HPLC检测人重组组织因子脂化物磷脂含量

利用脂质体技术制备凝血酶原时间测定试剂人重组组织因子脂化物,建立高效液相色谱(HPLC)方法用于同时分析人重组组织因子脂化物中的主要成分磷脂酰丝氨酸(DOPS),磷脂酰胆碱(DOPC),以及人重组组织因子(TF)的半定量测定。分析测定条件:色谱柱:Waters Symmetry300 C4色谱柱(150×4.6 mm,5μm,300),流动相甲醇水,梯度洗脱,流速1 mL·min^(-1),柱温:30℃,检测波长210 nm,DOPS保留时间12.275 min,TF保留时间15.4 min,DOPC保留时间18.917 min。研究发现,采用建立的分析方法,DOPS在1.875~15 mg·mL^(-1)的浓度范围内呈良好的线性关系(R 2=0.9974),检出限为1.875 mg·mL^(-1)(S/N=3);DOPC在4.375~35 mg·mL^(-1)浓度范围内线性关系(R 2=0.9993)良好,检出限为4.375 mg·mL^(-1)(S/N=3)。在结合多次制备的人重组组织因子脂化物的产品测试中,该方法也表现出了良好的稳定性和精密度。总之,该方法可同时测定脂化物成分组成,并具有良好的检测效果,可为化妆品、制药和食品补充剂行业提供理想的参考价值。

人重组组织因子微颗粒的制备研究

采用磷脂酰胆碱(DOPC)、磷脂酰丝氨酸(DOPS)2种合成磷脂,按照6∶4、7∶3、8∶2的比例(摩尔比),分别以磷脂质量浓度为2.0%、2.5%、3.0%的混合溶液,超滤交换,制备9种双层磷脂微颗粒(MP),MP与人重组组织因子(rhTF243)脂化,得到人重组组织因子的磷脂微颗粒(rhTF243+MP)。经PT方法检测比较9种rhTF243+MP的凝血活性、稳定性及储存时间,确定最佳磷脂配比、浓度及制备工艺,制备具有稳定促凝血活性的rhTF243+MP。