SAMP8小鼠在不同发育阶段海马和额叶中人类同源衰老相关基因的表达

目的探讨13个与人类同源的衰老相关基因在不同月龄快速老化小鼠海马和额叶中的表达及变化,从中筛选出与脑老化最相关的基因。方法采用SAMP8快速老化小鼠,以同月龄SAMR1为对照,运用RT-PCR技术,观察SAMP8幼年组2周龄、成年组8月龄、老年组13月龄海马和额叶中13个同源衰老相关基因的表达及变化。结果13个基因在各组小鼠海马和额叶中均有表达。SCN2b基因在快速老化小鼠额叶的表达在幼年组与成年组和老年组之间比较有统计学意义(P<0.05),其它基因的表达无统计学意义。结论被调查的13个基因可能参与维持海马和额叶的生理功能,SCN2b在额叶衰老进程中可能发挥作用。

SAMP8小鼠在不同发育阶段海马和额叶中与人类同源衰老相关基因的表达及变化

为探讨13个与人类同源的衰老相关基因在不同月龄快速老化小鼠海马和额叶中的表达及变化,以筛选出与脑老化最相关的基因,采用SAMP8快速老化小鼠,以同月龄SAMR1为对照;运用RT-PCR技术,观察SAMP8幼年组2周龄、成年组8月龄、老年组13月龄海马和额叶中13个同源衰老相关基因的表达及变化。结果显示:13个基因在各组小鼠海马和额叶中均有表达。SCN2b基因在快速老化小鼠额叶的表达在幼年组与成年组和老年组之间比较明显上调(P<0.05),其它基因的表达无统计学意义。提示被调查的13个基因可能参与维持海马和额叶的正常生理功能。但仅SCN2b可能在额叶衰老进程中发挥作用。

天麻素对快速衰老小鼠大脑组织衰老相关基因表达的影响

目的研究天麻素对快速衰老小鼠(SAM)海马及其大脑额叶皮质中衰老相关基因表达的影响。方法采用RT-PCR方法对给予天麻素的SAM-P/8小鼠海马及额叶皮质中衰老相关基因的mRNA表达变化进行分析。结果所检测的衰老相关基因在SAM-P/8小鼠的海马和额叶皮质中均有表达。成年鼠应用天麻素组与成年组比较,在海马组织中SCN2BmRNA表达增加,Sortilin-1mRNA表达减少,MAP1BmRNA和RAP2AmRNA在额叶皮质中表达增加。老年鼠天麻素组MAPKK4、Sortilin-1和Rab6A在海马和额叶皮质中表达均比老年组减少。结论天麻素在分子水平上可能是通过调节部分衰老相关基因的表达水平来发挥其抗衰老作用,但对于衰老晚期,基因调控抗衰老的作用不明显。

间充质干细胞外泌体对缺血性脑卒中大鼠神经功能恢复的影响

目的探讨间充质干细胞外泌体(MSCs-EXO)对缺血性脑卒中大鼠神经功能恢复的影响。方法大鼠骨髓间充质干细胞原代培养,超速离心法提取其MSCs-EXO,大脑中动脉夹闭模型(MCAO)法制作大鼠缺血性脑卒中模型,MSCs-EXO经鼻给药,设为MSCs-EXO组,通过改良神经功能缺损评分(mNSS)和错步试验评估其神经功能恢复情况,并与未治疗模型组(MCAO组)做对比。PKH26标记MSCs-EXO并结合免疫荧光染色观察其在缺血半暗带(IP)中的分布,荧光定量PCR及Western blot检测IP区域脑组织中PTEN的表达水平,并与正常大鼠及MCAO组大鼠进行对比。结果MSCs-EXO治疗组的神经功能恢复高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色显示标记外泌体可以进入IP区域神经细胞,荧光定量PCR及Western blot检测显示MSCs-EXO治疗组及MCAO组中PTEN水平均较正常升高,但MSCs-EXO治疗组的PTEN水平低于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MSCs-EXO能够促进缺血性脑卒中大鼠的神经功能恢复,这可能与其下调IP区域PTEN表达水平相关。

降钙素基因相关肽对脑缺血大鼠脑血流的影响

大鼠侧脑室注入降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）或等体积甘露醇为对照，用非损伤阻抗法测定一侧颈总动脉结扎后ＣＧＲＰ对脑血流的影响。结果表明，一侧颈总动脉结扎后，脑血流量降低３４％，此时侧脑室给予ＣＧＲＰ即刻使脑血流图波幅增加，５分钟时达高峰，比注药前平均增加６５％，与甘露醇对照相比差别非常显著（Ｐ＜０．０１），４０分钟时作用开始减弱，１００分钟后作用消失。与颈总动脉结扎前相比，在脑血供不足时，ＣＧＲＰ增加脑血流的作用更为明显。侧脑室预先给予β受体阻断剂心得安，未能阻断上述ＣＧＲＰ的作用。

参麦注射液对脑出血大鼠神经细胞凋亡相关基因表达影响的实验研究

目的 :观察参麦注射液对大鼠脑出血后神经细胞凋亡相关基因的影响。方法 :采用Rosenberg法复制大鼠脑出血模型 ,测定脑出血后大鼠海马CA1区神经细胞病理形态结构及其Bcl 2基因、Bax基因表达 ;结果 :参麦注射液减少大鼠脑出血后海马CA1区锥体细胞凋亡数目 ,显著增加Bcl 2基因表达 ,降低Bax基因表达 ,使BaxmR NA/bcl 2mRNA比率下降。结论 :参麦注射液能调节凋亡基因 ,减少大鼠脑出血后神经细胞的凋亡。

同源盒基因Lhx3和Lhx4在成年大鼠缺血性脑损伤后的表达变化

目的 揭示发育基因Lhx3和Lhx4参与成年动物中枢神经损伤修复的过程。 方法 线栓法制作局灶性脑缺血模型 ,阻断成年大鼠右侧大脑中动脉 ,缺血 2h后再灌注 ,分别于损伤再灌注后 3d、7d、14d和 2 1d取左右侧大脑皮层组织 ,采用RT PCR结合HPLC测定方法 ,相对定量分析上述不同损伤时相同源盒基因Lhx3和Lhx4在损伤侧与对照侧皮层运动神经元mRNA表达量的改变。 结果 正常成年大鼠大脑皮层运动神经元中 ,Lhx3和Lhx4基因均维持一定的表达水平 ,在局灶性脑缺血再灌注 3d、7d、14d后 ,大脑皮层运动神经元损伤侧的Lhx3和Lhx4基因表达均有明显改变 ,但变化规律不同。其中Lhx3在损伤后mRNA表达量较自身对照侧明显降低 ,而Lhx4的mRNA表达量较自身对照侧明显升高 ,该结果与成年大鼠坐骨神经夹伤后 ,脊髓中Lhx3和Lhx4的基因表达变化规律基本一致。 结论 LIM同源盒基因家族中的Lhx3和Lhx4基因不仅在神经元发育过程中起重要调控作用 ,而且可能参与成年动物中枢神经损伤的修复过程。

丹参对新生期大鼠缺氧缺血性脑损伤神经肽Y_(1-36)和降钙素基因相关肽的影响

目的 :观察丹参对新生期大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBI)后不同时间血浆、桥延脑神经肽Y1 36 和降钙素基因相关肽免疫活性物质 (ir NPY、ir CGRP)含量的影响。方法 :7日龄大鼠随机分为HIBI组(A组 )、HIBI加丹参治疗组 (B组 )和假手术组 (C组 ) ,每组按不同时间各分成 4个小组。在新生期大鼠HI BI后即刻及其后每 12h向腹腔注射丹参注射液 ,每次 0 5ml。采用放射免疫分析法观察HIBI后即刻、12、2 4、4 8h血浆和桥延脑ir NPY、ir CGRP含量的变化。结果 :HIBI后不同时间血浆ir NPY、ir CGRP含量均显著升高 ;桥延脑ir CGRP、ir NPY含量不同程度升高或降低。应用丹参注射液后血浆、桥延脑ir NPY水平的上升被部分逆转。结论 :中枢及外周神经肽Y1 36 和降钙素基因相关肽参与HIBI的病理生理过程 ;丹参部分逆转新生大鼠HIBI后ir NPY水平的异常升高 ,可能是丹参促进损伤后脑功能恢复的作用途径之一。

高压氧预处理对宫内缺氧缺血大鼠脑组织内皮素及降钙素基因相关肽含量的影响

目的 :观察高压氧 (HBO)预处理对宫内缺氧缺血大鼠脑组织中内皮素 (ET)及降钙素基因相关肽 (CGRP)含量的影响 ,探讨HBO预处理对宫内缺氧缺血大鼠的神经保护作用及机制。方法 :孕 16dSD大鼠 ,随机分为剖宫产对照组 ,模型组 ,HBO预处理组各 5只 ,预处理组孕鼠产前HBO预处理 ,临产时建立宫内缺氧缺血模型 ,测定生后48h子鼠脑组织ET、CGRP的含量。结果 :模型组大鼠脑组织ET水平升高 ,CGRP水平下降 ,与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;HBO预处理组与模型组比较ET水平下降 ,CGRP水平升高 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :HBO预处理能纠正缺氧缺血损伤时ET、CGRP出现的代谢失衡 ,对脑血管舒缩功能产生调节作用 ,使脑对缺氧缺血产生耐受。

汉黄芩素干预糖尿病脑梗死模型大鼠的神经损伤

背景:汉黄芩素是黄芩根中提取的一种黄酮类化合物,既往研究表明汉黄芩素对脑缺血再灌注损伤有保护作用,还能降低糖尿病小鼠的血糖及其并发症,但其在糖尿病脑梗死中的作用及机制还不清楚。目的:探究汉黄芩素对糖尿病脑梗死大鼠神经损伤的影响,并探究其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、汉黄芩素低、中、高剂量组和汉黄芩素高剂量+RhoA激活剂组,每组10只。除对照组外,其余组通过腹腔注射链脲佐菌素和大脑中动脉闭塞法构建糖尿病脑梗死大鼠模型,汉黄芩素低、中、高剂量组分别灌胃10,20,40 mg/kg汉黄芩素,汉黄芩素高剂量+RhoA激活剂组灌胃40 mg/kg汉黄芩素并腹腔注射10 mg/kg溶血磷脂酸,对照组和模型组给予等量生理盐水,1次/d,连续7 d。末次给药结束后,各组大鼠进行神经功能缺损评分,检测血糖水平,TTC染色检测脑梗死体积,苏木精-伊红染色观察脑组织病理变化,ELISA试剂盒检测脑组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和丙二醛、超氧化物歧化酶水平,Western blot检测脑组织中RhoA、ROCK2蛋白表达。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组大鼠神经元结构严重受损,细胞坏死、变性;神经功能缺损评分、血糖水平、脑梗死体积升高(P<0.05);脑组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、丙二醛水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶水平下降(P<0.05);脑组织中RhoA、ROCK2蛋白表达升高(P<0.05);(2)与模型组相比,汉黄芩素低、中、高剂量组神经元损伤改善,细胞变性和坏死减少;神经功能缺损评分、血糖水平、脑梗死体积下降(P<0.05);脑组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、丙二醛水平下降(P<0.05),超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05);脑组织中RhoA、ROCK2蛋白表达下降(P<0.05);(3)与汉黄芩素高剂量组相比,汉黄芩素高剂量+RhoA激活剂组明显抑制糖尿病脑梗死大鼠上述指标的改善(P<0.05)。结果表明:汉黄芩素能够改善糖尿病脑梗死大鼠血糖水平,减轻脑梗死和神经损伤,其作用机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑cAMP反应元件结合蛋白mRNA表达的影响

目的探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响。方法用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA表达。结果假手术组右侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA有明显表达,缺血再灌注组右侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA阳性产物吸光度值减少,CGRP组缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA表达的吸光度值比缺血再灌注组增高(P<0.05)。结论CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质CREB mRNA的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能通过激活CREB的转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现。

阿魏酸钠对局灶性脑梗死大鼠内皮素、降钙素基因相关肽变化的影响

目的:探讨局灶性脑梗死急性期应用阿魏酸钠对内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法:随机将成熟雄性大鼠分为正常对照组、假手术组、手术非干预组、手术干预组4组,手术组按时间随机分为30min、1h、2h、6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d、14d11个亚组;采用改良Longa法建立局灶脑梗死模型,应用放射免疫法测定各组大鼠不同时间点脑组织和血浆中ET、CGRP含量。结果:大脑中动脉梗死后30min时ET无明显变化,1h起,较假手术组显著升高(P<0.01);CGRP在各个时间点均较假手术组降低(P<0.01);二者具有相关性,脑组织与血浆中r分别为-0.415、-0.350;手术干预组ET、CGRP与非干预组比较差异有显著性(P<0.01),脑组织与血浆中r分别为-0.602、-0.590。结论:阿魏酸钠可有效地抑制ET升高及CGRP降低,从而起到脑保护的作用。

高氧液对脑缺血大鼠内皮素及降钙素基因相关肽含量的影响

目的 :探讨高氧液对缺血大鼠脑细胞的保护作用。方法 :40只 Wistar大鼠 (雌雄各半 )随机分成高氧液组、对照组、模型组和假手术组 ,每组各 10只。阻断 3条动脉造成急性不完全性脑缺血 ,制备动物模型。制模成功后 ,高氧液组立即以 10 ml· kg- 1 · h- 1 的速率经尾静脉输入高氧液 ,对照组以同种方法输入等量生理盐水 ,模型组和假手术组不治疗。制模后 1小时各组动物经腹主静脉取血 ,然后立即断头取脑 ,测定内皮素 (ET)和降钙素基因相关肽 (CGRP)含量。结果 :高氧液可明显降低脑缺氧后 ET水平 ,而升高 CGRP水平 ,纠正 ET、CGRP失衡。结论 :高氧液对缺血大鼠脑细胞有明显保护作用。

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D 半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。 方法 用D 半乳糖制备脑老化模型 ,皮下注射APP17肽治疗D 半乳糖脑老化小鼠 ,3个月后取脑组织做Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。 结果 D 半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染 ,而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少 ,染色淡 ;D 半乳糖小鼠海马内Bcl 2、CREB、AKt阳性细胞数目少 ,染色淡 ;而正常小鼠及APP17肽保护的D 半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。 结论 促进凋亡的Bax、AIF在D 半乳糖小鼠海马表达增加 ;抑制凋亡的Bcl 2、CREB、AKt在D 半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D 半乳糖脑病小鼠脑内Bcl 2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达 。

电针对局灶性脑缺血大鼠10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白和神经生长相关蛋白-43表达的影响

目的探讨电针对胡须体觉皮层局灶性脑缺血大鼠10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)和神经生长相关蛋白43(GAP-43)表达的影响。方法 24只成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)及电针组(n=8)。于造模成功后第3天,电针组予电针百会(DU20)和风府(DU16)30 min,每天1次。造模前1 d,给药后3 d、7 d和14 d,应用角落测试进行行为学检测;给药后14 d采用Western blotting检测梗死周边区PTEN、GAP-43蛋白的表达。结果电针组向右转的次数较模型组显著下降(P<0.001)。模型组GAP-43表达较假手术组升高(P<0.05),电针组较模型组升高(P<0.05)。模型组PTEN表达与假手术组无显著性差异(P=0.460),电针组较模型组显著降低(P<0.001)。结论电针可能通过抑制PTEN和增加GAP-43的表达促进脑缺血后神经再生和功能恢复。

胃扩张对大鼠脑、脊髓和肌间神经丛Fos蛋白和降钙素基因相关肽表达的影响

背景:功能性消化不良是一种常见疾病,越来越多的证据显示其发病与内脏神经敏感性增高有关。目的:通过测定大鼠伤害性胃扩张后脑、脊髓和肌间神经丛Fos蛋白和降钙素基因相关肽(CGRP)的表达,探索内脏刺激传入的途径和方式。方法:24只成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为3组:实验组(12只)、手术对照组(6只)和空白对照组(6只)。实验组和手术对照组先植入胃内气囊。48h后,实验组接受反复的气囊扩张[80mmHg(1mmHg=0.133kPa)],2h后处死全部实验动物,立即取材。采用免疫组化法观察脑、脊髓和肌间神经丛Fos蛋白和CGRP的表达。结果:实验组杏仁核、延髓和胸髓Fos蛋白的表达较其他两组显著增强(P均<0.01),肌间神经丛的Fos蛋白表达3组间无显著差异。实验组延髓、胸髓CGRP表达较其他两组显著增强(P<0.05和P<0.01)。延髓和胸髓中Fos蛋白与CGRP的表达显著相关(rs分别为0.794和0.728,P均<0.01)。结论:胃扩张刺激可以兴奋皮层下中枢,CGRP在内脏刺激信号的传入过程中起重要作用。

新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织内皮素变化及降钙素基因相关肽的保护作用

目的探讨新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)脑组织内皮素(ET)的变化及降钙素基因相关肽(CGRP)的保护作用。方法7日龄SD大鼠制成缺氧缺血性脑病(HIE)模型,随机分组处理,1.CGRP治疗组:于模型制备成功后即给予CGRP 3μg/(kg.d),腹腔内注射,共3 d;2.生理盐水对照组:每天给予同剂量生理盐水腹腔内注射;3.正常对照组(假手术组);仅给予暴露左颈总动脉。各组于3 d后断头取脑,采用放射免疫法检测脑组织ET含量。结果生理盐水对照组脑组织ET含量最高(93.41±12.73)ng/L,与正常对照组(57.58±6.31)ng/L比较有显著差异(P<0.01);而CGRP治疗组(61.68±6.83)ng/L,与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论CGRP能抑制HIE减轻血管收缩作用,改善脑循环,从而抑制ET的致损伤作用。

丙烯腈对大鼠脑组织中与衰老相关指标的影响

目的 探讨丙烯腈 (ACN)染毒大鼠脑组织中与衰老相关指标水平变化。方法 大鼠经不同浓度ACN (低剂量 5 0mg/L;中剂量 2 0 0mg/L;高剂量 30 0mg/L)饮用水染毒 12周后 ,测定其脑组织中谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)和胆碱酯酶 (ChE)水平的变化。结果 中、高剂量染毒组大鼠脑组织中GSH、SOD、MDA及ChE的变化情况与普通对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,但与老年对照组大鼠变化相似。结论 ACN染毒在较高剂量下引起的大鼠脑组织中与衰老相关指标 (GSH ,SOD ,MDA ,ChE)的变化已达到老年对照组大鼠的水平。

自发性高血压鼠脑底动脉降钙素基因相关肽能神经纤维的分布

应用免疫组织化学ABC法和神经交点计数技术,观察了10只自发性高血压大鼠和10只正常血压大鼠脑底动脉降钙素基因相关肽(CGRP)能神经纤维的分布。结果证明:在自发性高血压鼠的大脑前动脉、大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉壁上均可见CGRP免疫反应阳性纤维,纤维呈细曲线状,多呈网状走行;与正常血压鼠脑底血管同名动脉比较,其密度明显减少。正常血压鼠脑底血管CGRP能神经纤维多呈环形走行。高血压鼠的CGRP能神经纤维的分布随着高血压的发生而明显减少,提示CGRP能神经纤维的减少与高血压的发生、发展具有一定的关系。

大鼠全脑缺血后纹状体边缘区内降钙素基因相关肽和谷氨酸脱羧酶表达的变化

为研究全脑缺血再灌流后纹状体边缘区内降钙素基因相关肽 (CGRP)和谷氨酸脱羧酶 (GAD)等神经递质的表达变化 ,在两侧颈总动脉和椎动脉结扎造成的大鼠全脑缺血模型上 ,用免疫组织化学方法观察纹状体边缘区内 CGRP和GAD等免疫阳性反应的分布。结果显示正常大鼠脑纹状体内有 CGRP和 GAD阳性神经纤维的分布 ,全脑缺血再灌流 1天后 ,边缘区中的 CGRP免疫阳性反应逐渐增强 ,在第 5天时达到最高峰。全脑缺血再灌流后 1天 ,可见边缘区部位的 GAD免疫阳性反应增强 ,但以后边缘区内的 GAD免疫反应阳性物质逐渐减少 ,缺血再灌流 5天后 ,边缘区中 GAD免疫阳性反应的表达基本消失。研究结果表明全脑缺血后边缘区中的 CGRP反应逐渐增强 。