氧化应激对膀胱癌中抑癌基因人runt相关转录因子3的影响

目的研究外源性活性氧过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激对膀胱癌中抑癌基因人runt相关转录因子3(RUNX3)表达和启动子区甲基化状态的影响。方法将膀胱癌HT1197细胞株分为H2O2组、H2O2+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组、H2O2+5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-Aza-dC)组和空白对照组。采用Western印迹法检测H2O2作用下NAC、5-Aza-dC对细胞RUNX3蛋白表达的影响,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测H2O2作用下NAC、5-Aza-dC对细胞RUNX3启动子甲基化状态的影响,Western印迹法检测H2O2处理对DNA甲基转移酶1(DNMT1)和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白表达的影响,平板克隆形成实验检测H2O2处理对细胞克隆形成能力的影响。结果 H2O2组处理HT1197细胞株48h后的RUNX3蛋白表达水平显著低于空白对照组(P<0.05);而H2O2+NAC组、H2O2+5-Aza-dC组随着H2O2处理时间的增加RUNX3蛋白表达无明显变化,与空白对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。H2O2组细胞RUNX3基因启动子区域发生甲基化,H2O2+NAC组和H2O2+5-Aza-dC组细胞发生部分甲基化,而空白对照组细胞RUNX3基因启动子区域未发生甲基化。使用H2O2处理膀胱癌细胞株48h后,H2O2组HT1197细胞中HDAC1和DNMT1蛋白表达均显著高于空白对照组(P值均<0.05)。H2O2组细胞形成的克隆体积较大、数量较多,其克隆形成率显著高于空白对照组(P<0.05)。结论外源性活性氧H2O2能促进膀胱癌细胞生长并影响RUNX3启动子区甲基化状态和表达,用抗氧化剂NAC或去甲基化制剂5-Aza-dC能逆转RUNX3启动子区甲基化并恢复其表达。提示外源性活性氧H2O2造成的膀胱癌细胞氧化应激很可能是膀胱癌细胞株中抑癌基因RUNX3启动子区异常甲基化、表达下调的主要原因。

人Runt相关转录因子3、zeste基因增强子同源物2蛋白表达与局部进展期直肠癌新辅助化疗敏感性的关系

目的探究人Runt相关转录因子3(RUNX3)和zeste基因增强子同源物2(EZH2)在直肠癌中的表达情况和相关性,探究RUNX3和EZH2蛋白表达与局部进展期直肠癌患者XELOX方案新辅助化疗敏感性的关系。方法31例术前未经抗肿瘤治疗的直肠腺癌患者的癌组织和癌旁组织作为癌组和癌旁组,实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应检测两组中RUNX3和EZH2 mRNA相对表达量,同时采用免疫组织化学法检测两组中RUNX3和EZH2的蛋白表达情况,分析RUNX3和EZH2在癌组织和癌旁组织中的表达差异;将26例术前行3周期XELOX方案新辅助化疗的局部进展期直肠癌患者的治疗前活检蜡块作为治疗前组,其术后病理蜡块作为治疗后组,病理肿瘤缩退学分级评估患者新辅助化疗疗效,采用免疫组织化学法检测两组中RUNX3和EZH2的蛋白表达情况,分析两基因蛋白表达模式与新辅助化疗疗效的关系。结果与癌旁组相比,癌组RUNX3 mRNA的表达下调,蛋白的阳性表达率降低(P=0.001),EZH2 mRNA的表达上调,蛋白的阳性表达率升高(P=0.022);癌组中RUNX3和EZH2的mRNA表达呈负相关(r=-0.599,P=0.000);12例接受新辅助化疗的患者达到TRG0~TRG2级,新辅助化疗总体有效率为46.15%(12/26);与治疗前组相比,治疗后组RUNX3蛋白阳性表达率有上升趋势,但差异无统计学意义(P=0.163),EZH2蛋白阳性表达率有下降趋势,但差异无统计学意义(P=0.095);治疗前组RUNX3阳性表达的患者新辅助化疗有效率为75.00%(9/12),EZH2阴性表达的患者新辅助化疗有效率为77.78%(7/9),RUNX3+/EZH2-的患者新辅助化疗有效率为100%(7/7),高于其他蛋白表达模式(P=0.019),多因素Logistic回归显示RUNX3蛋白的表达情况是患者新辅助化疗疗效的影响因素。结论RUNX3在直肠癌组织中阳性表达率低于癌旁组织,EZH2在直肠癌组织中阳性表达率高于癌旁组织,二者在直肠癌中的表达呈负相关;XELOX方案新辅助化疗可能会对直肠癌中RUNX3和EZH2的表达产生影响;RUNX3高表达和EZH2低表达的局部进展期直肠癌患者XELOX方案新辅助化疗更敏感。

宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒感染对癌组织人Runt相关转录因子3、NIN1/RPN12结合蛋白1同源物、神经激肽1受体表达水平影响

目的探讨宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对癌组织人Runt相关转录因子3(Runx3)、NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)、神经激肽1受体(NK-1R)表达水平的影响。方法选取自2012年1月至2022年12月于北京市顺义区妇幼保健院确诊为宫颈癌的206例患者为研究对象。比较HR-HPV阳性患者和阴性患者Runx3、NOB1、NK-1R表达阳性率。采用多因素Logistic回归分析观察HR-HPV阳性对Runx3、NOB1、NK-1R表达的影响。结果206例患者中,HR-HPV阳性159例(纳入HR-HPV阳性组),HR-HPV阴性47例(纳入HR-HPV阴性组)。HR-HPV阳性组患者Runx3阳性率低于HR-HPV阴性组患者,NOB1、NK-1R阳性率高于HR-HPV阴性组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,HR-HPV感染是宫颈癌患者NOB1阳性、NK-1R阳性、Runx3阴性的独立危险因素(P<0.05)。结论HR-HPV感染的宫颈癌患者癌组织中Runx3表达水平降低,NOB1、NK-1R表达水平升高。

runt相关转录因子1在心血管疾病中的研究进展

runt相关转录因子1 (runt-related transcription factor 1,RUNX1)是一种转录因子,它广泛地参与到生物体细胞的增殖,分化等过程中,既往对它的研究主要集中在造血、肿瘤等方面。近年来,人们越来越关注它在心血管发育和心血管疾病中的潜在作用。本文将回顾近年来在心血管领域对RUNX1的研究,探讨它可能的作用机制,为今后的研究提供线索。

血管瘤患儿血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及转录激活因子3水平与瘤体增生的相关性

目的探索血管瘤患儿血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及转录激活因子3(STAT3)的表达水平并分析其与瘤体增生的相关性。方法选取2020年1月—2023年1月收治的152例血管瘤增生患儿作为研究对象,分为增生期组(87例)与退化期组(65例),另选择同期确诊为血管畸形的53例患儿作为血管畸形组。对血清GM-CSF、STAT3及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管生成素-1(Ang-1)的表达水平进行检测;Pearson法相关性分析血清GM-CSF、STAT3与bFGF、VEGF、HIF-1α、Ang-1的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GM-CSF、STAT3对血管瘤瘤体增生的预测价值;多因素Logistic回归分析血管瘤瘤体增生的影响因素。结果增生期组患儿血清bFGF、VEGF、HIF-1α、GM-CSF、STAT3表达水平高于血管畸形组及退化期组患儿(P<0.05),但血清Ang-1表达水平低于血管畸形组及退化期组患儿(P<0.05);Pearson法相关性分析显示,增生期组患儿血清GM-CSF及STAT3水平均与bFGF、VEGF、HIF-1α水平正相关,与Ang-1水平负相关;ROC曲线下面积显示,GM-CSF和STAT3单独预测血管瘤瘤体增生风险的AUC分别为0.847,0.822,联合预测的AUC为0.918,联合预测的效能显著大于GM-CSF单独诊断的AUC(Z=2.459,P=0.014),STAT3单独诊断的AUC(Z=3.371,P=0.001)。多因素Logistic回归分析显示GM-CSF、STAT3是血管瘤瘤体增生的影响因素(P<0.05)。结论血管瘤瘤体增生患儿血清GM-CSF及STAT3表达水平升高,是瘤体增生的影响因素,联合检测能较好的预测血管瘤瘤体增生风险。

辅助性T细胞17/调节性T细胞及维甲酸相关孤儿受体γt/叉头框转录因子P3失衡在妊娠相关疾病中的研究进展

在免疫学领域,妊娠相当于一次成功的半同种移植现象,母体对半异体胎儿的免疫耐受情况关乎妊娠的结局。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是最新发现的CD^(+)_(4)T淋巴细胞亚群,相关转录因子维甲酸相关孤儿受体γt和叉头框转录因子P3的表达水平与Th17/Treg之间的平衡密切相关。Th17/Treg免疫失衡会导致母体对胎儿的异常攻击,造成母胎耐受紊乱,并与复发性流产、先兆子痫、妊娠糖尿病等病理妊娠有关。

长链非编码核糖核酸KCNQ1重叠转录物1、Runt相关转录因子3与急性心肌梗死的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(long non-coding RNA KCNQ1 overlapping transcript 1,lncRNA KCNQ1OT1)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,Runx3)表达水平及意义。方法 选取2019年1月至2020年4月在德阳市人民医院住院治疗的231例AMI患者为研究对象(AMI组),AMI患者按美国纽约心脏病协会心功能分级标准分为Ⅱ级组72例、Ⅲ级组81例、Ⅳ级组78例;同期选取229例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,fqRT-PCR)法检测血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I、肌红蛋白(myoglobin,MYO)浓度;超声心动图检查左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD);分析AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与心功能指标的相关性;分析血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平对AMI的诊断价值;分析影响AMI发生的因素。结果AMI组患者lncRNA KCNQ1OT1(1.54±0.36 vs. 1.01±0.26)、LVESD[(52.68±6.74)mm vs.(42.73±6.52)mm]、LVEDD[(61.79±6.03)mm vs.(51.62±5.32)mm]、NT-proBNP[(292.23±34.27)ng/L vs.(96.27±23.42)ng/L]、CK[(746.82±210.55)U/L vs.(70.32±15.48)U/L]、CK-MB[(156.95±49.87)U/L vs.(1.25±0.37)U/L]、cTnI[(27.48±7.92)ng/mL vs.(1.13±0.26)ng/mL]、MYO[(678.94±159.78)ng/mL vs.(12.45±2.73)ng/mL]浓度高于对照组,Runx3(0.67±0.20 vs.1.02±0.24)、LVEF(43.26%±4.31%vs. 56.38%±5.12%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能Ⅳ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅲ级组和Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与病变支数、Gensini积分有关,且随着病变支数、Gensini积分增加,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高、Runx3表达水平降低(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1与Runx3表达水平呈负相关(r=-0.584;P<0.05);lncRNA KCNQ1OT1与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05);Runx3与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈负相关,与LVEF呈正相关(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3水平诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.743,特异度分别为81.6%、74.7%,敏感度分别为76.1%、78.3%;两者联合诊断的曲线下面积为0.901,特异度为92.0%,敏感度为73.9%。lncRNA KCNQ1OT1是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05),Runx3是影响AMI发生的保护因素(P<0.05)。结论 血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3参与AMI的发生、发展,二者表达水平对AMI的诊断可能具有重要意义。

尿沉渣人RUNT相关转录因子3基因甲基化在非肌层浸润性膀胱癌中的预后价值

目的 探讨尿沉渣人RUNT相关转录因子3（RUNX3）基因甲基化与非肌层浸润性膀胱癌临床病理特征与预后的关系.方法 本研究为前瞻性对照研究,按顺序纳入2014年7月至2014年12月在我院住院手术的45例初发膀胱癌患者,45例患者均行经尿道膀胱肿瘤电切术,术后病理检查证实为非肌层浸润性尿路上皮癌.对照组为同期45例输尿管结石或肾结石患者.采集手术当日晨尿进行尿沉渣RUNX3基因甲基化检测.患者术后每3个月接受膀胱镜复查,发现膀胱癌复发为研究终点.结果 与对照组比较,膀胱癌组尿沉渣RUNX3甲基化差异有统计学意义,尿沉渣RUNX3甲基化与膀胱癌病理分级明显相关（P=0.002）.随访18~24个月,12例膀胱癌复发,其中3例进展为浸润性膀胱癌,生存曲线分析结果表明,尿沉渣RUNX3甲基化与膀胱癌复发相关.结论 尿沉渣RUNX3甲基化与膀胱癌病理分级明显相关,且与膀胱癌复发有关.

甲状腺乳头状癌组织中肿瘤转移相关基因1、叉头翼螺旋转录因子3水平变化与临床病理特征及淋巴转移的关系

目的:探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)、叉头翼螺旋转录因子3(FOXP3)在甲状腺乳头状癌(PTC)淋巴转移患者中的作用及临床意义。方法:选取手术治疗的111例PTC患者为研究对象,收集患者的癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色法观察组织中MTA1、FOXP3表达情况;采用多因素Logistic回归风险模型分析影响PTC淋巴转移的因素。结果:111例PTC组织标本中,MTA1的阳性表达率(MTA1阳性例数/癌组织总例数)为78.38%(87/111)高于癌旁组织17.12%(19/111),FOXP3在PTC组织中的阳性表达率(FOXP3阳性例数/癌组织总例数)为70.27%(78/111)高于癌旁组织13.51%(15/111),两组比较差异有统计学意义(均P<0.05);Spearman等级相关分析结果显示MTA1与FOXP3表达呈正相关(r=0.532,P=0.000);PTC患者癌组织中MTA1与FOXP3表达与包膜侵犯、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);单因素分析结果显示淋巴转移患者与未转移患者在性别、病灶数、包膜侵犯、TNM分期、脉管侵犯、MTA1及FOXP3等病理特征方面比较有统计学差异(均P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示性别、病灶、TNM分期、包膜侵犯及MTA1、FOXP3表达均是影响PTC淋巴转移的危险因素(均P<0.05)。结论:MTA1、FOXP3在PTC患者癌组织中表达均升高,其表达水平与包膜侵犯、淋巴结转移、TNM分期有关,可作为评估PTC淋巴转移的有效指标。

人Runt相关转录因子3通过影响蛋白激酶B/β-连环蛋白信号通路抑制涎腺腺样囊性癌细胞增殖和迁移

目的 观察人Runt相关转录因子3（RUNX3）在涎腺腺样囊性癌中的表达以及对蛋白激酶B（Akt）/β-连环蛋白（β-catenin）的影响.方法 应用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）技术检测55例涎腺腺样囊性癌及癌旁正常组织中RUNX3 mRNA表达水平,并分析其临床意义.在SACC-83、SACC-LM细胞中过表达野生型RUNX3后,使用Western blot、RT-qPCR分别在蛋白和mRNA水平上观察RUNX3对Akt/β-catenin的影响;使用细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖实验和细胞划痕实验检查过表达野生型RUNX3对涎腺腺样囊性癌细胞增殖和迁移的影响.结果70.9%（39/55）SACC组织中RUNX3 mRNA呈低水平表达.RUNX3低表达与涎腺腺样囊性癌患者神经转移（P=0.003）、复发（P=0.043）和临床分期（P=0.003）显著相关,与T分级（P=0.072）接近相关.RUNX3高表达组总生存（OR）显著高于RUNX3低表达组（P=0.031）.过表达野生型RUNX3可下调Akt、β-catenin蛋白和mRNA的表达,并显著抑制SACC-83、SACC-LM细胞的增殖和迁移.结论 RUNX3在涎腺腺样囊性癌中起着抑癌基因作用,通过影响Akt/β-catenin信号通路抑制肿瘤细胞增殖和迁移.

人RUNT相关转录因子3和信号诱导增殖相关蛋白1在胃癌中表达及其临床意义

目的 观察人RUNT相关转录因子3（RUNX3）和信号诱导增殖相关蛋白1（Sipa1）在胃癌组织中的表达,探讨两者与胃癌临床意义的关系。方法 采用免疫组织化学法检测62例胃癌组织及相应癌旁组织中RUNX3和Sipa1表达水平。结果 RUNX3在胃癌组织中表达率为62.90%（39/62）,在癌旁组织中的表达率为93.55%（58/62）,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）,RUNX3表达水平与胃癌组织学分化程度、淋巴结转移明显相关（P〈0.05）,Sipa1在胃癌组织中表达率为43.55%（27/62）,在癌旁组织中的表达率为80.65%（50/62）,两者差异有统计学意义（P〈0.01）,Sipa1表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关（P〈0.05）。结论RUNX3和Sipa1表达与胃癌生物学行为明显相关。

子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3与果蝇zeste基因增强子同源物2的表达

目的:检测子宫内膜腺癌组织中人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)和果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达。方法:采用免疫组化SP法检测60例子宫内膜腺癌、40例子宫内膜增殖症和20例正常增生期子宫内膜组织中RUNX3与EZH2蛋白的表达。结果:子宫内膜腺癌、子宫内膜增殖症与正常增生期子宫内膜组织RUNX3蛋白的阳性表达率分别为43.3%(26/60)、67.5%(27/40)与95.0%(19/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=18.090,P<0.001);上述3种组织中EZH2蛋白的阳性表达率分别为75.0%(45/60)、42.5%(17/40)与15.0%(3/20),3组间相比,差异有统计学意义(χ2=25.041,P<0.001)。RUNX3蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度、TNM分期及浸润深度有关(χ2=-3.561,-2.367,5.370,P均<0.05),EZH2蛋白的表达与子宫内膜腺癌的组织分化程度及浸润深度有关(χ2=-3.084,5.568,P均<0.05)。子宫内膜腺癌组织中RUNX3和EZH2蛋白的表达相关(rP=0.330,P=0.007)。结论:RUNX3蛋白表达缺失和EZH2蛋白过度表达在子宫内膜腺癌的发生与发展中起重要作用,高表达的EZH2可能在一定程度上参与调控RUNX3基因的表达下调。

维生素D辅助治疗对重症毛细支气管炎患儿runt相关转录因子3及Th17/Treg相关细胞因子影响观察

目的:观察维生素D辅助治疗对重症毛细支气管炎患儿runt相关转录因子3(Runx3)及Th17/Treg相关细胞因子的影响。方法:104例重症毛细支气管炎患儿随机分为常规治疗组和维生素D治疗组各52例。常规治疗组给予利巴韦林和布地奈德治疗,维生素D治疗组在常规治疗组基础上加用维生素D,两组均连续治疗14 d。比较两组临床疗效,以及两组患儿治疗前后外周血单核细胞(PBMC)中Runx3 mRNA的表达情况,Th17/Treg、血清中1,25-(OH)2-D3、IL-6、IL-8水平及T淋巴亚群细胞水平变化。结果:两组临床总有效率差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患儿PBMC中Runx3 mRNA表达水平和Treg比例均较治疗前明显升高,外周血CD3+、CD3+CD4+ T细胞浓度及CD4+/CD8+均较治疗前增加,Th17比例、Th17/Treg及血清IL-6、IL-8水平均较治疗前降低(P<0.05);且维生素D治疗组上述指标均优于常规治疗组(P<0.05)。治疗后维生素D治疗组的血清1,25-(OH)2-D3水平较治疗前明显升高,且高于常规治疗组(P<0.05)。结论:在常规治疗基础上外源性补充维生素D可更有效地改善重症毛细支气管炎患儿Th17/Treg失衡,增强患儿PBMC中Runx3 mRNA的表达,提高机体免疫功能,减轻炎症反应。

转化生长因子β_1与人类Runt相关转录因子3在结肠癌中的表达及其两者表达的相关性研究

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)与人类Runt相关转录因子3(Runx3)在结肠癌中的表达及其两者表达的相关性。方法收集2011年1月至2013年12月安岳县人民医院收治的结肠癌患者34例、结肠腺瘤性息肉患者34例标本以及正常体检的34例结肠黏膜标本,通过免疫组织化学SP法检测Runx3、TGF-β1的表达,分析Runx3与TGF-β1在结肠癌中的相关性。结果 Runx3在结肠癌组织中表达阳性率最低(17.7%,6/34),与结肠黏膜和结肠息肉组织比较差异均有统计学意义(P<0.01)。TGF-β1在结肠癌组织中的阳性表达率为88.3%(30/34),显著高于结肠息肉和结肠黏膜组织,差异均有统计学意义(P<0.01)。结肠癌中TGF-β1与Runx3表达呈负相关(rs=-0.46,P<0.05)。结论 Runx3及TGF-β1在不同结肠组织中表达差异明显,在结肠癌组织中表达有相关性,检测Runx3和TGF-β1可能为结肠癌早期诊断提供一定依据。

人Runt相关转录因子3通过调控上皮-间充质转化抑制涎腺腺样囊性癌转移

目的观察过表达人Runt相关转录因子3（RUNX3）对腺样囊性癌细胞上皮-间充质转化（EMT）的影响。方法利用慢病毒感染腺样囊性癌SACC-83、SACC-LM细胞，获得稳定过表达RUNX3的细胞株（过表达RUNX3组），并设置空白慢病毒感染的阴性对照细胞株（阴性对照组）。用Western blot法检测RUNX3蛋白过表达；采用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测过表达RUNX3对SACC-83、SACC-LM细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、纤维粘连蛋白（Fibronectin）及Snail基因mRNA和蛋白表达水平的影响；采用Western blot检测过表达RUNX3对SACC-83、SACC-LM细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9表达的影响。采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果慢病毒感染SACC-83、SACC-LM细胞后，其RUNX3蛋白表达[（0.968±0.035）、（0.956±0.037）]均显著上调，与阴性对照组[（0.425±0.031）、（0.196±0.028）]比较差异有统计学意义（P=0.002、P=0.000）。RT-qPCR和Western blot检测表明，与阴性对照组比较，过表达RUNX3组的Vimentin、Fibronectin、Snail mRNA表达下降34.2%～61.9%、蛋白表达下降31.8%～71.8%；而SACC-83细胞的E-cadherin mRNA和蛋白分别上调2.671、2.237倍，SACC-LM细胞的E-cadherin mRNA和蛋白分别上调3.687、5.454倍。Western blot检测显示，与阴性对照组比较，过表达RUNX3组的MMP-2和MMP-9表达显著下降（P=0. 005、P=0.004）。细胞划痕实验显示，过表达RUNX3细胞的迁移率较低。结论RUNX3可以抑制人腺样囊性癌细胞的EMT，这是其抑制腺样囊性癌细胞侵袭与转移的机制之一。

沉默Runt相关转录因子3对骨肉瘤细胞恶性程度的影响

目的探讨沉默Runt相关转录因子3(RUNX3)对骨肉瘤细胞增殖能力及血管新生能力的影响。方法培养骨肉瘤HEK293细胞株并将其分为NC组和RUNX3组,分别转染阴性对照小干扰RNA(siRNA)和RUNX3-siRNA。于转染siRNA后6、12、24、48 h采用MTS试剂盒测定细胞增殖活力;转染siRNA后24、48 h采用荧光定量PCR试剂盒测定细胞中增殖分子β-链蛋白、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA表达量,采用ELISA试剂盒测定细胞培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(b FGF)、促血管生成素-2(Ang-2)的含量。结果转染siRNA后6、12、24、48 h RUNX3组的细胞增殖活力值均高于NC组(0.78±0.11vs.0.57±0.09,0.99±0.14 vs.0.73±0.10,1.31±0.18 vs.0.81±0.12,1.72±0.26 vs.0.98±0.14,P均<0.05);转染siRNA后24、48 h RUNX3组细胞中β-链蛋白、Cyclin D1、PCNA的mRNA表达量以及细胞培养基中VEGF、b FGF、Ang-2的含量均高于NC组(P均<0.05)。结论沉默RUNX3能够增强骨肉瘤细胞的增殖能力及血管新生能力。

口腔黏膜癌变过程中Runt相关转录因子3的表达研究

目的研究Runt相关转录因子3(runt-related transcription factor3,RUNX3)在口腔黏膜癌变过程中的表达。方法应用免疫组织化学技术分析了临床收集的10例口腔正常黏膜组织、40例口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)、150例口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织及对应癌旁组织中RUNX3的表达。统计分析了RUNX3的表达与性别、年龄、病损部位、组织病理分型等临床病理参数之间的关系。结果免疫组织化学染色结果显示10例口腔正常黏膜组织中RUNX3的表达皆为强阳性,且主要在细胞核内;4例OLK中RUNX3蛋白呈单纯胞浆表达,2例RUNX3蛋白表达缺失,其余34例OLK中RUNX3蛋白的表达跟正常组织中的表达情况一致;150例OSCC组织中有22例(14.7%)呈现细胞核表达阳性,45例(30.0%)RUNX3蛋白呈单纯胞浆表达,83例(55.3%)RUNX3蛋白呈现表达下调或表达缺失;RUNX3表达下调(P=0.001)和蛋白错位(P=0.001)皆与肿瘤的分化程度相关且具有统计学意义。结论口腔黏膜癌变过程中RUNX3的表达下调和蛋白的错位表达是一种常发事件,且可以发生在癌变的早期阶段。

口腔鳞状细胞癌Runt相关转录因子3启动子区CpG岛甲基化状态的研究

目的研究口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中Runt相关转录因子3(runt-relatedtranscription factor 3,RUNX3)基因启动子区的甲基化状态与其表达及病理参数之间的相关性。方法应用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术分析10例口腔正常黏膜组织和30例OSCC组织中RUNX3 mRNA和蛋白的表达;应用甲基化特异性聚合酶链反应分析10例口腔正常黏膜组织和30例OSCC组织及其相应癌旁组织中RUNX3基因启动子区CpG岛甲基化状态;分析RUNX3启动子区甲基化及表达与临床病理参数之间的关系。结果 30例OSCC组织中,73.3%(22/30)呈现mRNA以及蛋白表达下调或缺失。30例OSCC组织及对应癌旁组织中CpG岛甲基化检出率分别为70.0%(21/30)和55.3%(16/30),两者之间差异无统计学意义(P=0.184)。统计学分析表明RUNX3的表达与其启动子区CpG岛高甲基化呈显著负相关(P=0.001),但发现其甲基化状态与临床病例参数间的关系无统计学意义。结论 OSCC中RUNX3的表达下调或缺失是一种常发事件,启动子区CpG岛高甲基化是其主要的失活机制,且后者可以发生在癌变的早期阶段。

抑癌基因Runt相关转录因子3在胃癌中的表达及其与临床病理学因素的关系

目的探讨胃癌组织中Runt相关转录因子3(Runx3)基因的表达情况及其与胃癌临床病理学因素的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法分别检测52例胃癌组织和配对的正常胃黏膜组织中Runx3 mRNA以及蛋白的表达水平,并分析Runx3表达与胃癌临床病理学因素的关系。结果59.6%(31/52)的胃癌组织出现Runx3 mRNA表达缺失,48.1%(25/52)出现Runx3蛋白表达缺失,其缺失率均明显高于对应的正常胃黏膜组织(P<0.05)。Runx3的表达缺失与肿瘤大小、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05,P<0.01)。Runx3 mRNA表达与蛋白表达呈正相关(r=0.840,P<0.01)。结论Runx3基因与胃癌的发生、发展密切相关,有望成为胃癌诊断和治疗的新靶点。