冬凌草甲素诱导人食管癌SHEE细胞凋亡及其线粒体改变

目的:研究冬凌草甲素(oridonin,ORI)诱导人食管癌SHEE细胞凋亡的效应及其机制。方法:用不同浓度ORI分别作用人食管癌SHEE细胞株不同时间,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率;透射电镜观察细胞超微结构及改变;原位末端标记/碘化吡啶(TUNEL/PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:ORI对SHEE细胞的生长有显著的抑制作用,64μg/ml的ORI作用24h、48h及72h对SHEE细胞生长的抑制率分别为78.7%、89.5%及91.7%;32μg/ml的ORI作用2h后,电镜下可见线粒体在细胞核出现变化之前已发生形状改变,作用8h后,线粒体内部结构消失,细胞核呈细胞凋亡的典型改变;作用24h后,流式细胞仪检测凋亡率为47.7%,细胞周期图像显示明显的凋亡峰。结论:ORI可诱导SHEE细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡途径有关。

基于Nrf2/ROS信号通路探讨岩藻多糖对食管癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻多糖对细胞增殖以及Nrf2/ROS信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对瘤体的瘤重、瘤体积及Nrf2、HO-1、NQO-1水平的影响。结果:1~16µg/mL岩藻多糖极显著抑制ECA109细胞增殖,48 h IC50为3.26µg/mL。与对照组(0.1%DMSO)相比,1、2、4µg/mL岩藻多糖处理后的ECA109细胞出现核凝聚、染色质不规则收缩、凋亡小体等明显的凋亡特征,(极)显著促进ECA109细胞凋亡,极显著下调Bcl-2表达水平,极显著上调Bax、Cleaved-caspase-3表达水平,极显著增加ROS水平,极显著降低Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05,P<0.01);Nrf2过表达能显著下调岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖效果,显著下调ROS水平,显著上调Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05)。体内实验显示,50、100 mg/kg岩藻多糖极显著抑制瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体Nrf2、HO-1、NQO-1水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控Nrf2/ROS信号通路有关。

低氧条件下食管癌来源外泌体调控巨噬细胞M2型分化与自噬的机制研究

目的:探究低氧条件下食管癌外泌体对巨噬细胞分化和自噬的影响及机制。方法:50 ng/ml PMA诱导THP-1分化为M0型巨噬细胞,超速离心法提取并鉴定HEEC、Eca-109、缺氧诱导的Eca-109细胞分泌的外泌体(记为HEEC-exo、NomEca-109-exo、Hypo-Eca-109-exo),激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞对外泌体的摄取,将PBS、HEEC exo、Nom-Eca-109-exo、HypoEca-109-exo分别与M0型巨噬细胞共孵育,流式细胞术检测各组细胞CD14和CD206表达,ELISA检测细胞因子IL-1β、IL-12、TNF-α、Arg1、IL-10和TGF-β,qRT-PCR检测各组细胞CCR7、TLR2、CD206和CD14表达,Transwell检测各组细胞迁移和侵袭,Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62表达及PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平。结果:提取的外泌体符合结构和生物学特征。相比于PBS组,与Nom-Eca-109-exo、Hypo-Eca-109-exo孵育后,各组M0型巨噬细胞CCR7、TLR2表达显著降低、CD206和CD14表达显著增加,IL-1β、IL-12、TNF-α分泌显著减少,Arg1、IL-10和TGF-β分泌显著增加,LC3-Ⅱ、Beclin-1表达显著增加,p62表达显著降低,细胞迁移和侵袭数显著增加,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平显著升高。相比于NomEca-109-exo组,Hypo-Eca-109-exo组细胞CD206和CD14表达显著增加,Arg1、IL-10和TGF-β分泌显著增加,LC3-Ⅱ、Beclin-1表达显著增加,p62表达显著降低,细胞迁移和侵袭数显著增加,PI3K、Akt、mTOR的磷酸化水平显著升高。结论:低氧诱导的食管癌细胞外泌体可显著促进M2型巨噬细胞分化和自噬,进而促进肿瘤迁移和侵袭,其机制为激活PI3K/Akt/mTOR信号通路。

食管癌患者血清外泌体通过Wnt/β-catenin和PI3K-AKT信号通路促进癌细胞增殖及迁移

目的:采用食管癌患者外周血来源的外泌体干预食管癌ECA109细胞,检测肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移及Wnt/β-catenin和PI3K-AKT信号通路蛋白的表达变化,探讨食管癌外泌体在肿瘤细胞发展进程中的作用。方法:超高速离心法提取食管癌患者外周血血清中的外泌体,与食管癌ECA109细胞共培养,检测细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的变化;Western-blot检测AKT、β-catenin蛋白的表达。结果:透射电镜、粒径测定、标志蛋白结果证实提取的食管癌患者血清外泌体符合其鉴定标准;与空白细胞组相比,食管癌外泌体干预后食管癌ECA109细胞增殖、迁移能力显著提高,G 2+S期细胞比例升高,细胞凋亡比例降低,统计学差异显著;食管癌外泌体组AKT蛋白磷酸化表达水平较空白细胞组明显升高,β-catenin蛋白表达显著降低。结论:食管癌来源的外泌体具有促进肿瘤细胞增殖与迁移、抑制细胞凋亡的作用,其机制可能与PI3K-AKT信号通路关键激酶AKT的激活有关,提示在肿瘤发展进程中肿瘤来源外泌体的作用不容忽视。

α-细辛醚上调细胞色素C及Caspase-3表达影响食管癌Eca-109细胞的生物学行为

目的:分析α-细辛醚上调细胞色素C(cytochrome C,cytC)及Caspase-3表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响。方法:将食管癌Eca-109细胞随机等量分为4组,即低、中及高剂量(分别给予25、50及100 mg/L的α-细辛醚),另随机取等量细胞加入等体积培养液作为空白组,培养48 h后通过平板克隆实验检测4组细胞增殖情况,Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况,RT-qPCR及Western Blot法检测细胞中cytC及Caspase-3 mRNA及蛋白表达。结果:(1)细胞克隆数在空白组最高,低剂量组显著高于高剂量组;凋亡率在空白组最低,低剂量组显著低于高剂量组。(2)4组细胞迁移至小室下的细胞数空白组>低剂量组>中剂量组>高剂量组。(3)CytC及Caspase-3蛋白在高剂量组表达显著高于空白组及低剂量组,且中剂量组表达高于空白组。(4)CytC及Caspase-3 mRNA的表达:高剂量组>中剂量组>低剂量组>空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:α-细辛醚抑制Eca-109细胞增殖及侵袭,并且可能通过上调cytC及Caspase-3表达促进调亡。

LINC00240调节miR-124-3p/UHRF1轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨LINC00240调节miR-124-3p/环指域泛素样蛋白1(UHRF1)轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测食管鳞状癌(ESCC)组织与癌旁组织,ESCC细胞系(ECA109、TE-13、EC9706和KYSE-150)与正常食管上皮HET-1A细胞中LINC00240、miR-124-3p、UHRF1 mRNA表达水平;以ECA109细胞为研究对象,分组分别为shRNA-NC组(转染shRNA阴性对照)、sh-LINC00240组(转染LINC00240 shRNA)、sh-LINC00240+miR-124-3p-inhibitor组(共转染sh-LINC00240与miR-124-3p-inhibitor)、sh-LINC00240+inhibitor-NC组(共转染sh-LINC00240与inhibitor-NC),并以未经处理的ECA109细胞为对照组,Western Blot检测P21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、UHRF1蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭及迁移;双荧光素酶验证miR-124-3p与LINC00240、UHRF1关系。通过裸鼠注射ECA109细胞建立裸鼠移植瘤实验,单细胞悬液(4×10^(6)细胞/ml)用一次性无菌注射器皮下注射到裸鼠背部,并依次分为模型组、NC组、干扰LINC00240组,分离肿瘤,分析肿瘤质量及成瘤个数。结果ESCC组织及细胞中LINC00240、UHRF1 mRNA表达显著增加,miR-124-3p表达显著降低(P<0.05)。sh-LINC00240组增殖率、侵袭与迁移数、LINC00240、MMP-2、UHRF1 mRNA及蛋白表达较对照组、shRNA-NC组显著降低,P21、miR-124-3p表达显著增加(P<0.05);sh-LINC00240+miR-124-3p-inhibitor组增殖率、侵袭与迁移数、MMP-2、UHRF1 mRNA及蛋白表达较sh-LINC00240+inhibitor-NC组显著增加,P21、miR-124-3p表达显著降低(P<0.05),LINC00240表达差异无统计意义(P>0.05)。miR-124-3p与LINC00240、UHRF1具有靶向关系。干扰LINC00240组较模型组、NC组肿瘤质量、成瘤个数显著减少(P<0.05)。结论干扰LINC00240可抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,可能与上调miR-124-3p/UHRF1轴有关。

细胞焦亡的机制及其在食管癌中的研究进展

细胞焦亡是由半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶介导的程序性细胞死亡。半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶活化后刺激Gasdermin家族蛋白裂解,释放出炎症介质等细胞内容物,诱发强烈的炎症反应。焦亡现象存在于多种疾病中,并且参与调控肿瘤进展。食管癌是消化系统常见恶性肿瘤,因其症状隐匿,临床中确诊病例大多为晚期,存在预后不良、生存期短、生活质量差等问题。现有研究表明,触发焦亡可改善耐药现象,且细胞焦亡可作为新药开发的靶点及指导预后评估。因此,该文通过对细胞焦亡分子机制及细胞焦亡在食管癌中的研究进展进行综述,希冀为临床用药起指导作用。

双硫仑联合紫杉醇对食管癌细胞增殖、侵袭能力的抑制作用及其机制

目的探讨双硫仑联合紫杉醇对食管癌细胞增殖、侵袭能力的抑制作用并分析其机制。方法以不同浓度双硫仑(0、10、20、40μmol/L)分别作用于食管癌细胞株TE-1和TE-10,CCK-8法测算细胞活力,筛选得到双硫仑最佳作用浓度为20μmol/L。将TE-1、TE-10食管癌细胞分别分为对照组(不加药物正常培养)、双硫仑组(20μmol/L双硫仑)、紫杉醇组(0.5μmol/L紫杉醇)、双硫仑+紫杉醇组(20μmol/L双硫仑+0.5μmol/L紫杉醇)。采用MTT法观察细胞增殖能力,流式细胞术观察细胞凋亡率,Transwell实验观察细胞侵袭能力,RT-qPCR法检测细胞α微管蛋白mRNA,Western blotting法检测细胞α微管蛋白、Bcl-2蛋白。结果TE-1及TE-10细胞增殖率对照组>双硫仑组>紫杉醇组>双硫仑+紫杉醇组,TE-1及TE-10细胞凋亡率对照组<双硫仑组<紫杉醇组<双硫仑+紫杉醇组(P均<0.05),TE-1及TE-10细胞穿膜细胞数对照组>双硫仑组>紫杉醇组>双硫仑+紫杉醇组(P均<0.05)。TE-1细胞α微管蛋白mRNA表达对照组>双硫仑组>紫杉醇组>双硫仑+紫杉醇组,TE-10细胞α微管蛋白mRNA表达对照组>双硫仑组>紫杉醇组、双硫仑+紫杉醇组;TE-1及TE-10细胞α微管蛋白、Bcl-2蛋白表达对照组>双硫仑组>紫杉醇组>双硫仑+紫杉醇组(P均<0.05)。结论双硫仑联合紫杉醇可增强对食管癌细胞增殖、侵袭能力的抑制作用,其机制可能与降低细胞中微管蛋白表达、促进细胞凋亡有关。

miR-203a-3p对食管癌细胞侵袭迁移能力的影响及其与Survivin的靶向调控关系

目的观察微小RNA(miR)-203a-3p对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响并分析其与Survivin的靶向调控关系。方法收集对数生长期的食管癌细胞TE-1及正常食管黏膜上皮细胞HEEC,RT-qPCR法检测细胞miR-203a-3p、Survivin mRNA。双荧光素酶报告基因检测法分析miR-203a-3p与Survivin的靶向调控关系。将TE-1细胞分为对照组、miR-203a-3p模拟组、miR-203a-3p抑制组及阴性对照组。miR-203a-3p模拟组转染miR-203a-3p mimic,miR-203a-3p抑制组转染miR-203a-3p inhibitor,阴性对照组转染miR-203a-3p NC,对照组不进行转染,RT-qPCR法验证转染效率。采用MTT法检测转染后2、12、24、36、48 h的细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果食管癌细胞中miR-203a-3p mRNA表达低于正常食管黏膜上皮细胞,Survivin mRNA表达高于正常食管黏膜上皮细胞(P均<0.05)。TargetScan数据库分析显示,Survivin基因在3′UTR端存在7个连续的可以与miR-203a-3p互补的核苷酸序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染Survivin-WT和miR-203a-3p mimic质粒的TE-1细胞荧光素酶活性低于其他细胞(P<0.05)。培养12、24、36、48 h时细胞活力miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05);细胞迁移距离及侵袭细胞数miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05)。结论miR-203a-3p高表达可抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向负调控Survivin有关。

新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查在早期食管癌筛查中的应用研究

目的评价新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查在早期食管癌筛查中的诊断效能。方法纳入四川省人民医院、南充市中心医院、盐亭县人民医院符合条件的体检人群,进行胃镜检查和新型食管细胞采集器检查,以胃镜-病理学结果为金标准,评价该检查在不同食管病变中的诊断效能;并绘制ROC曲线评价其对早期食管癌的筛查效能。结果新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查对高级别上皮内瘤变筛查能力最好(灵敏度90.91%,特异度99.737%);对于早期食管癌的筛查ROC曲线下面积为0.946(0.899~0.994),灵敏度为84.20%,特异度为96.20%,约登指数0.804。结论新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查对各食管病变筛查的特异度超过90%,适合成为早期食管癌的筛查手段。

川陈皮素对食管癌KYSE150细胞存活、侵袭和凋亡的影响及机制实验研究

目的:探究川陈皮素对食管癌KYSE150细胞存活、侵袭及凋亡的影响及可能的机制。方法:将培养至对数生长期的KYSE150细胞分为对照组(常规培养)、顺铂组(0.5μg/ml顺铂)、川陈皮素低(10μg/ml)、中(20μg/ml)、高(40μg/ml)浓度组。采用MTT法检测KYSE150细胞存活率。采用Transwell实验检测KYSE150细胞侵袭能力。采用流式细胞术检测KYSE150细胞凋亡率。采用荧光定量PCR法检测KYSE150细胞Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、ROCK2 mRNA表达。采用Western bolt法检测KYSE150细胞RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果:与对照组比较,顺铂组及川陈皮素低、中、高浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平降低,凋亡率升高(均P<0.05)。与顺铂组比较,川陈皮素低、中浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平升高,凋亡率降低(均P<0.05)。川陈皮素高浓度组和顺铂组上述指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。川陈皮素低、中、高浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平依次降低,凋亡率依次升高(均P<0.05)。结论:川陈皮素能够抑制KYSE150细胞的存活和侵袭,促进凋亡,其机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

培养间充质干细胞的上清液对食管癌细胞ECA109生物学行为的影响

目的:探讨脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)培养的上清液对食管癌细胞ECA109增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:培养人脐带MSCs,提取过滤脐带MSCs培养的上清液与食管癌细胞ECA109共培养,通过细胞划痕实验和CCK-8实验检测ECA109细胞迁移、增殖能力;采用流式细胞测定技术检测ECA109细胞凋亡情况;利用RT-PCR和Western blot检测相关通路中ERK、AKT、PI3K的表达水平。结果:划痕实验48 h,MSCs上清液共培养组ECA109细胞划痕面积为(17.157±1.425)μm^(2),明显高于对照组划痕面积(14.500±0.563)μm^(2)(P=0.04);CCK-8结果显示,48 h后MSCs上清液培养组ECA109细胞OD值(1.069±0.254)显著低于对照组(1.718±0.520)(P=0.037);流式细胞术检测结果显示MSCs上清液共培养组细胞早期凋亡率(12.36±2.47)%高于对照组(7.23±0.86)%;G2+S期MSCs上清液共培养组细胞比例(39.82±1.01)%相比对照组(55.17±9.60)%显著减少。RT-PCR结果显示,MSCs上清液共培养组AKT mRNA表达量(0.35±0.01)明显低于对照组(1.00±0.05)(P=0.004);Western blot可以看出,MSCs上清液共培养组ERK、AKT蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义。结论:MSCs上清液抑制食管癌细胞ECA109的增殖和迁移能力,促进ECA109细胞的凋亡,且ERK和AKT的蛋白质表达水平均下降。

新型食管细胞采集器在蒙古族与汉族食管癌高危人群中的应用研究——蒙古族与汉族细胞学检查结果危险因素分析

目的验证新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查对食管癌的筛查效能,调查分析蒙古族与汉族细胞学检查结果及高危因素。方法(1)选取就诊于包头医学院第二附属医院的1196例食管癌高危人群,采集食管细胞,完善内镜检查及食管的黏膜活检,以上消化道内镜活检组织病理学为金标准,验证细胞学检查的诊断效能;(2)选取包头地区参与食管癌筛查的9256例汉族人群及572例蒙古族人群作为研究对象,以问卷调查形式收集受试者一般资料,饮食习惯、生活习惯等信息,通过新型食管细胞采集器采集食管细胞,采用Logistic回归分析汉族与蒙古族细胞学阳性的危险因素。结果(1)新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查具有较好的食管癌筛查能力,灵敏度(92.86%)、特异度(99.58%)、PPV(72.22)、NPV(99.92%)、PLR(221.10)、NLR(0.07)、约登指数(0.92)、ROC曲线下面积为0.961(0.923~1.0),截断值取2.50时,灵敏度为92.90%,特异度为88.20%;(2)蒙古族人群细胞学阳性率2.27%高于汉族人群的1.12%(P<0.05);饮酒者占比、热烫饮食习惯人群占比、食用腌制食品人群占比均高于汉族人群(P<0.05);经Logistics回归分析得出汉族人群的危险因素为,性别(OR=0.381,95%CI:0.256~0.568)、年龄(OR=1.091,95%CI:1.067~1.116)、饮酒(OR=1.693,95%CI:1.150~2.492)、吸烟(OR=2.127,95%CI:1.439~3.143);蒙古族人群的危险因素为性别(OR=0.174,95%CI:0.047~0.638)、年龄(OR=1.124,95%CI:1.052~1.200)、饮酒(OR=3.945,95%CI:1.074~14.489)。结论①新型食管细胞采集器-食管脱落细胞学检查对食管癌有较好的筛查效能;②蒙古族人群中性别、年龄、饮酒、热烫饮食习惯是导致细胞学诊断阳性的主要风险因素,汉族人群中性别、年龄、饮酒、吸烟是导致细胞学诊断阳性的主要风险因素。

基于加权基因共表达网络鉴定食管癌浸润性淋巴细胞关键节点基因

目的分析食管癌肿瘤浸润性淋巴细胞抗原受体区的基因表达,利用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)方法筛选食管癌的关键基因,为相关研究提供数据支撑。方法选择安阳市肿瘤医院70例食管癌患者的组织标本进行基因测序,同时,从NCBI SRA数据库下载部分转录组数据。通过R语言的WGCNA模块构建食管癌共表达网络,并鉴别与食管癌关联性最强的共表达模块,关键基因由Centiscape筛选。结果网络分析的结果表明,MEgrey60、MEpurple和MEblack模块与食管癌高度相关。依据蛋白—蛋白相互作用关系,本研究从每个模块中筛选了关联度最高的20个关键基因。这些模块中的基因主要涉及内肽酶抑制剂活性和特异性RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、组蛋白结合、抗氧化活性、硫氧还蛋白过氧化物酶活性、ATP酶活性和蛋白质转运蛋白活性等生物学功能。结论本研究筛选出的食管癌浸润性淋巴细胞的关键基因,可为食管癌的诊断、治疗和免疫治疗提供靶点和理论依据。

长链非编码RNA UBE2Q1-AS1对食管癌细胞增殖和迁移的调节作用及机制实验研究

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)UBE2Q1-AS1对食管癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨UBE2Q1-AS1发挥调节作用的分子机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测食管癌EC9706、Eca109、KYSE-510、TE-13细胞和永生化食管上皮HET-1A细胞中UBE2Q1-AS1的表达。将KYSE-510细胞分为si-NC组和si-UBE2Q1-AS1组,分别转染si-NC质粒和si-UBE2Q1-AS1质粒。集落形成实验检测各组KYSE-510细胞增殖活性。细胞划痕实验检测各组KYSE-510细胞的迁移能力。双荧光素酶报告系统验证UBE2Q1-AS1与微小RNA(miR)-377-3p的靶向关系。RT-qPCR检测各组KYSE-510细胞中miR-377-3p相对表达量。蛋白质印迹法(Western blot)检测各组KYSE-510细胞中同源盒蛋白A1(HOXA1)、纤连蛋白(Fibronectin)、叉头相关转录因子C2(FOXC2)、粒状蛋白质2同源物(GRHL2)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的相对表达量。结果:与HET-1A细胞比较,UBE2Q1-AS1在食管癌细胞中表达均升高(P<0.01)。si-UBE2Q1-AS1组KYSE-510细胞增殖活性低于si-NC组(P<0.01)。si-UBE2Q1-AS1组KYSE-510细胞迁移能力低于si-NC组(P<0.01)。UBE2Q1-AS1与miR-377-3p间存在靶向关系(P<0.01)。si-UBE2Q1-AS1组KYSE-510细胞中miR-377-3p表达水平高于si-NC组(P<0.01)。与si-NC组比较,si-UBE2Q1-AS1组KYSE-510细胞中HOXA1、Fibronectin、FOXC2蛋白表达降低,GRHL2和E-cadherin蛋白表达升高(均P<0.01)。结论:在食管癌细胞中,UBE2Q1-AS1表达上调,敲低UBE2Q1-AS1可能通过调节miR-377-3p/HOXA1轴抑制食管癌细胞增殖和迁移。

放疗联合免疫治疗复发性食管癌的疗效及对T淋巴细胞、肿瘤标志物的影响

目的探讨放疗联合免疫治疗复发性食管癌的疗效及对T淋巴细胞、肿瘤标志物的影响。方法选取2020年9月—2023年9月新疆医科大学附属肿瘤医院胸腹放疗科采用三维适形调强放疗(IMRT)联合卡瑞利珠单抗治疗的复发性食管癌患者33例纳入观察组,另选取同期医院行单纯性IMRT的复发性食管癌患者33例纳入对照组。2组均治疗6周后评估患者临床疗效;于治疗前、治疗6周后比较2组T淋巴细胞亚群[CD3细胞(CD3^(+))、CD4细胞(CD4^(+))、CD8细胞(CD8^(+))]、肿瘤增殖相关因子[血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转录因子阴阳1(YY1)]、肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCC)];记录并比较2组治疗期间不良反应发生情况。结果观察组总有效率高于对照组(96.97%vs.75.76%,χ^(2)/P=4.632/0.031);治疗6周后,2组CD3^(+)、CD4^(+)高于治疗前,CD8^(+)低于治疗前,且观察组高于/低于对照组(t/P=4.598/<0.001,3.317/<0.001,4.664/<0.001);治疗6周后,2组血清VEGF、MMP-9、YY1、CA125、CEA、SCC低于治疗前,且观察组低于对照组(t/P=7.229/<0.001,6.388/<0.001,6.157/<0.001,5.322/<0.001,5.116/<0.001,2.479/0.016);治疗期间,2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论放疗联合免疫治疗能更有效地降低血清肿瘤增殖相关因子及肿瘤标志物水平,提高临床疗效,改善患者免疫功能,且不会显著增加不良反应发生风险。

食管癌患者循环肿瘤细胞与临床特征和全身炎症标志物的关系及其预后价值

目的构建一个列线图模型来评估食管癌(EC)患者根治性手术(RS)后的生存率,并通过限制性立方样条(RCS)来评估循环肿瘤细胞(CTC)、全身炎症标志物和预后之间的非线性关系。方法测定RS后采集的500例EC患者血液中CTC计数,计算系统免疫炎症指数(SII)、中性粒细胞与淋巴细胞和血小板的比值(NLPR)、全身炎症聚集指数(AISI)和全身炎症反应指数(SIRI),分析临床数据与这些指标的相关性。评估CTC计数和全身炎症标志物对总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的预测价值。结果CTC与临床特征(新辅助治疗、术前合并症、病理分级、脉管侵犯、神经侵犯和肿瘤大小)和炎症标志物(SII、NLPR、SIRI、AISI)存在较强的相关性。单因素和多因素Cox回归分析显示:新辅助治疗(P=0.031)、术前合并症(P=0.028)、治疗方式(P<0.001)、病理分级(P=0.006)、脉管侵犯(P=0.012)、神经侵犯(P=0.012)、SII(P<0.001)、NLPR(P=0.008)、AISI(P<0.001)、CTC(P<0.001)为独立的预后影响因素。T分期(P=0.036)、N分期(P=0.002)和脉管侵犯(P<0.001)与PFS有相关性。RCS图显示CTC、SII、NLPR、SIRI和AISI与预后呈非线性关系。Kaplan-Meier生存曲线显示,CTC、SII、NLPR、SIRI和AISI值较低的患者OS和PFS较长(P<0.05)。结论CTC、SII、NLPR和AISI可能是EC患者行RS的临床预后的有力指标,结合这些因素的列线图和RCS有助于临床实践中患者预后的个体化判断。

IFN-γ表达与食管癌患者细胞免疫水平及预后的相关性分析

目的:探讨干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)与食管癌患者细胞免疫水平及预后的相关性。方法:收集40例食管癌患者外周血标本,流式细胞仪检测标本中IFN-γ的浓度及CD4+T/CD8+T细胞比值;利用TISIDB数据库分析IFN-γ表达与免疫调控基因的关系;收集119例食管癌患者临床预后信息,利用Kaplan-Meier生存曲线分析IFN-γ表达与食管癌患者生存预后的相关性。结果:外周血中IFN-γ的浓度和CD4+T/CD8+T细胞比值呈负相关(R2=0.1662,P=0.009);食管癌组织中IFN-γ表达与免疫负调控基因CD274(rho=0.449,P<0.001)和PDCD1(rho=0.778,P<0.001)的表达呈正相关;IFN-γ高表达于食管癌组织(P<0.001),且IFN-γ高表达组患者的总生存(overall survival,OS)显著低于IFN-γ低表达组(P=0.008)。结论:IFN-γ在食管癌组织中的表达与细胞免疫水平呈负相关,同时可作为食管癌患者预后不良的指标。

食管癌术后重症肺炎患者血清肺表面活性物质相关蛋白质-D、高迁移率族蛋白B1和中性粒细胞与淋巴细胞比值水平变化及检测意义

目的:探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、肺表面活性物质相关蛋白质-D(SP-D)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在食管癌术后重症肺炎(SP)患者中的水平变化及检测意义。方法:选取接受手术治疗的食管癌患者257例,根据手术治疗后是否发生SP将患者分为SP组(124例)和对照组(133例)。比较两组血清SP-D、HMGB1和NLR水平。记录SP组患者28 d内预后情况,根据28 d内生存情况将SP组患者分为生存组(104例)和病死组(20例)。比较两组一般资料及实验室指标,采用Logistic回归分析食管癌术后SP患者预后影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析NLR、SP-D及HMGB1对食管癌术后SP患者28 d内病死风险的预测价值。结果:SP组血清SP-D及HMGB1和NLR水平高于对照组(均P<0.05)。病死组NLR、SP-D及HMGB1水平高于生存组(均P<0.05)。NLR、SP-D及HMGB1是食管癌术后SP患者病死的影响因素(均P<0.05)。NLR、SP-D及HMGB1预测食管癌术后SP患者28 d内病死风险的AUC分别为0.744、0.763、0.715,而三者联合检测的AUC更高(均P<0.05)。结论:食管癌术后SP患者NLR、SP-D及HMGB1水平升高,且与患者预后有关,三者联合检测有助于提升对患者病死风险的预测价值。

食管癌患者术前PLT、白细胞数、NLR及PLR水平对预后的预测价值

目的探究术前血小板(PLT)、白细胞数、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)及外周血细胞与淋巴细胞比值(PLR)水平预测食管癌预后的价值。方法选取100例食管癌患者,于食管癌根治术前检测患者PLT、白细胞数、NLR及PLR水平。对患者进行为期2年的随访,根据患者预后分为复发组(36例)和未复发组(64例)。比较不同预后患者上述指标水平。多因素COX回归分析影响食管癌预后的因素。绘制ROC曲线评估PLT、白细胞数、NLR及PLR对食管癌患者预后的预测价值。结果复发组PLT水平明显低于未复发组(P<0.05),白细胞数、PLR、NLR明显高于未复发组(P<0.05)。多因素COX分析显示,NLR、PLT、PLR及白细胞数均为影响食管癌预后的因素(P<0.05)。绘制ROC曲线评估PLT、白细胞数、PLR、NLR预测食管癌患者预后的价值显示,单独检测时,NLR敏感度最高,PLT特异度最高,联合检测时敏感度、特异度最高。结论术前白细胞数、PLR、NLR、PLT水平与食管癌患者预后有关,四者联合检测预测食管癌预后的价值更高。