实时荧光定量PCR检测人apoM方法的构建

目的建立检测人载脂蛋白M（apoM）的实时荧光定量PCR技术。方法采用Pri merExpress Versions2.0设计引物及Taq Man探针,检测apo M基因。将扩增的apo M基因片段纯化后与pMD19-T载体连接,克隆构建含apo M基因片段的重组质粒,作为定量检测apo M基因表达的标准品。结果PCR扩增产物经测序分析证实为apo M特异性片段。本法灵敏度为40copies/μl,线性范围为4.00×101~4.00×108copies/μl,相关系数为1.000,扩增效率E为90.5%,批间变异系数为6.38%~17.9%。结论成功建立了检测人apo M的实时荧光定量PCR方法,且该方法特异性好,灵敏度高。