一组生物活性多糖对人NK细胞免疫活性的影响

目的:探讨体外环境中灰树花、香菇、灵芝、枸杞多糖和酵母葡聚糖对人自然杀伤(NK)细胞的形态、增殖、细胞毒活性和IFN-γ分泌水平的影响。方法:采用经体外扩增的高纯度人NK细胞为模型,将5种多糖以100mg/L和50mg/L两个质量浓度组分别对其作用72h后检测NK细胞的形态、增殖、细胞毒活性和IFN-γ分泌水平。结果:经过多糖处理后的NK细胞增殖情况与对照组相比并未发生明显改变,但细胞形态有一定的变化,且细胞毒活性和IFN-γ分泌水平有所提高。其中100mg/L和50mg/L的灵芝多糖处理能将NK细胞毒活性分别提高5.89%和9.1%(P<0.05),且50mg/L的灰树花多糖和枸杞多糖也能将NK细胞毒活性分别提高5.7%和6.9%(P<0.05)。另外50mg/L的灰树花多糖与香菇多糖处理能将NK细胞IFN-γ的分泌水平分别提高255pg/mL和202pg/mL(P<0.05)。结论:灰树花、灵芝和枸杞多糖在体外实验中能在一定程度上提高NK细胞的细胞毒活性,但这种作用并不是通过促进细胞增殖实现的。另外灰树花和香菇多糖也能通过促进NK细胞对IFN-γ的分泌,影响NK细胞的免疫调节功能。

人NK细胞克隆化培养条件的初步探讨

为探讨NK细胞克隆化培养的条件,我们首先将人外周血单个核细胞经rhIL-2诱导,使NK细胞得以扩增后,去除T细胞,得到相对纯化的NK细胞。经有限稀释,在饲养细胞及rhIL-2、PHA及LCM等培养条件下,获得NK细胞的单个克隆并进行鉴定。结果表明,每96孔板可获4-16个CD3^-CD56^+NK克隆,每个克隆的细胞数最多可达2.35×10~4,存活约3-5周。以丝裂霉素C(25μg/ml)作为饲养细胞抑制剂,以rhIL-2 200u/ml、PHA 10μg/ml及10％LCM培养,可获得较多的克隆和细胞数。

miR-378和miR-30e:NK细胞杀伤功能的负向调控分子

NK细胞是一类非常重要的天然免疫杀伤细胞，在机体感染的条件下被I型干扰素活化后发挥出强有力的细胞杀伤能力。然而I型干扰素是如何活化NK细胞，而且这个活化过程是如何被调控的，目前还不是十分清楚。miRNA是一类重要的调控型小分子RNA，在天然免疫反应中发挥着重要的调控作用。目前为止，人NK细胞中的miRNA表达谱还未见报道。

新生猪胰岛细胞的HLA-G_1基因转染

目的探讨HLA-G1基因转染新生猪胰岛细胞的可行性,检测其表达和功能状况。方法体外分离纯化新生猪胰岛细胞,脂质体载体转染HLA-G1基因。免疫荧光法检测HLA-G1基因在胰岛细胞上的表达状况;51Cr释放实验分析其对人NK细胞细胞毒的抑制作用。结果新生猪胰岛细胞HLA-G1基因表达率大约为50%,体外转染24-48 h达高峰;混合淋巴细胞培养(胰岛细胞+ NK细胞)后,空质粒转染组的胰岛细胞溶解率为71.57%,而转染组胰岛细胞溶解率为53.5%。结论利用脂质体Genejammer转染体外培养的新生猪胰岛细胞,可以获得靶基因的瞬时高效表达; HLA-G1基因转染可以有效抑制NK细胞对异种胰岛的细胞毒作用。