腺病毒介导的hHCN4表达载体的构建及其转染人胚肾细胞

目的构建人超极化激活环核甘酸门控通道基因4(hHCN4)的重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP,并对其进行鉴定、包装。方法利用Gateway技术构建pAV-hHCN4-IRES/eGFP,酶切鉴定并进行阳性克隆测序。将构建好的质粒转染人胚肾细胞HEK293,检测病毒液滴度。结果测序符合Genbank中的hHCN4的编码序列。转染HEK293细胞见绿色荧光蛋白表达,病毒滴度为1.26×108 pfu/ml。结论成功构建了重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP。