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抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体的特性鉴定及应用 被引量:3
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作者 封青 郭春艳 +3 位作者 王珍 李研 梁导艳 胡军 《生物技术通讯》 CAS 2018年第4期511-515,共5页
目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备... 目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做对比分析。结果:筛选到2株可稳定分泌抗人Ig G单抗和2株抗人Ig M单抗,经交叉反应、Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高、特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强、敏感度高。结论:获得4株特异性强、敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 人IGG 人igm 单克隆抗体 特性鉴定 应用
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中华鳖免疫球蛋白的理化特性——中华鳖IgM对2-巯基乙醇敏感性、与人IgM的同源性及其相对分子质量的研究 被引量:4
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作者 简纪常 朱健 《湛江海洋大学学报》 CAS 2001年第3期1-4,共4页
凝集法发现 ,当鳖抗嗜水气单胞菌的血清与 2 -巯基乙醇一起孵育后 ,再与嗜水气单胞菌反应 ,无凝集现象 ,说明鳖免疫球蛋白对 2 -巯基乙醇敏感。用交叉免疫扩散法 ,发现鳖 Ig M与羊抗人 Ig M血清无沉淀反应 ,只与兔抗鳖 Ig M血清出现沉... 凝集法发现 ,当鳖抗嗜水气单胞菌的血清与 2 -巯基乙醇一起孵育后 ,再与嗜水气单胞菌反应 ,无凝集现象 ,说明鳖免疫球蛋白对 2 -巯基乙醇敏感。用交叉免疫扩散法 ,发现鳖 Ig M与羊抗人 Ig M血清无沉淀反应 ,只与兔抗鳖 Ig M血清出现沉淀反应 ,而人 Ig M只与羊抗人 Ig M血清发生沉淀反应 ,不与兔抗鳖 Ig M血清反应 ,这些表明鳖 Ig M与人 Ig M之间无免疫同源性。用 SDS- PAGE电泳检测到中华鳖免疫球蛋白的相对分子质量约为 8.7× 10 5,重链约为 6 .3× 10 4 ,轻链约为 2 .2× 10 展开更多
关键词 中华鳖 igm 2-巯基乙醇 人igm 同源性 相对分子质量 免疫球蛋白 理化特性
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细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体 被引量:1
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作者 苏瑾 张亚莉 +2 位作者 郭志兵 车小燕 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期902-905,共4页
目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDa... 目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDaA3,制备成具有双标记杂交瘤αCD3HATS G418R亚系,与抗人IgMμ链单克隆抗体细胞株融合,通过ELISA法及流式细胞仪筛选,制备分泌BsAb的细胞株。结果融合6次,共接种1080孔,共得5株抗CD3-抗IgM杂交-杂交瘤。经亚克隆后,其中2株体外连续传代培养2月仍保持良好的分泌BsAb功能。结论采取细胞融合法可成功制备分泌BsAb的杂交-杂交瘤,其稳定性及效价与亲本杂交瘤相似。 展开更多
关键词 双特异性抗体 细胞融合 抗人CD3抗体 人igmμ链抗体 杂交-杂交瘤
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分泌抗人IgMμ链单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量:1
4
作者 方海林 林舜华 +1 位作者 李赤波 吕新法 《浙江医科大学学报》 CSCD 1990年第1期4-6,共3页
本文采用杂交瘤技术建立了6株分泌抗人IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株.经琼脂糖双扩散试验、双扩散和ELISA封闭试验,以及免疫电泳等方法证实,所分泌的抗体具有抗人IgMμ链特异性.其中4株分泌IgG_1亚类、2株分泌IgG_2a亚类抗体.经一年... 本文采用杂交瘤技术建立了6株分泌抗人IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株.经琼脂糖双扩散试验、双扩散和ELISA封闭试验,以及免疫电泳等方法证实,所分泌的抗体具有抗人IgMμ链特异性.其中4株分泌IgG_1亚类、2株分泌IgG_2a亚类抗体.经一年多的反复冻存和复苏,这6株细胞均能稳定分泌高效价抗体. 展开更多
关键词 单克隆抗体 人igm 杂交瘤
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用抗人IgM(μ链)单克隆抗体早期诊断风疹病毒感染
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作者 龚镇奎 黄鹤 +1 位作者 骆林 肖红雨 《中国病毒学》 CSCD 1997年第3期281-283,共3页
An indirect ELISA by using monoclonal antibody (McAb) against hutnan IgM (μ chain)as the antibody labeled with horseradish peroxidase (second antibody) is used in detecion Rubela virus - specific IgM for early diagno... An indirect ELISA by using monoclonal antibody (McAb) against hutnan IgM (μ chain)as the antibody labeled with horseradish peroxidase (second antibody) is used in detecion Rubela virus - specific IgM for early diagnosis of Rubella virus infection. Through the detection and verifition of a large number of sera from normal population, the population closely contacted with Rubella virus and IgM - positive sera samples of Measles virus, cycoegaforirm and Toxplasma Gondii, it is indicated that this method is specific, seusiuive, simple, rapid and no cross - reaction with the positive sera of the pathogens menticned above, It can be used for early diagnosis of Rubella virus infection and epidemiological survey. 展开更多
关键词 风疹病毒感染 人igm(μ链) 单克隆抗体 诊断
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分泌抗人IgMμ链McAb杂交瘤细胞株的建立 被引量:1
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作者 欧阳著锋 蔡美英 +3 位作者 章崇杰 赵宗蓉 魏大鹏 刘杰 《衡阳医学院学报》 CAS 1997年第3期230-236,共7页
本文从正常人(HBSAg阴性)血清中分离纯化人IgM,以此作为抗原免疫BALB/C小鼠,根据kohler和Milstein杂交瘤细胞建株原理,采用本室建立的常规方法,将免疫脾细胞和小鼠SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,建立了分泌抗人IgMμ链单克隆抗体杂... 本文从正常人(HBSAg阴性)血清中分离纯化人IgM,以此作为抗原免疫BALB/C小鼠,根据kohler和Milstein杂交瘤细胞建株原理,采用本室建立的常规方法,将免疫脾细胞和小鼠SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,建立了分泌抗人IgMμ链单克隆抗体杂交瘤细胞株。经过间接ELISA双向琼脂扩散试验及封闭试验等方法证实,所分泌的抗体为抗人IgMμ链McAb,其中3A4、3D32株杂交瘤细胞经反复冻存、复苏及多次传代,均能分泌高效价抗体,且为IgG1亚类。本实验结果为抗人IgM鼠队嵌合抗体基因的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 人igmμ链 杂交瘤细胞
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应用化学发光自显影技术检测甲型肝炎病毒和人IgM
7
作者 莫代碧 《湖北民族学院学报(医学版)》 1997年第Z1期4-4,共1页
运用化学发光自显影技术和化学发光酶免疫分析法,可检出15.60pg辣根过氧化物酶;在甲型肝炎病毒和人1gM的免疫测定中,检出限分别为1:128(滴度)和6.4×10~4(人标准血清稀释倍数)。
关键词 化学发光 肝炎病毒 自显影 技术检测 人igm 免疫测定 过氧化物酶 甲型 稀释倍数 标准血清
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一种检测弓形虫IgM类抗体的改良ELISA法
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作者 张阳根 黄邱朝 武建国 《南京部队医药》 1995年第6期32-33,共2页
随着“宠物热”的升温,国内弓形虫病的发病率有增长趋势。本病缺乏典型症状,故诊断有赖于实验室检查。测定血清中IgM类抗体,有助于早期诊断,但常规采用的酶结合物或为酶标记抗弓形虫抗体或为酶标记抗人IgM的F(ab)片段,成本较高。我们采... 随着“宠物热”的升温,国内弓形虫病的发病率有增长趋势。本病缺乏典型症状,故诊断有赖于实验室检查。测定血清中IgM类抗体,有助于早期诊断,但常规采用的酶结合物或为酶标记抗弓形虫抗体或为酶标记抗人IgM的F(ab)片段,成本较高。我们采用酶标记弓形虫膜抗原,简化了操作步骤,降低了试剂成本,检测结果准确可靠,特报告如下: 展开更多
关键词 igm类抗体 改良ELISA法 抗弓形虫抗体 酶标记 弓形虫抗原 膜抗原 包被 酶结合物 人igm 健康孕妇
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武汉地区不同人群臣细胞病毒IgM抗体检测
9
作者 骆林 肖红雨 龚镇奎 《湖北预防医学杂志》 1998年第4期4-4,6,共2页
采用ELISA检测武汉地区不同人群CMVIgM抗体,孕妇157例,阳性率为7.0%,育龄妇女200例,阳性率为3.0%,正常人群1900例,阳性率为4.8%。
关键词 巨细胞病毒 单克隆抗体 间接ELISA 人igm(u链)
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Lyme Disease in Iraq: First Detection of IgM Antibodies to Borrelia burgdorferi in Human Sera
10
作者 Khalis A. Hamad Ameen Basima A. Abdullah Riyad A. Abdul-Razaq 《Journal of Life Sciences》 2013年第11期1143-1146,共4页
The sera of 180 human samples were tested for the presence of antibodies against Borrelia burgdorferi using the ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) technique. Out of 180 sero-samples, 46 (25.55%) were positi... The sera of 180 human samples were tested for the presence of antibodies against Borrelia burgdorferi using the ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) technique. Out of 180 sero-samples, 46 (25.55%) were positive. Females of the age range 18-35 years had the highest rate of sero-positive samples 14 (38.88%), while the highest percentage of sero-negative samples was found in males of the age range 50-80 years. The other sero-positive samples were: 6 (26.08%), 6 (25%) and 3 (11.53%) in males of ages between 18-35, 35-50 and 50-80 years, respectively, and 11 (29.72%) and 6 (17.64%) in females in the age ranges 35-50 and 50-80 years, respectively. The mean concentration of Anti- B. burgdorferi antibody was higher (16.7 U/mL) when compared with mean concentration of normal value (5.5 U/mL), P 〈 0.001. 展开更多
关键词 Borrelia burgdorferi igm antibodies Erbil Iraq ELISA
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全人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:5
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作者 张夏玲 孙见宇 +7 位作者 殷珏 李明 周亦凭 刘云成 李万波 朱进 冯振卿 Mason Lu 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期739-744,共6页
目的:利用人源IgM转基因小鼠制备全人源抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对其进行初步鉴定。方法:以灭活的狂犬病病毒CTN株作为抗原免疫人IgM转基因小鼠。采用杂交瘤技术结合酶联免疫吸附试验(ELISA)高通量交叉筛选技术(HTS)制备全人源抗狂犬... 目的:利用人源IgM转基因小鼠制备全人源抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对其进行初步鉴定。方法:以灭活的狂犬病病毒CTN株作为抗原免疫人IgM转基因小鼠。采用杂交瘤技术结合酶联免疫吸附试验(ELISA)高通量交叉筛选技术(HTS)制备全人源抗狂犬病病毒单克隆抗体。通过双抗体夹心ELISA鉴定单抗的人源性和抗体型,间接ELISA、斑点杂交(Dot Blot)实验及Western blot检测单抗的特异性,BiaCore X-100测定单抗结合抗原的亲和力。结果:建立了2株稳定分泌抗狂犬病病毒人源性单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为9E3和9F2。双抗体夹心ELISA结果显示2株单抗均为人源性免疫球蛋白IgM型。间接ELISA、斑点杂交实验结果表明2株单抗均能特异性识别灭活的狂犬病病毒CTN株。Western blot结果显示2株单抗均能与狂犬病病毒糖蛋白特异性结合。2株单抗与狂犬病病毒CTN株抗原结合的亲和力分别为2.62×10-10mol/L、4.06×10-11mol/L。结论:筛选制备了2株特异性、高亲和力的全人源抗狂犬病病毒单克隆抗体。本研究为进一步筛选人源抗狂犬病病毒免疫预防性中和抗体及其免疫治疗的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 人igm转基因小鼠 狂犬病病毒 全人源单克隆抗体
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