姜黄素对非小细胞肺癌A459细胞增殖及CDH13甲基化状态的影响

目的观察姜黄素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞DNA甲基化转移酶(Dnmts)活性和抑癌基因人H-钙黏蛋白(CDH13)的影响,探讨姜黄素的去甲基化机制。方法将A549细胞分为两组,观察组加入40μmol/L姜黄素和培养液,对照组仅加入培养液。采用MTT法检测两组细胞增殖能力,RT-PCR方法检测CDH13 mRNA表达,甲基化特异性PCR(MSP)检测CDH13启动子CpG岛的甲基化状态,酶活性连续循环比色法检测Dnmt1、Dnmt3b活性。结果观察组和对照组的细胞增殖OD值分别为0.638±0.184、0.859±0.040,观察组低于对照组(P<0.05)。两组CDH13 mRNA的相对表达量分别为0.64±0.09、0.43±0.12,观察组高于对照组(P<0.05)。对照组出现甲基化扩增条带,无去甲基条带;观察组除甲基化条带外,出现去甲基化条带。观察组和对照组每mg核蛋白中Dnmt1的活性分别为(0.153±0.016)、(0.770±0.014)μmol/min,Dnmt3b的活性分别为(0.137±0.020)、(0.179±0.013)μmol/min,观察组Dnmt1、Dnmt3b活性均较对照组下降(P均<0.05)。结论姜黄素可通过降低Dnmts活性来抑制CDH13的甲基化状态,从而抑制A549细胞增殖。