人输卵管细胞对精子存活的影响

目的 :研究人输卵管细胞对精子存活的影响。方法 :人精子与人输卵管细胞进行体外共培养 ,并以 Earle' s平衡盐液培养的精子作为对照。每日观察精子存活情况 ,并以伊红染色检测精子的存活率。结果 :在共培养组 ,人精子存活时间明显高于对照组 ( P<0 .0 1 )。共培养组精子在 9、2 4、48h的存活率分别为 ( 90 .82± 1 .94) %、( 71 .46± 6.1 9) %、( 46.64± 5.59) % ;高于对照组相应时间的存活率 ( 83 .55± 5.3 6) %、( 46.46± 4.59) %、( 1 8.3 6± 4.1 1 ) % ,差异显著 ( P均 <0 .0 1 )。结论 :人输卵管细胞及其培养液能延长精子的存活时间。

化瘀消癥杀胚中药复方诱导人输卵管妊娠滋养细胞凋亡

目的探讨化瘀消癥杀胚中药复方(丹参、赤芍、桃仁、紫草和天花粉)对人输卵管妊娠滋养细胞增殖、凋亡的影响。方法采用CCK8法检测经中药复方水煎剂处理人输卵管妊娠滋养细胞的增殖情况,采用Hoechst染色法和流式细胞术检测48 h后细胞凋亡情况,设未经复方中药处理的细胞为空白对照组。结果与空白对照组相比,各剂量中药复方对人输卵管妊娠滋养细胞增殖均有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。48 h IC50为27.86 mg/mL;中药复方高、中、低剂量组中人输卵管妊娠滋养细胞呈现典型的凋亡形态学改变,其凋亡率分别为(24.57±1.08)%、(18.30±1.18)%和(14.37±2.64)%,与空白对照组(9.57±0.76)%相比明显增加(F=47.88,Ρ=0.00)。结论化瘀消癥杀胚中药复方可能通过抑制人输卵管妊娠滋养细胞增殖,促进细胞凋亡从而达到中止输卵管妊娠的目的。

1α,25-二羟维生素D_3对体外培养人输卵管上皮细胞VDR、CaBP-D28k表达的影响

目的:探讨1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培养人输卵管上皮细胞活性及细胞维生素D受体(VDR)、钙结合蛋白calbindin-D28k(CaBP-D28k)表达的影响。方法:以不同浓度(0,10-10,10-9,10-8,10-7mol/L)1α,25-(OH)2D3处理体外培养人输卵管壶腹部上皮细胞,分别于不同时间收集细胞。应用溴化四唑蓝比色法检测细胞活性,逆转录聚合酶链反应法、免疫印迹法检测细胞VDR、CaBP-D28k mRNA及其蛋白表达。结果:1α,25-(OH)2D3对体外培养人输卵管上皮细胞增殖无影响。以不同浓度1α,25-(OH)2D3处理细胞12 h,与对照组比较,10-7mol/L 1α,25-(OH)2D3组细胞VDR、CaBP-D28k mRNA表达显著增加(P均<0.05)。以10-7mol/L1α,25-(OH)2D3处理细胞不同时间,与对照组比较,处理6h,12h后细胞VDR、CaBP-D28k mRNA表达显著增加(P均<0.05);处理24h,48h后细胞VDR、CaBP-D28k蛋白表达显著增加(P均<0.05)。结论:在体外培养条件下,1α,25-(OH)2D3不影响人输卵管上皮细胞增殖,1α,25-(OH)2D3可能通过VDR上调人输卵管上皮细胞CaBP-D28k的表达。

吗啡对体外培养的人正常输卵管黏膜上皮细胞内MOR mRNA表达的影响

目的:研究吗啡对体外培养的人输卵管粘膜上皮细胞的μ阿片受体信使核糖核酸(MOR mRNA)表达的影响。方法:体外分离培养人输卵管粘膜上皮细胞,并通过免疫细胞化学的方法进行鉴定;将细胞分为对照组、吗啡组(10-4、10-5、10-6、10-7mol.L-1),通过RT-PCR的方法半定量分析吗啡对人输卵管粘膜上皮细胞MOR mRNA表达的影响。结果:吗啡组人输卵管粘膜上皮细胞中的MOR mRNA表达较对照组显著下降(P<0.05),且与吗啡浓度负相关(r=-0.966,P<0.05)。结论:外源性阿片类药物吗啡抑制人输卵管粘膜上皮细胞μ阿片受体mRNA的表达。

人输卵管蛋白全长cDNA克隆及真核细胞中的表达

目的:克隆人输卵管蛋白(hOviductin)全长cDNA序列,真核细胞中表达,并了解hOviductin是否与大鼠卵母细胞结合。方法:构建人输卵管黏膜上皮细胞cDNA文库,以^(32)P标记的兔输卵管蛋白全长cDNA序列为探针,自文库中筛选hOviductin全长cDNA序列。将获得的hOviductin编码区cDNA序列插入pEGFP-N1真核表达载体,转染HeLa细胞,表达分泌重组的绿色荧光蛋白(EGFP)-hOviductin,并估量其浓度。激光扫描共聚焦显微镜下观察EGFP-hOviductin与大鼠卵巢的卵丘细胞-卵母细胞复合物(COC)或去除透明带后的裸卵的结合情况。结果:所构建的cDNA文库重组率为98.5％,滴度为1.1×10~6pfu/mL。克隆所得hOviductin全长cDNA约为2500 bp,Gen-Bank的登录号为AY189737。EGFP-hOviductin在条件培液中的浓度为0.236 nmol/L,能结合在去透明带的大鼠裸卵质膜外表面,而未见其与COC结合。结论:hOviductin能在HeLa细胞中表达分泌,其分泌产物可结合于大鼠裸卵质膜外表面。

解脲支原体对离体人输卵管粘膜上皮细胞的粘附作用

目的 探讨解脲支原体 (UU)对人输卵管粘膜上皮细胞的粘附力。方法 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 2年 7月选择因孕母严重疾患不宜继续妊娠而要求终止妊娠 ,行引产术的 6个月孕龄的死婴输卵管粘膜组织及人输卵管粘膜上皮细胞体外粘附模型 ,进行UU对人输卵管粘膜上皮细胞体外粘附试验 ,并通过扫描电子显微镜进行观察。结果 UU标准株和临床分离株作用后的人输卵管粘膜上皮细胞均有UU粘附 ,除散在的UU粘附外 ,还可见集结的UU粘附在输卵管的粘膜上 ;UU的形态典型 ,以呈杆形为多 ,也可见少量小球形和哑铃形等多种形态 ,另外 ,UU的大小也差异较大。结论 UU可以粘附于人输卵管粘膜上皮细胞上 ,人输卵管粘膜上皮组织可能存在UU的粘附素受体 。