探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞的生长抑制作用、诱导凋亡作用及其机制研究

目的:探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响。方法:MTT法测定姜黄素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,采用流式细胞仪测定姜黄素不同浓度下的CNE-2Z细胞凋亡情况,Western Blot测定NF-κB蛋白的表达。结果:姜黄素能影响CNE-2Z细胞的NF-κB蛋白表达,使NF-κB蛋白表达水平降低,说明姜黄素对CNE-2Z的增殖和转移有一定的影响。姜黄素对CNE-2Z的作用效果受作用时间和浓度影响,其对CNE-2Z细胞24 h的IC50数值为(43.514~45.435)μmol/L,48 h的IC50数值为(8.366~13.11)μmol/L,72 h的IC50数值为(5.658~8.469)μmol/L。结论:姜黄素能够通过NF-κB蛋白的表达,来抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖与侵袭。姜黄素浓度越高,作用时间越长,CNE-2Z细胞增殖抑制效果越好。

青天葵总黄酮对人鼻咽癌CNE-2荷瘤裸鼠皮下肿瘤的抑制作用

目的:研究青天葵总黄酮(TFNF)对BALB/c裸鼠人鼻咽癌细胞皮下种植模型中TGF-β1/Erk/MAPK通路的调控作用。方法:BALB/c裸鼠皮下接种CNE-2细胞(1.0×107细胞/ml)建立鼻咽癌荷瘤模型,苏木精-伊红染色(HE)行病理判断,免疫组化法(IHC)观察细胞周期调节蛋白-67(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶(Erk)、p-Erk、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-MAPK的蛋白表达水平。试剂盒法评估肾脏、肝脏、脾脏中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果:与模型组比较,高剂量TFNF显著抑制荷瘤小鼠肿瘤体积与质量,显著降低Ki67(55.19%)、PCNA(46.65%)表达水平,提高肾脏、肝脏、脾脏中SOD水平至3.88、2.98、3.71U/mgprot,降低肾脏、肝脏、脾脏的MDA水平至2.19、1.05、2.85nmol/mgprot。TFNF可降低肿瘤组织中TGF-β1(47.36%)、p-Erk/Erk(81.13%)、p-MAPK/MAPK(19.80%)的蛋白表达水平。结论:TFNF可调控TGF-β1/Erk/MAPK通路抑制肿瘤生长,并减轻荷瘤裸鼠主要脏器的氧化损伤发生。

BDH2抑制MIF影响鼻咽癌对巨噬细胞的招募

目的:研究3-羟基丁酸脱氢酶2(BDH2)和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在鼻咽癌(NPC)中的表达特征及其对肿瘤免疫微环境中巨噬细胞浸润的影响。方法:使用BDH2过表达质粒转染5-8F细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测BDH2的转录水平。使用GEO数据库和蛋白免疫印迹法(western blotting)验证BDH2和MIF的表达差异。通过酶联免疫吸附法和比色法分别检测细胞内MIF和乙酰乙酸的表达。通过免疫组化分析BDH2和MIF在NPC和正常鼻咽上皮组织中的表达水平,使用连续切片染色和相关性分析评估MIF表达与M1、M2型巨噬细胞浸润的关系。结果:过表达BDH2显著增加了5-8F细胞内乙酰乙酸含量(P<0.01),且MIF表达下调。GEO数据库分析和免疫组化结果表明NPC中BDH2的表达显著下调(P<0.0001),MIF的表达显著上调(P<0.01)。在连续切片分析中,高表达MIF的NPC组织内M1巨噬细胞浸润减少(P<0.0001)。结论:NPC中BDH2-MIF轴通过抑制M1巨噬细胞的浸润调控免疫微环境,可能是NPC潜在的治疗靶点。

IFIT3对鼻咽癌CNE-2R细胞侵袭转移及EMT的影响

目的探讨干扰素诱导的具有四肽重复序列3(interferon induced protein with tetratricopeptide repeats 3,IFIT3)在鼻咽癌CNE-2R细胞中的表达及其对细胞侵袭、转移和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)能力的影响。方法采用RT-qPCR和Western blot检测IFIT3在鼻咽癌细胞CNE-2R和正常鼻咽上皮细胞NP69中的表达水平。鼻咽癌CNE-2R细胞分别感染IFIT3 shRNA的3个序列LV1、LV2、LV3,并设立阴性对照组(NC组);利用RT-qPCR和Western blot检测上皮表型E-cadherin及间质表型N-cadherin和Vimentin的表达,采用划痕实验及Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果IFIT3在鼻咽癌CNE-2R细胞中的mRNA和蛋白表达水平均较NP69细胞显著上调(均P<0.001)。IFIT3在LV1组、LV2组和LV3组中的mRNA和蛋白表达水平均低于NC组(均P<0.001),且以LV2组和LV3组的表达水平最低。与NC组相比,LV2组和LV3组的细胞迁移率显著下降,迁移和侵袭细胞数显著减少,E-cadherin蛋白表达水平显著升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著降低(均P<0.001)。结论IFIT3在鼻咽癌CNE-2R细胞中表达上调,沉默IFIT3后CNE-2R细胞的侵袭、转移能力以及EMT显著被抑制。

生物钟基因Per1对鼻咽癌细胞CNE2侵袭迁移及与JAK2-STAT3通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨生物钟基因Per1对鼻咽癌细胞CNE2侵袭转移及上皮-间质转化(EMT)的影响,并阐述其与JAK2-STAT3信号通路相关蛋白的关系。方法:实时荧光定量PCR法(qPCR)以及蛋白质印迹法(WB)检测CNE2细胞中Per1基因及蛋白水平;构建Per1基因过表达及干扰慢病毒载体并转染CNE2细胞;实验分为过表达组(Per1-OE)、过表达对照组(Per1-OENC)、干扰组(Per1-sh)、干扰对照组(Per1-shNC);利用划痕愈合、Transwell实验检测Per1基因对各组细胞侵袭、迁移能力;WB检测Per1基因对EMT相关蛋白:E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的影响;WB检测Per1基因对JAK2-STAT3信号通路相关蛋白表达的影响。结果:WB和PCR结果显示:与人永生化鼻咽上皮细胞NP69相比,Per1在鼻咽癌细胞CNE2中表达降低。通过构建Per1基因过表达及干扰慢病毒载体,有效地上调和下调了CNE2中Per1在转录及蛋白水平的表达,并分别成功筛选出稳转细胞株。划痕实验结果显示:Per1-OE组较Per1-OENC组24 h、48 h细胞迁移率均明显下降(P=0.04,P=0.01),Per1-sh组较Per1-shNC组24 h、48 h细胞迁移率均明显升高(P=0.01,P=0.005)。Transwell实验结果显示:Per1-sh组较Per1-shNC组穿过Transwell小室细胞数明显增加(P=0.02),Per1-OE组较Per1-OENC组穿过Transwell小室细胞数明显减少(P=0.001)。WB结果显示:JAK2、p-JAK2、STAT3蛋白在各组细胞中表达无统计学差异(P>0.05)。Per1-sh组较Per1-shNC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达下降,E-cadherin表达升高(P<0.05),Per1-OE组较Per1-OENC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达均升高,E-cadherin表达下降(P<0.05)。结论:过表达Per1基因后可抑制鼻咽癌细胞CNE2侵袭、迁移,使N-cadherin、Vimentin、p-STAT3蛋白表达下降,E-cadherin表达增加;干扰Per1基因后则相反,进而表明Per1基因在鼻咽癌细胞CNE2中可能扮演着抑癌基因的角色;同时我们推测Per1基因与p-STAT3的表达有一定的相关性,但其具体作用机制有待进一步研究。

高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的研究

目的:研究高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设置空白对照组和实验组(分别加入不同浓度的高良姜素处理CNE2细胞),采用CKK-8法检测CNE2细胞增殖的抑制效果,采用流式细胞仪检测CNE2细胞周期和凋亡的影响。结果:高良姜素能抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,而随其浓度增加CNE2细胞阻滞于G0/G1期,S期、G2/M期细胞减少,同时细胞凋亡率也随其浓度增高而增加,呈浓度依赖性。结论:高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞株有抑制增殖作用,对细胞周期过程产生阻滞作用,并可以诱导细胞凋亡。

茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响

目的 观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法 用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果 ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程，使Ｇ１ 期细胞明显增多，Ｓ期细胞减少，细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时，ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡，其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论 ＴＰ１９９８１２０４ 收稿，１９９９０７３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬，女，副研究员，硕士生导师，研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂，使细胞停滞于Ｇ１ 期，阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期；同时亦可诱导细胞凋亡。

DNA-PK的活性与鼻咽癌细胞株CNE1/CNE2放射敏感性的关系(英文)

本文土要研究DNA依赖的蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)与鼻咽癌细胞放射敏感性之间的关系。克隆形成实验分析鼻咽癌细胞CNE1/CNE2的剂量存活曲线,Signa TECT DNA-PK试剂盒检测DNA-PK活性,免疫荧光及激光显微共聚焦分析放疗前及放疗后15min、1h、6h、12h和24h CNE1/CNE2细胞中Kus及DNA-PKcs的亚细胞定位,Western blot分析两株细胞中Kus蛋白的表达。结果显示:CNE1细胞在每个剂量点的存活分数均高于CNE2细胞;同时发现放疗前后CNE1细胞中的DNA-PK活性也均高于CNE2细胞,但两株细胞中Ku70/Ku80蛋白表达无明显差异;放疗可使DNA- PK活性增加,且各个检测时间点CNE1细胞增加的幅度大于CNE2细胞;DNA-PK亚基可同时定位于胞浆和胞核,但主要位于胞核,细胞照射后Ku70、Ku80和DNA-PKcs从胞浆转运到胞核。结果表明:DNA-PK活性更高可能足CNE1细胞较CNE2细胞更能抵抗放射的原因之一;放疗所致DNA-PK活性增高可能与DNA-PK亚基从胞浆转运到胞核有关,而与Ku蛋白表达的总量无关。

人鼻咽癌顺铂耐药细胞系(CNE2/DDP)及其亲代细胞(CNE2)的比较基因组杂交研究

背景与目的:比较基因组杂交(comparativegenomichybridization,CGH)是一种在荧光原位杂交(FISH)技术上发展起来的,用于检测两个基因组间相对DNA拷贝数的改变(缺失或扩增),并将这些变化在染色体上进行定位的分子细胞遗传学方法。为全面了解鼻咽癌耐药细胞与药物敏感细胞在基因组DNA水平上可能存在的差异,以及这种差异在肿瘤耐药性产生中的意义,我们用CGH技术对鼻咽癌耐药细胞系(CNE2/DDP)和其亲代药物敏感细胞(CNE2)的基因组DNA进行检测和分析。方法:提取两种癌细胞及正常胎盘组织的基因组DNA,以随机引物法进行荧光标记(CNE2/DDP和CNE2DNA以Fluorescein-12-dUTP标记,探针显绿色荧光;正常胎盘组织以Tetramethylrhodamine-5-dUTP标记,探针显红色荧光),将标记的DNA探针同时与正常淋巴细胞分裂中期染色体进行杂交,杂交信号在荧光显微镜下经CCD(chargecoupleddevice)摄像装置摄取,并通过荧光数字图像分析系统(quipsCGHprogram)进行数据处理,计算两种荧光的比率并绘制分析图。结果:CNE2细胞存在广泛的染色体改变,主要表现在1q,3q,5p,6p,7p,8q,9q,11p,12q,19q的扩增和4q,12p,13p,14p,15p,18,20q,21p,22的缺失。从CNE2诱导的耐药细胞系CNE2/DDP恒定表现为8q,19q的扩增和8p的缺失,其它的染色体均未发现明显异常的?

肝素增强佛波酯对人鼻咽癌CNE2细胞的作用 :上调c-jun ,p53 ,p21的表达(英文)

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与佛波酯联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用。结果 :肝素与佛波酯联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强的作用 ,同佛波酯单独应用于诱导细胞凋亡相比 ,低剂量的肝素与佛波酯联合应用后发现 :TUNEL阳性细胞明显增多 ;G1 期细胞阻止 ,S期细胞明显减少 ,凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化更加明显 ;c-jun ,p53 ,p2 1基因表达明显升高 ,而c-fos在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素增强佛波酯对人鼻咽癌细胞的抗增殖及促凋亡 ,这可能与c-jun ,p53 ,p2

芒果甙对鼻咽癌细胞系CNE2细胞增殖、凋亡及周期的影响

目的探讨芒果甙治疗鼻咽癌的可行性。方法以不同浓度的芒果甙作用于人鼻咽癌CNE2细胞,检测细胞抑制率、凋亡率及细胞周期。结果芒果甙作用后CNE2细胞抑制率及凋亡率均明显增加,且呈浓度及时间依赖性,P均<0.05;芒果甙作用72h后,随药物浓度增加,CNE2细胞出现S期阻滞;浓度>100μmol/L时出现G2/M期阻滞。结论芒果甙能明显抑制CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有S期和G2/M期阻滞效应,具有潜在抗肿瘤作用。

CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的检测

为了探讨具有不同放射敏感性的CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的情况,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和PCR产物直接测序方法(荧光标记的ddNTPs循环测序),对CNE1、CNE2中ATM的PI3K关键区域进行突变检测。结果表明,所测CNE1、CNE2中的ATM/PI3K区序列中没有发生突变,认为鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2间内在的放射敏感性的差异可能与ATM/PI3K区基因突变不相关。

二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其可能的分子机制

背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳与Western blot检测DADS抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白的表达。结果:MTT结果显示,50、100、200及400μmol/LDADS作用CNE2细胞48h,抑制率分别为3.66%、14.25%、29.66%及61.28%,呈浓度依赖性(P<0.05)。形态学观察发现,DADS处理24h后,部分CNE2细胞变圆,体积明显缩小,胞质强嗜酸性,核固缩、深染,核染色质积聚至核膜周边,呈现凋亡细胞形态学改变。流式细胞术分析显示,50、100、200和400μmol/LDADS作用24h,凋亡率分别为(10.8±1.3)%、(14.8±1.1)%、(21.7±2.0)%及(29.8±2.6)%,呈浓度依赖性诱导CNE2细胞凋亡(n=3,P<0.05)。200及400μmol/LDADS分别作用CNE2细胞24h后,DNA凝胶电泳出现典型梯形条带。Western blot检测显示,50、100、200和400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,Bcl-2蛋白与β-Actin的灰度值比分别是1.92±0.21、1.21±0.18、0.89±0.14及0.41±0.09,与对照组(2.24±0.26)比较,差异有显著性(P<0.05);Bax蛋白与β-Actin的灰度值比分别是0.78±0.14、1.12±0.19、1.54±0.22及2.08±0.27,与对照组(0.33±0.08)比较,差异有显著性(P<0.05);随浓度的增加,Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调。200、400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,与对照组相比,Caspase3酶原蛋白条带变细并且可见到蛋白裂解产物,表明DADS可以促进Caspase3的活化。结论:DADS具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调导致Bcl-2/Bax比值下降,促进Caspase3的活化有关。

肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌CNE2细胞的增殖与凋亡的影响(英文)

目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细胞的增殖及凋亡具有显著的影响。低剂量的肝素与叉孢素联合应用 :细胞生长抑制率显著高于叉孢素单独应用 ;细胞核浓缩 ,核碎裂等形态学变化更加明显 ;TUNEL阳性细胞明显增多 ;凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化也清晰可见 ;c-myc ,bax基因的表达明显高于叉孢素单独应用 ,而bcl- 2在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素与叉孢素对人鼻咽癌细胞在抗增殖及促凋亡方面有协同作用 ,这可能与c -myc ,bax的表达上调有关 .

二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。

表皮生长因子受体调控的人鼻咽癌细胞系CNE2分泌蛋白质的筛选

为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfactor-α,TGF-α)刺激CNE2细胞24h作为实验组,对照组CNE2细胞不用TGF-α刺激.超滤法脱盐并浓缩两组细胞的培养上清制备分泌蛋白,采用双向凝胶电泳技术(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)分离两组细胞的分泌蛋白,PDquest图像分析软件识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白.建立了实验组和对照组CNE2细胞分泌蛋白的2-DE图谱,图像分析识别了22个差异蛋白质点,质谱鉴定了8个非冗余蛋白质,其功能涉及肿瘤细胞侵袭转移、细胞凋亡和增殖,为进一步揭示EGFR在NPC发病中的作用及其机制奠定了基础.

甘草素通过影响鼻咽癌CNE-2细胞的自噬增强其放疗敏感性

目的:探讨甘草素(licorice)对鼻咽癌CNE-2细胞放疗增敏的影响及其作用机制。方法:体外培养构建放射抵抗性的鼻咽癌细胞株CNE-2-RR。MTT细胞实验检测不同浓度的甘草素对鼻咽癌细胞增殖活性的影响,透射电镜检测甘草素处理鼻咽癌细胞后自噬体的变化情况,Western blotting检测甘草素对鼻咽癌细胞自噬蛋白水平的影响,彗星实验检测不同组鼻咽癌细胞DNA损伤修复情况,流式细胞术检测鼻咽癌细胞株凋亡率的变化。结果:成功构建放射抵抗细胞株CNE-2-RR,20 mmol/L甘草素对鼻咽癌细胞的最高抑制率为(58.86±5.02)%。甘草素处理鼻咽癌CNE-2-RR细胞后胞内自噬体数量增加,线粒体和细胞核形态异常;细胞中自噬体蛋白LC3-II水平升高、LC3-I水平降低(P<0.05);甘草素作用CNE-2-RR细胞后彗星尾距长度大于对照组,表明对DNA损伤修复能力明显降低。甘草素作用导致CNE-2-RR细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:甘草素通过影响鼻咽癌CNE-2-RR细胞的自噬行为及DNA修复能力增强其对放疗的敏感性。

芒果甙诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其对细胞内钙含量的影响

目的研究芒果甙在体外对人鼻咽癌细胞系CNE2细胞凋亡和细胞内钙离子(IECa2+)含量的影响。方法采用流式细胞术检测不同浓度芒果甙作用24、48、72h后诱导CNE2细胞凋亡和IECa2+含量的影响。结果(1)芒果甙作用24、48、72h后,不同浓度的芒果甙均可诱导CNE2细胞凋亡,随着芒果甙浓度的升高和作用时间的延长而增高;(2)不同浓度芒果甙作用24、48、72h后,CNE2细胞内IECa2+含量显著上升,且随着芒果甙浓度的升高和作用时间的延长而增高。结论芒果甙能显著诱导CNE2细胞凋亡;CNE2细胞内IECa2+含量的升高在芒果甙诱导CNE2细胞凋亡中起到重要作用。

运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质

【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离。运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱,寻找表达有差异的蛋白质点。从凝胶上切下差异蛋白质点,通过基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】图像分析显示,EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点。通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点,EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调,蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体ι链表达下调。【结论】EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括:①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生,同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡;②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达,并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长。

鹅不食草提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长抑制作用的实验研究

目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸乙酯提取物对该细胞的凋亡作用。结果:鹅不食草石油醚和乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2有一定的抑制,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线,其作用机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。结论:鹅不食草乙酸乙酯提取物可能是其抗鼻咽癌作用的有效部位之一。