体外高效诱导人MDSC分化和扩增的方法探索

为探索体外稳定、高效诱导人髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)分化与扩增的实验方法,为体外研究人MDSC功能及作用机制提供新的实验技术支持,收集健康人全血后采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC,贴壁法纯化单核细胞。用人GM-CSF和IL-6(各10、20、40和80 ng/mL)刺激PBMC或单核细胞4、7、14和21 d,与PBMC共培养3 d;采用FACS检测CD33^(+)MDSC、T细胞增殖和CD3^(+)IFN-γ^(+)T细胞比例。结果显示,常规方法仅诱导PBMC或单核细胞分化为较低比例的CD33^(+)MDSC;改善培养方法,用人GM-CSF和IL-6(各80 ng/mL)刺激单核细胞14 d(每4~5天换1次液),可诱导出较高比例的CD33^(+)MDSC,且CD33^(+)MDSC表现出显著抑制T细胞增殖及分泌IFN-γ的功能。该研究提示,改良后的培养方法可高效诱导人单核细胞分化成为CD33^(+)MDSC,CD33^(+)MDSC具有较强的免疫抑制功能。