大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英文)

Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可以用HA抗体检测.Western blot结果显示在约54 kDa处有一条特异性条带,与预期分子量大小一致.利用重组质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA可以更方便地检测到SNAT1在细胞膜上的表达与定位,为进一步研究SNAT1结构与功能奠定了基础.

钠离子依赖性中性氨基酸转运载体2特性、表达调控及功能

转运系统A载体——钠离子依赖性的中性氨基酸转运载体2(SNAT2)是近年发现的氨基酸转运感受体的典型代表,是体内主要的氮转运载体。SNAT2通过转运过程调节细胞内氨基酸浓度,进而调控细胞内氨基酸感受体的下游信号,发挥氨基酸转运载体和信号受体的双重功能,而成为近年氨基酸营养感应的研究热点。本文围绕SNAT2的分子特性、生物学特性、表达调控及其介导的氨基酸感应信号的研究进展进行综述。

SNAT1、SNAT2和SNAT4在胃肠道肿瘤中的研究进展

近年来,胃肠道肿瘤在全球的发病率和死亡率高居不下,了解其发病机制对肿瘤治疗至关重要。肿瘤细胞广泛地重编程其氨基酸代谢途径以支持其增加的生物合成和能量需求。氨基酸转运蛋白控制氨基酸在细胞脂质膜上的运输,对维持体内稳态和肿瘤代谢需求至关重要。不同的细胞状态需要与其功能需求相兼容的氨基酸转运体的表达和功能。SNAT1、SNAT2和SNAT4都属于SLC38家族系统A氨基酸转运蛋白,可以转运丙氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬酰胺等氨基酸。SNAT1、SNAT2和SNAT4在许多代谢疾病和肿瘤疾病中发挥着不可忽视的作用。本文对SNAT1、SNAT2和SNAT4在胃肠道肿瘤中的研究进展进行综述。

SNAT1和EMP1在胃癌组织和细胞株中的表达及临床意义

目的探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(SNAT1)和上皮膜蛋白1(EMP1)在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的蛋白表达情况,根据二级计分法分为低表达(<5分)和高表达(≥5分),分析两者不同表达水平与胃癌临床病理特征的关系。同时采用Western blotting检测20例胃癌组织及其癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌不同分化细胞株(未分化BGC823、低分化AGS、中分化SGC7901和高分化MKN28)中SNAT1和EMP1的蛋白水平。结果胃癌组织的SNAT1高表达率高于癌旁组织(67.1%vs.34.3%,P<0.05),而EMP1高表达率则低于癌旁组织(40.2%vs.62.7%,P<0.05)。胃癌组织中SNAT1与EMP1表达呈负相关(r=-0.272,P=0.014),且两者表达与临床分期和分化程度均有关;另外,SNAT1与年龄、淋巴结转移有关,EMP1与浸润深度有关。胃癌细胞株中的SNAT1蛋白水平均高于癌旁组织和CES-1细胞,而EMP1蛋白水平则相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNAT1表达在胃癌组织及细胞株中分别较癌旁组织和正常胃黏膜细胞株高,EMP1则相反,胃癌组织中两种蛋白均与临床分期和分化程度有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。