和扫描电镜检查;对覆载细胞的羊膜进行HE染色及免疫荧光染色。结果:MSC在体外培养条件下贴壁生长,免疫荧光染色CD29和CD44阳性,CK12阴性。经角膜基质细胞诱导分化后,MSC细胞CK12染色转为阳性。诱导后MSC接种到羊膜表面,迅速贴壁生长,组织学特性无明显改变,CK12染色仍为阳性。结论:经角膜基质细胞诱导的MSC表现出角膜上皮细胞特征,在羊膜上生长后保持不变。

脱细胞猪角膜基质体外支持角膜上皮和基质细胞的生长(英文)

目的：探讨脱细胞猪角膜基质体外能否支持兔角膜细胞的生长。方法：体外培养兔角膜上皮细胞和基质细胞,并接种到制备的脱细胞猪角膜基质上,倒置相差显微镜和组织学观察细胞生长情况。结果：上皮细胞能在脱细胞猪角膜基质上贴附生长,10d时可形成2～3层的复层结构。基质细胞在脱细胞猪角膜基质上贴附生长后可向材料深层迁徙。结论：制备的脱细胞猪角膜基质体外可支持兔角膜上皮细胞和基质细胞的生长。

兔骨髓间充质干细胞及人羊膜上皮细胞移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的研究

背景角膜缘干细胞缺乏可引起致盲性眼病，但传统的治疗方法疗效欠佳。最近的研究表明，骨髓间充质干细胞（BMSCs）和人羊膜上皮细胞（AECs）有分化成多种细胞的能力，但其对角膜缘于细胞缺乏的疗效仍有待研究和评价。目的观察和对比兔BMSCs和人AECs移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的治疗效果。方法将18只新西兰白兔采用随机数字表法分为羊膜基质（AS）移植组、兔BMSCs移植组和人AECs移植组，每组6只。将浸有NaOH溶液的滤纸贴附于角膜表面建立碱烧伤角膜缘干细胞缺损的动物模型。抽取兔髂窝处骨髓并收集人胎盘组织分别分离、制备兔BMSCs和人AECs，通过密度梯度离心加贴壁培养法及胰蛋白酶多次分步消化法获取兔BMSCs和人AECs，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法对培养细胞进行鉴定，再接种于人去上皮AS上，按照动物的分组分别将上述材料缝合至动物模型的角膜表面。术后28d，对各组动物的角膜新生血管（CNV）评分以及角膜混浊度评分进行对比，对角膜组织行组织病理学检查并针对角膜上皮细胞特异性标记物细胞角蛋白3（CK3）行免疫组织化学染色。结果第3代兔BMSCs接种于AS载体上12h后贴附生长，第1代人AECs接种于AS载体上48h后呈单层膜状生长，传代细胞经RT—PCR鉴定符合目标细胞的特征。兔BMSCs移植组术后28d，免疫组织化学染色结果显示，兔BMSCs移植组和人AECs移植组的角膜表面细胞CK3均呈阳性表达，而AS组CK3表达阴性。与AS移植组比较，兔BMSCs移植组和人AECs移植组CNV评分以及角膜混浊度评分明显降低，差异均有统计学意义（BMSCs：Z=-2．983，P=0．003；Z=-2．844，P=0．004；AECs：Z=-2．817，P=0．005；Z=-2．041，P=0．041）。组织病理学检查显示，AS组兔角膜组织有较多的炎性细胞生长，胶原纤维排列紊乱。兔BMSCs组术后角膜表层形成了角膜上皮样的复层结构，无明显杯状细胞，角膜基质内无新生血管生长，炎性细胞减少，胶原纤维排列更加规则，且兔BMSCs移植组角膜透明度明显优于人AECs移植组，差异有统计学意义（Z=-2．091，P=0．037），而2组间CNV评分的差异无统计学意义（Z=-0．267，P=0．789）。结论移植至兔角膜缘干细胞缺损角膜表面的兔BMSCs和人AECs均能分化为角膜上皮细胞样细胞，可抑制CNV，减轻角膜混浊。在改善角膜透明度方面，兔BMSCs优于人AECs。

聚维酮碘对角膜上皮细胞氧化损伤的影响

目的:观察聚维酮碘对角膜上皮细胞氧化损伤的影响。方法:观察不同浓度聚维酮碘对角膜上皮细胞氧化损伤的影响,取体外培养的生长良好的角膜上皮细胞按随机数字法分为:对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组。观察不同消毒时间聚维酮碘对角膜上皮细胞氧化损伤的影响,取体外培养的生长良好的角膜上皮细胞按随机数字法分为:对照组、短时间组、中等时间组和长时间组。采用ELISA检测各组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用倒置显微镜、CCK-8法检测各组细胞活性,采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:聚维酮碘浓度越高,角膜上皮细胞的MDA含量越高,SOD含量越低,细胞活性越低,凋亡率越高。聚维酮碘对角膜上皮细胞的氧化损伤呈浓度依赖性,组间有差异(均P<0.01)。聚维酮碘消毒时间越长,角膜上皮细胞的MDA含量越高,SOD含量越低,细胞活性越低,凋亡率越高。聚维酮碘对角膜上皮细胞的氧化损伤呈时间依赖性,组间有差异(均P<0.01)。结论:聚维酮碘对角膜上皮细胞有氧化损伤作用,损伤呈浓度和时间依赖性。

单纯疱疹病毒性角膜炎对角膜表层上皮细胞的影响

目的:通过活体共聚焦显微镜观察单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)患者角膜表层上皮细胞变化及其与角膜神经知觉关系的相关性。方法:诊断单眼HSK的非急性期复查患者50例(100只眼),和50例未患过HSK健康体检者(100只眼)。行角膜知觉、活体共聚焦显微镜检查并对共焦显微镜图像进行分析、记录。结果:HSK患者患眼角膜表层上皮细胞数为1287.78±102.54cells/mm^2,其密度显著低于对侧眼角膜表层上皮细胞数的2425.18±202.13cells/mm^2和健康对照者角膜表层上皮细胞数2435.23±224.3cells/mm^2(P<0.05)。HSK患者患眼角膜表层上皮细胞面积为606.62±198.23mm^2,较对侧眼角膜表层上皮细胞面积415.36±58.13mm^2和健康对照者角膜表层上皮细胞面积409.21±63.20mm^2,显著增大,差异有统计学意义(P<0.05)。HSK患者患眼角膜知觉正常8例(8只眼),角膜知觉轻度异常34例(34只眼),角膜知觉重度异常8例(8只眼),角膜知觉度与HSK患者的角膜表层上皮细胞密度呈负相关(r=-0.90,P<0.05),与HSK患者的角膜表层上皮细胞面积呈正相关(r=0.81,P<0.05)。结论:HSK导致角膜表层上皮细胞密度降低,通过细胞体积增大来代偿,这些改变与角膜神经功能改变密切相关。