钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（calcium/calmodulin dependent serine protein kinase,CASK）属于膜相关鸟苷酸激酶家族,有多种转录本.其表达具有明显的时空特异性,在胚胎期及成年组织中的分布明显不同,可通过翻译后修饰维持其活性...钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（calcium/calmodulin dependent serine protein kinase,CASK）属于膜相关鸟苷酸激酶家族,有多种转录本.其表达具有明显的时空特异性,在胚胎期及成年组织中的分布明显不同,可通过翻译后修饰维持其活性.可被CDK 5和PKA磷酸化;可通过与SUMO1结合而受到SUMO化修饰调节.CASK在神经、精子、肾脏发育过程中均发挥着重要作用,与组织器官功能的实现密不可分,其功能异常可能导致相关疾病的发生.CASK可影响神经突触的形成与功能,基因突变可造成多种神经发育异常;参与精子发育成熟、精子的顶体反应,协助受精发生;CASK单独对肾脏发育无明显影响,它可以通过与DLG1相互作用而影响肾脏发育.展开更多
目的探讨唑来膦酸对破骨细胞分化中Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca^2＋／calmodnlin．dependent protein kinaseⅡ，CaMKⅡ）与钙调蛋结合及下游活化T细胞核因子c1（nuclear factor of activation of cells-1，NFATc1）、抗酒石...目的探讨唑来膦酸对破骨细胞分化中Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca^2＋／calmodnlin．dependent protein kinaseⅡ，CaMKⅡ）与钙调蛋结合及下游活化T细胞核因子c1（nuclear factor of activation of cells-1，NFATc1）、抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acidphos phatase，TRAP）基因表达的影响，探索其抑制破骨细胞分化的分子机制。方法将小鼠RAW264．7细胞分为A、B两组，每组均以5×10^3个／孔接种于直径为30mm的培养皿中培养。A组（对照组）在NF-κB受体激活蛋白配体（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）诱导下向破骨细胞形成，B组（唑来膦酸组）在RANKL诱导培养1d后加用1×10^-6mol／L唑来膦酸处理2d。应用免疫共沉淀co．immunoprecipitation，Co-IP）及反向Co-IP对CaMKⅡ与钙调蛋白的结合进行分析；应用蛋白质印迹法及免疫荧光细胞化学检测两组NFATc1、TRAP蛋白表达，并对破骨细胞生成进行评价。结果B组新生多核破骨细胞数、牙本质吸陷窝数和面积分别为（11．3±1．5）个、（8．7±2．1）个和（5034．4＋775．4）μm^2，均显著低于A组[分别为（37．7±5．7）个、（23．0±4．0）个和（15042．7±1906．0）μm^2]（P〈0．01）。Co—IP及反向Co—IP检测显示，B组CaMKII与钙调蛋白的结合较A组分别显著下降了59．8％和50．9％（P〈0.01）；在总蛋白中，B组钙调蛋白与CaMKll蛋白较A组，分别显著降低了52．1％和51．5％（P〈0．01）。NFATc1、TRAP蛋白水平B组较A组显著下降了52．4％和38．9％（P〈0．01）；免疫荧光化学检测也显示B组蛋白表达强度较A组弱。结论唑来膦酸可以显著抑制破骨细胞分化中CaMKⅡ与钙调蛋白的结合，并下调下游NFATc1、TRAP的蛋白表达。展开更多
文摘目的探讨唑来膦酸对破骨细胞分化中Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca^2＋／calmodnlin．dependent protein kinaseⅡ，CaMKⅡ）与钙调蛋结合及下游活化T细胞核因子c1（nuclear factor of activation of cells-1，NFATc1）、抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acidphos phatase，TRAP）基因表达的影响，探索其抑制破骨细胞分化的分子机制。方法将小鼠RAW264．7细胞分为A、B两组，每组均以5×10^3个／孔接种于直径为30mm的培养皿中培养。A组（对照组）在NF-κB受体激活蛋白配体（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）诱导下向破骨细胞形成，B组（唑来膦酸组）在RANKL诱导培养1d后加用1×10^-6mol／L唑来膦酸处理2d。应用免疫共沉淀co．immunoprecipitation，Co-IP）及反向Co-IP对CaMKⅡ与钙调蛋白的结合进行分析；应用蛋白质印迹法及免疫荧光细胞化学检测两组NFATc1、TRAP蛋白表达，并对破骨细胞生成进行评价。结果B组新生多核破骨细胞数、牙本质吸陷窝数和面积分别为（11．3±1．5）个、（8．7±2．1）个和（5034．4＋775．4）μm^2，均显著低于A组[分别为（37．7±5．7）个、（23．0±4．0）个和（15042．7±1906．0）μm^2]（P〈0．01）。Co—IP及反向Co—IP检测显示，B组CaMKII与钙调蛋白的结合较A组分别显著下降了59．8％和50．9％（P〈0.01）；在总蛋白中，B组钙调蛋白与CaMKll蛋白较A组，分别显著降低了52．1％和51．5％（P〈0．01）。NFATc1、TRAP蛋白水平B组较A组显著下降了52．4％和38．9％（P〈0．01）；免疫荧光化学检测也显示B组蛋白表达强度较A组弱。结论唑来膦酸可以显著抑制破骨细胞分化中CaMKⅡ与钙调蛋白的结合，并下调下游NFATc1、TRAP的蛋白表达。
