解脲支原体对离体人输卵管粘膜上皮细胞的粘附作用

目的 探讨解脲支原体 (UU)对人输卵管粘膜上皮细胞的粘附力。方法 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 2年 7月选择因孕母严重疾患不宜继续妊娠而要求终止妊娠 ,行引产术的 6个月孕龄的死婴输卵管粘膜组织及人输卵管粘膜上皮细胞体外粘附模型 ,进行UU对人输卵管粘膜上皮细胞体外粘附试验 ,并通过扫描电子显微镜进行观察。结果 UU标准株和临床分离株作用后的人输卵管粘膜上皮细胞均有UU粘附 ,除散在的UU粘附外 ,还可见集结的UU粘附在输卵管的粘膜上 ;UU的形态典型 ,以呈杆形为多 ,也可见少量小球形和哑铃形等多种形态 ,另外 ,UU的大小也差异较大。结论 UU可以粘附于人输卵管粘膜上皮细胞上 ,人输卵管粘膜上皮组织可能存在UU的粘附素受体 。

雌激素与EP_(2)受体对奶牛输卵管上皮细胞合成分泌LIF mRNA的影响

目的探究雌激素与前列腺素E_(2)受体(EP_(2)受体)对奶牛输卵管上皮细胞合成分泌白血病抑制因子(LIF)mRNA的影响。方法Butaprost(EP_(2)受体激动剂,10^(-6)mol/L)、雌激素(E_(2),10-10mol/L)以及共同作用后,采用实时荧光定量PCR法检测奶牛输卵管上皮细胞LIF mRNA表达量。结果Butaprost和E_(2)对奶牛输卵管上皮细胞LIF mRNA具有双重调控作用。Butaprost和E_(2)共同作用奶牛输卵管上皮细胞对LIF mRNA起到正调控作用,且E_(2)与Butaprost组LIF mRNA的表达量普遍较E_(2)组低,2组的时效曲线趋势相似,但E_(2)组在4 h时达到最高值,E_(2)与Butaprost组在2 h时达到最大值。结论雌激素和EP_(2)受体激动剂对奶牛输卵管上皮细胞合成分泌LIF mRNA均表现为双重调控作用,及先短暂显著或极显著地促进表达作用,后转为抑制作用;雌激素和EP_(2)受体激动剂共同作用对LIF mRNA表现为正调控作用,且EP_(2)受体激动剂抑制了雌激素对奶牛输卵管上皮细胞LIF mRNA表达的升高作用。

吗啡对体外培养的人正常输卵管黏膜上皮细胞内MOR mRNA表达的影响

目的:研究吗啡对体外培养的人输卵管粘膜上皮细胞的μ阿片受体信使核糖核酸(MOR mRNA)表达的影响。方法:体外分离培养人输卵管粘膜上皮细胞,并通过免疫细胞化学的方法进行鉴定;将细胞分为对照组、吗啡组(10-4、10-5、10-6、10-7mol.L-1),通过RT-PCR的方法半定量分析吗啡对人输卵管粘膜上皮细胞MOR mRNA表达的影响。结果:吗啡组人输卵管粘膜上皮细胞中的MOR mRNA表达较对照组显著下降(P<0.05),且与吗啡浓度负相关(r=-0.966,P<0.05)。结论:外源性阿片类药物吗啡抑制人输卵管粘膜上皮细胞μ阿片受体mRNA的表达。

生殖周期中大鼠输卵管粘膜上皮纤毛细胞超微结构的变化

大鼠输卵管粘膜上皮纤毛细胞游离面纤毛密集而整齐,生殖周期中未见明显的去纤毛、复纤毛的变化;细胞内线粒体丰富,核上区线粒体的电子密度较其它部位高;在动情间期,细胞内线粒体电子密度明显降低;细胞内线粒体退变出现于动情期,于动情后期加剧;溶酶体始见于动情期,动情后期及动情间期呈增多趋势;游离核糖体丰富,并于动情间期明显增量.上述结果可能与大鼠生殖周期短暂、具有很短的非孕前期(nonprogestational phase)密切相关.

解脲支原体对兔输卵管黏膜上皮细胞致病性研究

目的 :探讨解脲支原体 (U U)对兔输卵管黏膜上皮细胞的粘附及其致病性。方法 :采用雌性大白兔作为实验对象 ,用 UU感染兔输卵管黏膜上皮细胞 ,经光学和电子显微镜观察 UU对其粘附性和致病性。结果 :UU感染后 ,兔输卵管管腔有较多渗出物 ,呈淡红染匀质状 ,黏膜层的上皮细胞轻度肿胀 ,黏膜下层有炎症细胞 (以淋巴细胞为主 )呈灶性浸润 ;在电镜下 ,UU粘附于输卵管黏膜上皮细胞上 ,同时上皮细胞游离面的纤毛互相粘连、倒状 ,纤毛细胞核膜欠完整 ,胞核染色质呈凝块状 ,胞浆内可见大量大小不等的空泡 ,无纤毛细胞顶面参差不齐 ,可见伪足样突出 ,微绒毛减少 ,胞浆内近细胞顶部有少量分泌颗粒和空泡变性 ,细胞间可见相嵌连接。结论

小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究

建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、102、0 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、507、5 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、902、40 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/LⅠ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min。原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法。传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞。组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳。用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好。原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养。

猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞及胎儿成纤维细胞的培养

本文培养了猪输卵管上皮细胞、颗粒细胞、耳上皮细胞、胎儿成纤维细胞等几种细胞 ,比较了几种细胞原代和传代培养的特点 ,发现原代培养时猪耳组织、胎儿组织消化后的单细胞和剩余细胞团块一起培养 ,其生长速度较单个细胞快。 4种细胞中颗粒细胞体积最大 ,生长速度最慢 ,传代密度须保持 2× 10 5 ml以上为宜。

山羊卵泡颗粒细胞和输卵管上皮细胞共培养对山羊体外受精胚胎发育的影响

试验共分 3组 :对照组为单独培养液 ;第 2组为单层颗粒细胞 ;第 3组为输卵管上皮细胞 ,将山羊体外受精胚胎随机放入以上 3组处理中。结果显示山羊体外受精胚胎在卵泡颗粒细胞中发育到囊胚的比率为 4 1.0 % ,在输卵管上皮细胞中发育到囊胚的比率为 5 8.1% ,而在M199培养液中为 5 .6 %。山羊体外受精胚胎分别与山羊卵泡颗粒细胞和输卵管上皮细胞共同培养时 ,均可提高山羊体外受精胚胎的发育进程。且输卵管上皮细胞比颗粒细胞能显著提高山羊体外受精胚胎的发育进程 (P <0 .0 5 )。

牦牛输卵管上皮细胞分离培养和纯化鉴定

为建立牦牛输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法,通过选取牦牛输卵管,运用机械刮取法和0.25%胰蛋白酶消化两种方法分离上皮细胞进行体外培养。对不同分离方法的培养效果比较,培养细胞进行形态学观察与传代培养、MTT比色检测细胞活力并制定生长曲线,原代及传代上皮细胞的免疫组织化学鉴定,冷冻解冻后经台盼蓝排斥试验检测活细胞数。结果表明该试验分离出的原代细胞,纯化后传代培养,经鉴定为牦牛输卵管上皮细胞,培养的细胞生长状况良好,建立了一套牦牛输卵管上皮细胞分离培养及纯化鉴定的方法。

改良人输卵管上皮细胞培养法及电镜观察

目的简化人输卵管上皮细胞分离及培养方法,提高上皮细胞纯度。方法收集19例子宫肌瘤或子宫腺肌病等手术切除的输卵管进行上皮细胞体外培养。改良酶消化法和刮取法收集人输卵管上皮细胞,采用溶血法及差速贴壁法纯化上皮细胞。观察上皮细胞生长及特征,免疫组织化学检测其纯度,扫描和透射电镜评价细胞超微结构。结果改良法培养的人输卵管上皮细胞占细胞总数>90%;电镜显示原代培养的细胞具有微绒毛及纤毛等上皮细胞特征,部分纤毛细胞的胞膜游离面有球状突起,细胞内可见含电子致密物或暗物质的囊泡。结论本改良法方法简单,培养的人输卵管上皮细胞纯度高,电镜结果有利于输卵管上皮细胞分化的研究。

生殖周期中输卵管粘膜上皮细胞的量变和质变

哺乳类动物的输卵管为一对细长管状器官,分列于子宫两侧、子宫阔韧带上缘,由外到内依次称漏斗部、壶腹部、峡部和间质部。漏斗部起始端状如伞故称伞部。输卵管是一重要的生殖器官,是受精和早期胚胎发育的场所。亦如卵巢、子宫一样其结构和功能存在周期性变化。与卵巢内卵泡发育、成熟、排卵以及黄体形成相对应,该过程被分为卵泡期、中期(排卵前、后)和黄体期。输卵管粘膜上皮主要由纤毛细胞和分泌细胞组成。

输卵管上皮细胞共培养技术对受精卵体外发育的影响及临床应用价值

目前 IVF-ET的成功率仍较低 ,主要是由于胚胎过早移植入宫腔所致。输卵管上皮细胞共培养体系可以延长胚胎的体外培养时间 ,提高发育至囊胚期的胚胎数 ,从而提高IVF-ET成功率 ,减少多胎妊娠。

发情期家兔输卵管上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定

【目的】探讨输卵管上皮细胞和基质细胞的体外分离培养方法及在激素刺激下基质细胞对上皮细胞的作用。【方法】通过差速贴壁法体外分离纯化兔输卵管上皮细胞和基质细胞;免疫组织化学染色和免疫荧光染色方法鉴定上皮细胞和基质细胞的类型和纯度;并在无胎牛血清的DMEM/F12培养液和含体积分数15%胎牛血清的DMEM/F12培养液中,分别添加不同浓度的雌激素(17β-E2)和孕激素(P4),比较上皮细胞和基质细胞的增殖情况及其对上皮细胞/基质细胞共培养的影响。【结果】体外成功地分离到兔输卵管上皮细胞和基质细胞;兔输卵管上皮细胞经鼠抗人细胞角蛋白单克降抗体(anti-CK18)免疫组织化学染色后呈阳性,细胞质呈棕色,免疫荧光染色检测其纯度在98%以上;兔输卵管基质细胞经鼠抗人波形蛋白单克降抗体(anti-Vimentin)免疫组织化学染色后呈阳性,细胞质呈棕色,免疫荧光染色检测其纯度在95%以上。17β-E2和P4均能促进兔输卵管上皮细胞和基质细胞的增殖,使其数量明显增加。基质细胞与上皮细胞共培养,上皮细胞增殖较快。【结论】差速贴壁法能够获得纯度较高的输卵管上皮细胞和基质细胞,在17β-E2和P4共同作用下,少量基质细胞能促进上皮细胞生长。

中国林蛙输卵管上皮细胞的培养及其生物学特性研究

本实验对中国林蛙(RanatemporariachensinesisDavid)的输卵管上皮细胞,成功地进行了原代及传代体外培养,并对输卵管上皮细胞的生物学特性进行观察、鉴定研究,建立了一种稳定的林蛙输卵管上皮细胞体外培养方法,为进一步研究其生物活性物质奠定了实验基础。

人输卵管液和输卵管上皮细胞培养液诱发精子的顶体反应

目的 :探讨人输卵管液和上皮细胞培养液对人精子顶体反应的诱发作用 .方法 :用Ham′sF10作对照组 ,输卵管液和上皮细胞培养液为实验组 ,分别与生育力组 (n =2 0 )和不育组(n =2 0 )的精子进行共孵育 ,用精子顶体三色染色法对顶体状态进行评价 .结果 :共孵育 3h时 ,与Ham′sF10对照组相比较 ,两种输卵管液均可显著提高生育力组和不育组的精子顶体反应率 (P<0 0 5) ,但这两种输卵管液处理的生育力组与不育组之间的精子顶体反应率没有差别 .孵育 6h后 ,输卵管上皮细胞培养液处理生育力组和不育组的顶体反应率显著高于人输卵管液组 .还观察到不育组中发生顶体反应的死精子率明显高于生育力组 .结论 :人输卵管液和输卵管上皮细胞培养液对人精子顶体反应有显著的诱发效应 ,而不育患者中有部分精子易于发生顶体反应 。

牦牛输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞的培养

分离培养牦牛输卵管上皮细胞和卵泡颗粒细胞的目的是克服体外受精中早期胚胎发育阻断,建立有利于牦牛早期胚胎体外发育的共培养体系。采集牦牛输卵管上皮细胞进行原代及传代培养,同时从卵泡液中获取颗粒细胞进行原代培养,培养过程中观察2种细胞的生长方式和形态特点。输卵管上皮细胞贴壁生长时,呈多边形,且呈单层成簇生长。培养144 h～216 h,可形成细胞单层。颗粒细胞贴壁生长时,呈现聚集生长特性,贴壁细胞形状不规则,呈放射状。培养72 h～96 h,形成颗粒细胞单层。

原代和传代培养的人输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响

为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外发育的影响，将小鼠２细胞胚胎与人输卵管上皮细胞进行体外共培养．结果显示：无论原代培养还是传代培养的人输卵管上皮细胞都可使胚胎发育率提高，发育速度加快．经传代４次以后的细胞对胚胎发育的促进作用有下降的趋势，所以传代第１至第４代是应用于共培养的最佳选择．同一代细胞中已贴壁稳定生长的细胞对胚胎发育的促进作用比刚经传代尚未贴壁的细胞大．

早期人胎输卵管上皮纤毛细胞的初步电镜观察

早期人胎输卵管上皮纤毛细胞的初步电镜观察赵卫华１）王自能１）黄以萍１）郭祖文２）刘惠敏２）（暨南大学１）医学院附属医院妇产科５１０６３０，广州；２）测试中心电镜室５１０６３２，广州）关键词：人胎；输卵管；超微结构；上皮中图分类号：Ｒ７１４．５３；Ｑ６...

培养时间和传代次数对山羊输卵管上皮细胞周期和凋亡的影响

目的利用山羊输卵管上皮细胞（OECs）探讨体外培养时间和传代次数对细胞生长的影响。方法建立山羊OECs的体外培养体系,用流式细胞术分别对半数贴壁、刚贴满（贴壁1d）、贴满3d和贴满5d,以及原代、Ⅲ代和Ⅴ代细胞分别进行细胞周期和凋亡检测。结果细胞贴满3d和传至Ⅲ代时,细胞凋亡比率较低,处于静止期（G0/G1）细胞明显降低,极性线粒体受损明显降低;培养时间延长和传代次数增加后,凋亡比率显著升高,处于增殖期（S,G2/M）的比率显著降低,极性线粒体受损明显升高。结论采用OECs培养胚胎时,细胞应控制在Ⅲ代以内,且贴满时间不超过3d。