固相微球法人IgG放射免疫分析试剂盒的研制

采用氯胺 T法标记的人 12 5I- Ig G与人 Ig G(标准品或样品中人 Ig G)竞争结合人 Ig G微球抗体 ,直接离心分离 ,用于测定样品中的人 Ig G含量。经方法学鉴定 ,其灵敏度为 0 .3mg/ L,回收率为 10 0%～ 110 % ,零管结合率为 60 %～ 80 % ,非特异结合率 <2 .5% ,测量范围为 1.0～ 50 .0 mg/ L,批内变异系数为 3.1%～ 5.4 % ,批间变异系数为 4 .5%～ 7.2 % ,温育时间为 1h。

罗丹明B分子印迹聚合物微球的合成及其在固相萃取中的应用

以罗丹明B为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用沉淀聚合法制备了罗丹明B分子印迹聚合物(MIP)微球,并用扫描电子显微镜表征。采用紫外分光光度法测定了印迹分子罗丹明B与功能单体丙烯酰胺二者之间的结合常数(K=5.303×103(mol/L)-1)和化学计量比(n=1)。考察了沉淀剂的种类和用量对聚合物微球的影响。将分子印迹聚合物微球应用于固相萃取材料自制固相萃取柱,从加标罗丹明B的红椒粉中萃取罗丹明B。本文优化了固相萃取条件,高效液相色谱检测表明,在一定的萃取条件下,分子印迹聚合物对加标量为0.479 mg/kg的辣椒中罗丹明B的萃取加标回收率可达91.7%～103.5%。

基于分子印迹聚合物微球的在线固相萃取-液相色谱联用技术测定牛奶中酰胺醇类药物残留

以氟苯尼考为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,用乳液-悬浮聚合法制备分子印迹聚合物微球。将制备的微球用于固相萃取,建立酰胺醇类抗生素的在线固相萃取-高效液相色谱检测方法,优化在线萃取条件及影响因素。在最佳条件下,分离检测了牛奶中的酰胺醇类药物,实现了有效地净化,其加标回收率为80.6%～96.7%,检出限为6.8～27.8 g/kg。

分子印迹微米微球的合成方法及在固相萃取中的应用研究进展

与分子印迹本体聚合物相比,分子印迹微米微球(MIMs)具有均匀规整的形状和良好的动力学特征,因而被广泛用于固相萃取(SPE)、色谱分离、化学传感器以及药物投递等研究领域。MIMs的合成方法主要有悬浮聚合法、多步溶胀聚合法和沉淀聚合法。该文追踪了近10年有关MIMs的文献,对其上述3种合成方法进行了总结,并比较了其优缺点;同时对MIMs在固相萃取中的应用进展进行了总结和评述,对其未来发展方向进行了展望。

固相微板法红细胞抗体检测技术的建立

目的 摸索建立一种简单实用的红细胞抗体检测技术。方法 采用一种新的固相红细胞方法 ,把筛选红细胞固定于 96孔U型板。分别用固相法和试管法 ,对多种抗血清、供血者、有免疫史的病人 3批标本检测 ,对结果加以比较。结果 对抗血清的效价测定 ,两种方法结果一致 ;在对供血者和病人的检测中 ,固相法检出了所有试管法能检出的抗体。结论 与试管法比较 ,固相法的灵敏度可以得到肯定 ,结果可靠 ,而且易制备 ,操作技巧容易掌握、普及。

弱酸型聚合物微球固相萃取填料的制备及水中杀虫剂的测定

本文制备了聚合物基质弱酸型阳离子交换固相萃取填料,以甲基丙烯酸和苯乙烯为原料,二乙烯基苯为交联剂,聚乙烯醇为分散剂,过氧化苯甲酰为引发剂,采用悬浮聚合法制备了具有亲脂和弱阳离子交换性能的球形固相萃取填料,并对其结构和形貌进行了表征。以该聚合物微球作为填料制备固相萃取小柱,萃取水中联硝氯酚、硫双二氯酚、吡喹酮和丙硫苯咪唑4种杀虫剂,乙腈为洗脱剂,洗脱液采用液相色谱分析。分别考察了样品的p H值和流速、洗脱剂的体积和流速对萃取回收率的影响,确定了最佳固相萃取条件。选择了最佳色谱分析条件。结果表明,该聚合物微球单分散性好,自制固相萃取小柱对水中4种杀虫剂的吸附性能好,与HPLC联用测定结果重现性好,联硝氯酚、硫双二氯酚、吡喹酮和丙硫苯咪唑的最低检测限分别为0.26μg·L-1、0.31μg·L-1、0.42和0.63μg·L-1。

苯乙烯-二乙烯苯-甲基丙烯酸聚合物微球的制备及其固相萃取性能

以苯乙烯、二乙烯苯和甲基丙烯酸为原料,聚乙烯醇为分散剂,过氧化苯甲酰为引发剂,采用悬浮聚合法制备了具有亲脂和弱阳离子交换性能的球形固相萃取填料,并确定了最佳的聚合反应条件。采用红外光谱和扫描电子显微镜表征了聚合物结构和微球的形貌,通过氮气吸附法测定了填料的比表面积和孔径分布。以氰草津、西玛津、阿特拉津和特丁津4种三嗪类除草剂为目标化合物,通过固相萃取-液相色谱联用技术,考察了样品溶液的酸度、过柱流量及洗脱剂的体积对萃取回收率的影响,确定了最佳固相萃取条件。测定了制备的固相萃取填料的吸附容量和小柱的穿透体积。氰草津、西玛津、阿特拉津和特丁津的检出限分别为0.26,0.63,0.42,0.31μg·L-1。

二氧化锆微球表面键合磺化交联聚苯乙烯固相萃取填料的制备及应用

以聚合诱导胶体凝聚法(PICA)制备二氧化锆微球,用钛酸酯偶联剂对其进行表面改性,使其接枝上碳碳双键基团。在溶液体系中,该双键与单体苯乙烯和二乙烯苯在自由基引发下交联聚合,形成的聚合物包覆在二氧化锆微球表面。再通过磺化方法将磺酸基离子连接到苯环上,得到阳离子交换固相萃取填料。通过红外光谱、扫描电镜/X射线能谱等手段对其进行了表征。将装填得到的固相萃取柱与高效液相色谱联用,测定了水中的甲基磺草酮、阿特拉津和乙草胺。3种化合物的色谱峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数(r2)均大于0.99;甲基磺草酮、阿特拉津和乙草胺的检出限分别为5.41、6.72和13.4μg/L。结果表明,制得的聚合物包覆二氧化锆微球的粒径为6～8μm,用该填料制成的固相萃取小柱对3种目标物的吸附率高。

克百威分子印迹固相萃取微球的制备及性能

以偶氮二异丁腈为引发剂,2-3μm的聚苯乙烯微球为种球,克百威为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用单步溶胀法制备粒径均一的克百威分子印迹聚合物微球（MIPMs）。通过扫描电镜（SEM）、吸附平衡实验和竞争吸附实验分析了克百威MIPMs的形貌及其对克百威的结合特性及吸附选择性,并比较了克百威分子印迹固相萃取柱（MISPE）与C18固相萃取柱（C18SPE）富集水中克百威的效果。结果表明：合成的MIPMs粒径约10μm,表面呈蜂窝状;在90min内可达到饱和吸附,最大吸附量为25.94mg/g;在克百威、灭多威和三羟基克百威共存的条件下,克百威MIPMs可实现对克百威的专一性吸附;与C18SPE相比,克百威MISPE重复使用6次后加标回收率仍在85%以上,可用于水体中痕量克百威的检测。

表面接枝亲水性聚合物刷磁性微球的制备及其对蜂蜜中四环素类抗生素残留的磁分散固相萃取

采用电子转移活化再生催化剂原子转移自由基聚合法(ARGET-ATRP)在磁性微球(MMs)表面连续接枝了聚碱类聚合物和聚乙二醇刷。首先将MMs包覆硅胶,接枝氨基,然后在其表面接枝溴引发剂,最后在MMs表面进行聚合,制备了亲水性聚合物刷磁性微球(HMMs)。通过透射电镜、傅里叶变换红外光谱对HMMs进行表征,并研究了HMMs对蛋白质的吸附性能。结果表明,合成的HMMs粒径较为均一,分散性良好并且具有良好的抗蛋白质吸附性能。利用制备的HMMs,采用磁分散固相萃取(MDSPE)-高效液相色谱法(HPLC)测定了蜂蜜中四环素类抗生素(TCs)残留。TCs的平均回收率为85.8%~94.5%,方法的检出限和定量限分别为1.92~2.56μg/kg和6.40~8.53μg/kg。该方法成功地用于蜂蜜中TCs残留的快速分离富集。

安定印迹微球的制备及其固相萃取应用

分子印迹技术是指制备对某一特定的目标分子（模板分子）具有专一性识别的聚合物的技术。分子印迹聚合物（MIP）的制备是分子印迹技术的关键，目前主要的制备方法有：本体聚合、原位聚合、表面聚合、悬浮聚合、沉淀聚合等。本研究利用沉淀聚合法合成了安定分子印迹微球并将其应用于固相萃取技术，在优化实验条件下考察了固相萃取分离人体尿液中的安定及其主要代谢产物的能力。

固相微萃取涂层材料多孔聚二乙烯基苯微球的合成

以偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂、二乙烯基苯(DVB-80)为单体、二氯甲烷-甲苯为二元致孔剂,采用沉淀聚合法制备单分散多孔聚二乙烯基苯微球(PDVB),用作固相微萃取涂层材料。扫描电镜表明,合成的聚合物微球球形规整、粒径均匀,数均粒径3.00μm,粒径多分散指数为1.03;氮气吸附测试表明,微球呈现多孔性,Langmuir比表面积为667m^2/g;热重分析表明,微球具有良好的热稳定性。采用此方法合成的多孔PDVB微球适合用作固相微萃取涂层材料。

含磁性微球固相微萃取头的制备及对水中多环芳烃含量的测定

制备一种含有Fe_3O_4@SiO_2@γ-MAPS磁性微球的固相微萃取萃取头用于样品前处理,并采用SPME-HPLC联用的方法对其富集效果进行了评价。用此萃取头对萘、菲、蒽三种多环芳烃进行萃取,系统考察了萃取时间、解吸时间等实验条件对富集效果的影响。萘、菲、蒽三种物质线性关系良好,加标回收率为89.30%、97.41%、98.67%。将添加磁性微球萃取头与未加入磁性微球萃取头的萃取效果进行对比,富集效果明显提高。使用含磁性微球的萃取头与高效液相色谱联用检测湖水中多环芳烃的含量。

双硫腙改性氧化石墨烯/壳聚糖复合微球固相萃取在线富集-原子荧光光谱法测定地质样品中痕量汞

汞可以指示矿床或矿化存在,是一种重要的地质过程示踪元素,因此汞的测定是十分重要的。由于汞在地质矿床中丰度较低,直接测定存在困难,需要进行预分离富集处理。目前采用的分离富集手段大多数是离线,自动化程度较低。本文将合成的双硫腙改性氧化石墨烯/壳聚糖复合微球制成固相萃取小柱,考察了溶液pH、吸附剂种类和体积对汞的吸附效果的影响,优化了固相萃取在线采样/洗脱时间和速率对汞的吸附/洗脱效果的影响,建立了固相萃取在线富集-原子荧光光谱法测定地质样品中痕量汞的分析方法。结果表明:溶液pH=3.0时,以5 mL/min的采样速率进样5 min,汞的吸附率大于90%;用20 g/L硫脲-1.0mol/L硝酸混合溶液作洗脱液,以1 mL/min的洗脱速度洗脱1 min,洗脱率大于95%。汞含量在0.050~5.0μg/L范围内线性关系良好,富集因子为22,检出限为0.0019μg/L。采用本方法测定了土壤和沉积物国家标准物质样品,Hg的测定值与参考值的相对误差小于±13%。与离线分析相比,本方法具有灵敏度高、操作简单快速等特点。

N-烷基-N-酰基磺酰胺聚苯乙烯基微球作为固相酰化剂的研究

一种可循环使用的固相试剂:N-烷基-N-酰基磺酰胺聚苯乙烯基微球(5),通过对聚苯乙烯磺酰氯微球树脂进行两步功能基化的修饰反应来制备.制备过程如下:聚苯磺酰氯树脂(1)与伯胺(2)反应得到聚苯乙烯基N-烷基磺酰胺树脂(3),树脂3用酰氯(4)或酸酐酰化得到N-烷基-N-酰基磺酰胺聚苯乙烯基树脂(5).酰化的树脂5作为酰基转移试剂与亲核试剂胺反应得到二级酰胺.根据5上取代基对酰胺生成的程度的影响结果表明,烷基R1和酰基(R2CO)对酰基转移反应活性的大小依次分别为:苯基>苄基>甲基>正丁基>>H和对硝基苯甲酰基>苯甲酰基>乙酰基.胺的亲核能力对酰胺的收率也有一定的影响.N-苯基-N-苯甲酰基磺酰胺树脂重复使用3次没有发现活性降低.

固相载体微球的制备

国内外研制的放射免疫试剂盒多为液相竞争法。固相放射免疫分析法是近年来的一项新技术。此法操作简单,稳定性好,非特异性吸收低,固相载体在放射免疫分忻领域中取得日益广泛的用途,将成为一项富有生命力的新技术。 本文经过一系列的实验,着重研究了各种粒径大小,带不同官能团的载体微球的制备方法,探讨了不同的材料和工艺所制成的载体微球所具有的不同的物理性质,对放射免疫分析的不同影响,为固相放射免疫分析技术的发展打下了基础。 材料和方法 一、试剂与设备: (一)试剂:单体 丙烯酰胺 丙烯酸 孔化剂 司本-80 十二烷基苯磺酸钠 分散剂 明胶(0.5％) 引发剂 过硫酸胺(2.5％) 过氧化苯甲酰 交联剂 N,N′—甲叉双丙烯酰胺 (二)设备:电子恒速搅拌器 型号 CSl2—2 多功能电子恒温水浴箱 三口圆底烧瓶 0.5升 二。

液质联用研究麦冬皂苷肠溶微球在大鼠体内的相对生物利用度

目的研究单次ig麦冬皂苷肠溶微球在大鼠体内的相对生物利用度,以期提供最为直接的制剂质量评价。方法建立HPLC-M S分析方法,以固相萃取技术(SPE)进行血样处理,测定单次ig麦冬皂苷肠溶微球(被测制剂)及混悬剂(参比制剂)后不同时间血浆中薯蓣皂苷元的质量浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数及相对生物利用度。结果Cm ax为(637.81±17.23)ng/mL,tm ax为(4.0±0.0)h,AUC0-72为7 840.01±412.03。结论麦冬皂苷肠溶微球与普通混悬剂在ig单次给药后,大鼠体内的吸收、分布、消除性质颇为相似,其药动学参数数据也较为一致,相对生物利用度为(91.10±3.44)%。

Fe_3O_4/P(AA-MMA-GMA)磁性复合微球的制备及其偶联抗体的性能

采用新型的无皂乳液聚合法制备磁性复合微球,即以丙烯酸(AA)、甲基丙烯酸甲酯(MMA)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,1,1-二苯基乙烯为自由基控制剂,无皂乳液聚合制备了一种磁性复合微球Fe3O4/P(AA-MMA-GMA)。以所制备的Fe3O4/P(AA-MMA-GMA)微球为载体,通过共价偶联山羊抗兔IgG抗体,得到了一种免疫磁性复合微球。研究表明,Fe3O4/P(AA-MMA-GMA)微球表面带有环氧基,粒径为626nm,具有超顺磁性。0.5mgFe3O4/P(AA-MMA-GMA)微球与200μg山羊抗兔IgG抗体在pH=7.4的磷酸盐缓冲液中于25℃反应16h,可得到一种免疫磁性复合微球,其山羊抗兔IgG的偶联量为124μg,且该免疫磁性复合微球可特异性结合兔抗肌动蛋白α。

中间相炭微球为碳源制备炭材料的凝胶注模成型工艺

以中间相炭微球为碳源,丙烯酰胺为凝胶体系,采用凝胶注模成型工艺制备炭坯体材料;设计了分批添加炭微球结合球磨处理以提高浆料中固相含量的方法;研究了凝胶注模成型工艺对炭微球浆料分散性、黏度、固相含量、凝胶反应及固化和干燥过程的影响。结果表明:在水基浆料中添加相对中间相炭微球质量分数为1%的分散剂,调节pH值到13时,浆料中的颗粒均匀分散、稳定存在;采用分批添加和球磨处理可以增大浆料中的固相含量,最高达到75%,此时浆料的黏度最大,为1.822Pa·s;随着引发剂用量的增大,诱导时间和凝胶反应时间急剧缩短,而催化剂用量对其影响不大,最终选择每30mL浆料添加0.4mL引发剂,0.6mL催化剂为宜;浇注前浆料充分真空除气以及干燥起始阶段用酒精置换温坯中的水分是保证炭坯体表面光洁、不开裂的关键因素。