二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响

目的探讨二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响。方法将人SKOV3卵巢癌细胞株按常规方法进行培养,待细胞长到80%~90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化、传代。取生长良好的P3或P4代细胞按是否加入二价阳离子分为对照组（不加入二价阳离子）和实验组[加入二价阳离子：Ca2＋（2.5、5.01、0.0 mmol·L-1）组和Zn2＋（1.01、0.0 mmol·L-1）组]。在光学显微镜下对各组黏附细胞进行计数。在570 nm波长的酶标仪下测定各组侵袭和转移细胞的OD值,以OD值代表细胞侵袭率和细胞转移率。结果 Ca2＋对人SKOV3卵巢癌细胞黏附具有抑制作用,作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。Ca2＋细胞黏附抑制率范围为10.2%~62.2%,各Ca2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞黏附率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Zn2＋浓度在1.0 mmol·L-1时,黏附细胞略有增多,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在10.0 mmol·L-1时,黏附细胞数量显著降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Ca2＋、Zn2＋对人SKOV3卵巢癌细胞侵袭和细胞转移的抑制作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。细胞侵袭抑制率：Ca2＋范围为24.9%~63.2%,Zn2＋范围为66.1%~87.8%;细胞转移抑制率：Ca2＋范围为22.5%~55.6%,Zn2＋范围为73.1%~91.7%。各Ca2＋、Zn2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞侵袭率和细胞转移率与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论人SKOV3卵巢癌细胞株细胞受到体外二价阳离子浓度的影响,提示配制适当的二价阳离子溶液进行术中冲洗可能会减少卵巢癌细胞的种植和转移。

CIRBP对人卵巢癌细胞SKOV3的促癌功能研究

目的探索冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)对人卵巢癌细胞SKOV3的促癌作用。方法采用生物信息学分析CIRBP在卵巢癌中的表达情况,建立CIRBP基因沉默和过表达的慢病毒稳转SKOV3细胞株,采用CCK-8法、流式细胞法、细胞划痕法分别检测细胞的增殖、凋亡、周期和迁移,采用细胞免疫荧光法检测β-catenin核转位,采用RT-qPCR检测CIRBP mRNA表达水平,采用Western blot检测CIRBP、β-连环蛋白(β-catenin)和磷酸化β-连环蛋白(p-β-catenin)的表达水平。结果CIRBP在卵巢癌中的表达下调(P<0.05),成功构建CIRBP沉默和过表达细胞模型,CIRBP沉默导致细胞增殖、迁移能力下降(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期比例上升(P<0.05),β-catenin蛋白核转位水平下降(P<0.05),β-catenin蛋白水平下调(P<0.05),而p-β-catenin蛋白水平上调(P<0.05),CIRBP的过表达则相反。结论CIRBP促进β-catenin的表达和核转位,从而影响卵巢癌的进展。

芹菜素抑制卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用研究

目的探讨芹菜素对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的抑制作用。方法运用细胞培养、光镜观察及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测芹菜素对SKOV3细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪技术分析芹菜素对SKOV3细胞增殖周期的影响。结果 10～80μmol/L芹菜素均能抑制SKOV3细胞的生长,且呈明显的时间、剂量依赖关系。细胞周期分析显示芹菜素组G2/M期细胞比例明显增多,呈量效关系。结论芹菜素抑制SKOV3细胞增殖,可能通过使SKOV3细胞停滞在G2/M期而诱导其凋亡。

缺氧诱导因子-1α过表达可使卵巢癌细胞株SKOV3的E-钙黏蛋白下调

目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR技术检测HIF-1α和E-cad的蛋白和RNA表达变化;同时用HIF-1α抑制剂雷帕霉素作用于细胞,检测上述各指标的变化。结果随着缺氧时间的延长,HIF-1α蛋白表达逐渐上升,缺氧16h达到高峰,24h仍处于较高水平(P<0.05),而HIF-1α的mRNA表达变化无明显改变(P>0.05);E-cad缺氧8h表达明显下降(P<0.05),缺氧24h表达仅为对照组的6.37%(P<0.05);雷帕霉素可以从蛋白水平抑制HIF-1α表达,防止E-cad在缺氧环境中的降低。结论HIF-1α过表达可通过下调E-cad从而降低SKOV3细胞的黏附能力,由此可能启动肿瘤细胞从原发灶脱落继而转移的第一步。

阿司匹林、扑热息痛和尼美舒利对人卵巢癌细胞株SKOV_3的抑制作用

[目的]研究非甾体类药物阿司匹林、扑热息痛和尼美舒利对人卵巢癌细胞株SKOV3的抑制作用及其相关机制。[方法]利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察阿司匹林、扑热息痛和尼美舒利对人卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用;免疫组化法检测COX-2在SKOV3细胞中的表达情况以及3种药物对SKOV3细胞中Ki-67,C-erbB-2表达的影响;透射电镜观察3种药物作用SKOV3细胞后形态变化和凋亡情况;流式细胞术检测3种药物对SKOV3细胞周期的影响。[结果]阿司匹林、扑热息痛和尼美舒利对人卵巢癌细胞株SKOV3具有生长抑制作用,并呈时间-剂量依赖性。免疫组化发现COX-2在SKOV3细胞中呈阳性表达,阿司匹林使SKOV3细胞中C-erbB-2蛋白表达下降,尼美舒利使SKOV3细胞核中Ki-67蛋白表达下降,扑热息痛对C-erbB-2和Ki-67蛋白表达无影响。透射电镜可见阿司匹林、扑热息痛和尼美舒利作用后的SKOV3细胞中有凋亡小体和坏死细胞的形成。流式细胞术发现400μmol/L尼美舒利和10-2mol/L阿司匹林使SKOV3细胞停滞在G0/G1期。[结论]非甾体类药物,特别是COX-2抑制剂尼美舒利可望作为预防性化疗药物应用于卵巢癌的治疗。

佛波酯对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞体外生长的影响

【目的】探讨佛波酯(TPA)对体外培养的人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖、形态、细胞周期的影响。【方法】试验设试剂对照组、肿瘤细胞阴性对照组及5种不同浓度的促癌剂实验组。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析TPA不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用;光镜下观测细胞形态学的改变;透射电镜观察细胞超微结构的变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡及细胞周期的变化率。【结果】TPA具有抑制人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的作用,呈剂量和时间依赖性。细胞周期发生G1→S期阻滞。【结论】TPA能抑制SKOV3细胞增殖,显著地抑制卵巢癌细胞SKOV3的体外生长。

槲皮素抑制卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用研究

目的:观察槲皮素对卵巢癌细胞株生长的影响,为寻找新的卵巢癌细胞的治疗药物提供实验依据。方法:运用细胞培养、光镜观察及MTT法测定细胞活性等方法,对比卵巢癌细胞株SKOV3在加入不同浓度槲皮素作用不同时间后的生长情况和细胞活性,探讨槲皮素对卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用。结果:加入不同浓度的槲皮素后,卵巢癌细胞株SKOV3在形态学和细胞活性方面均发生改变,表现为细胞坏死、细胞生长抑制率增加,且作用浓度为50μmol/L的最为显著。结论:实验证明槲皮素有抑制卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用,具有时间依赖性,其最佳作用浓度为50μmol/L。

姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响

姜黄素是从姜科黄属植物姜黄根茎中提取的一种植物多酚,具有广泛的药理作用,如抗氧化、抗凝、抗人类免疫缺陷病毒、抗菌、解痉、抗肿瘤、抗突变等作用[1]。因其能抑制多种肿瘤细胞系的生长[2],成为当今的研究热点之一。本实验对姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV-3的体外增殖和凋亡的作用进行研究，现报告如下。

PARP-1抑制剂AG014699对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖及凋亡的影响

目的探讨PARP-1抑制剂AG014699对人卵巢癌细胞株SKOV3`增殖及凋亡的影响。方法①采用MTT法测定AG014699在不同浓度、不同时间对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖作用的影响;②用流式细胞仪测定AG014699在50μmol/L浓度下对人卵巢癌细胞株SKOV3作用24h后对细胞周期及凋亡的影响。结果①MTT测定:在24、48、72h时AG014699在10μmol/L分别测得的OD值与对照组相比,P<0.05,有统计学差异;②流式细胞仪测定:AG014699在50μmol/L浓度下对SKOV3作用24h能明显改变细胞的周期分布,诱导细胞凋亡。结论 AG014699能明显抑制人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖并诱导其凋亡。

香菇多糖对卵巢癌细胞株SKOV3增殖及其裸鼠移植瘤生长抑制作用的研究

目的:研究香菇多糖(LNT)对卵巢癌细胞株SKOV3增殖及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:LNT与卵巢癌细胞株SKOV3共同体外培养,绘制细胞生长曲线,观察LNT对卵巢癌细胞株SKOV3生长的影响;建立卵巢癌皮下移植瘤动物模型,采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,观察LNT对移植瘤的生长抑制作用,并利用新生血管计数实验检测LNT对卵巢癌组织血管生成的影响。结果:LNT对卵巢癌细胞株SKOV3生长具有显著抑制作用,并呈现量效关系;在卵巢癌皮下移植癌动物模型中,注射香菇多试验组瘤重及瘤体积明显低于对照组,PCNA的表达随着LNT的浓度增加而降低;LNT组肿瘤周围的血管数明显少于对照组。结论:LNT可明显抑制体外培养卵巢癌细胞株SKOV3及卵巢癌皮下移植瘤的生长。

蒺藜皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响

目的探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响及机制。方法选择对数生长的卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组,实验组加STT。采用MTT法检测细胞活性,流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3肿瘤细胞凋亡率及细胞周期变化;应用免疫组化检测SKOV3 Bcl-2和Bax蛋白表达变化。结果与对照组相比,实验组对卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.05)。细胞周期分析显示,实验组使卵巢癌细胞的S期细胞比例减小,G1期细胞比例增大(P<0.05)。STT能够降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05),增加Bax蛋白表达(P<0.01)。结论 STT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,其机制可能与细胞周期发生停滞有关,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白和增加Bax蛋白的表达而诱导细胞凋亡。

莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞株JAK2/STAT3信号通路影响的研究

目的观察莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞株体外生长的影响及对SKOV3细胞株JAK2/STAT3信号通路基因表达的影响,探讨莪术醇治疗卵巢癌的分子机制。方法不同浓度莪术醇作用于人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法检测SKOV3细胞的增殖抑制率,实时荧光定量-PCR法检测SKOV3细胞中JAK2、STAT3基因表达水平。结果莪术醇对卵巢癌SKOV3细胞有明显的增殖抑制作用,其强度随药物作用时间及浓度的增加而增强,呈时间-剂量依赖性。实时荧光定量-PCR法检测证实莪术醇作用后SKOV3细胞中JAK2、STAT3基因表达受到明显抑制。结论莪术醇能明显抑制SKOV3细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是通过降调节JAK2、STAT3基因的表达来实现的。

艾迪注射液对SKOV_3人卵巢癌细胞作用的研究

目的探讨艾迪注射液对SKOV3人卵巢癌细胞的抗肿瘤作用。方法应用MTT法和RT-PCR法、ELISA方法分别检测艾迪注射液对SKOV3细胞增殖及SKOV3细胞中VEGF mRNA、VEGF蛋白含量的影响。结果艾迪组SKOV3人卵巢癌细胞增殖受到抑制,48h达高峰,抑制率59.51%;SKOV3细胞中VEGFmRNA含量艾迪组较对照组减少,差异有显著性(P<0.01)。结论艾迪能抑制SKOV3人卵巢癌细胞的增殖,在mRNA、蛋白水平抑制VEGF的表达,进而实现其抗肿瘤作用。

42℃温热联合顺铂对人卵巢癌细胞SKOV3毒性的影响

目的探讨42℃温热联合化疗药物顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV-3作用的规律及其机制。方法应用四氮唑蓝快速比色法测定42℃热疗组、单纯化疗组以及以不同序贯方式结合的热化疗组对人卵巢癌细胞SKOV-3的生长抑制率;流式细胞仪测定各组细胞周期的变化;金氏公式分析相互作用指数,评价温热化疗两因素联合的作用。结果 42℃单纯热疗和单纯化疗均对卵巢癌癌细胞有抑制和杀伤作用;42℃热疗与化疗药物以不同方式联合,抑制作用均强于单纯化疗组和单纯热疗组(P<0.05),尤以热化疗同时作用组效果最佳(P<0.001);细胞周期分析发现:42℃热疗降低了S期细胞所占比例;与单纯化疗组相比,先化疗后热疗组、先热疗后化疗组和热化疗同时组的S期细胞所占比例减少,G1期细胞增多,其中热化疗同时组增减的幅度最大。结论 42℃温热可以明显增强化疗药顺铂的毒性,结合方式上以热化疗同时进行最佳,其作用机制可能与干扰细胞周期有关。

重组腺病毒Ad-IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响

目的探讨重组腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3周期、增殖和凋亡的影响。方法采用重组人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴细胞,感染48 h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad-IL-12),同时设未感染组(SKOV3)和Ad-GFP空载感染组(SKOV3/Ad-GFP)作为对照。RT-PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法检测卵巢癌细胞增殖,流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡,RT-PCR和Western blot检测抗凋亡蛋白BCL-2、survivin的表达。结果重组腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴细胞,分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比,SKOV3/Ad-IL-12组G1期细胞显著增加,凋亡率显著升高(P<0.05),SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin显著下调(P<0.05)。结论人IL-12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞,分泌IL-12 P70蛋白,并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖。

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株3AO细胞增殖和凋亡影响的研究

目的 探讨三氧化二砷对人卵巢癌细胞株 3AO细胞体外增殖和凋亡的影响作用。方法 人卵巢癌细胞株 3AO细胞体外培养。实验组三氧化二砷浓度分别为 0 5、1 0、2 0、4 0、8 0 μmol/L ,设加入空白培养液为对照组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)及流式细胞技术 (FCM ) ,计算各组细胞的生长抑制率、细胞凋亡率 ,并进行细胞周期分析。结果 三氧化二砷有效地抑制 3AO细胞生长 ,具有时间及浓度依赖性 ,P <0 0 1;三氧化二砷作用后 ,3AO细胞凋亡率随时间及浓度升高而升高 ,P <0 0 1;三氧化二砷使 3AO细胞S期增加。结论 三氧化二砷抑制 3AO细胞生长 ,诱导其凋亡 ,并使其S期阻滞。

人重组蛋白胸腺素B10促进卵巢癌细胞系SKOV3凋亡

β族胸腺素由于具有维持细胞骨架的动态平衡,促进血管生成、伤口愈合、心肌修复等多种生物学功能,并与肿瘤发生、转移具有密切关系而倍受关注.本文研究对象胸腺素B10（thymosinβ 10,Tβ10）定位于胞内,大量文献证实Tβ10与肿瘤的发生发展有关[1-2],但在不同类型的肿瘤中它的功能还存在争议,Tβ10在肿瘤细胞凋亡中所起的作用也鲜有报道.本实验将在卵巢癌细胞系SKOV3中探索Tβ10对其凋亡的影响及其分子机制.

内皮祖细胞对卵巢癌细胞SKOV3生物学功能的影响

目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响。方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养组(SKOV3组),SKOV3+EPCs共培养组(SKOV3+EPCs组),SKOV3+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+贝伐单抗组)和SKOV3+EPCs+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+EPCs+贝伐单抗组),并比较4组SKOV3的增殖、凋亡、迁移和黏附能力的变化。结果:①SKOV3+EPCs组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数和OD值高于SKOV3组(P<0.05,P<0.01);②SKOV3+贝伐单抗组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3组(P<0.05,P<0.01):③SK—OV3+EPCs+贝伐单抗组SKOV3的增殖活性、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3+EPCs组(P<0.05,P<0.01),而OD值显著高于SKOV3+EPCs组(P<0.01)。结论:共培养条件下EPCs能促进SKOV3生物学功能,贝伐单抗则相反,EPCs能协同贝伐单抗抑制SKOV3的生物学功能。

AM及其抑制剂对人卵巢癌细胞株(CAOV3)PKB活性的影响

目的探讨肾上腺髓质素(Adrenom edullin,AM)及AM受体阻断剂(AM22-52)对人卵巢癌细胞株CAOV3蛋白激酶B(PKB)活性的影响。方法以不同浓度的AM和AM22-52诱导CAOV3细胞,利用Western印迹方法,测定PKB活性的变化。结果AM和AM受体阻断剂AM22-52对t-PKB(total-PKB)的表达量均无明显影响;随着AM浓度(1×10-9～1×10-6mol/L)的增加,CAOV3细胞p-PKB活性随之升高,呈剂量依赖关系;AM受体阻断剂AM22-52(1×10-9～1×10-6mol/L)抑制CAOV3细胞内p-PKB活性,也呈剂量依赖效应。结论AM激活CAOV3细胞内的PKB信号通路,AM22-52可有效阻滞此传导途径,为卵巢癌的生物治疗提供新的思路。

不同磁感应强度的微秒脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3的影响

雷电μs脉冲电磁场的危害越来越严重,却鲜有人研究此μs脉冲电磁场对人的影响。为研究μs脉冲磁场的生物电磁效应机制以及对人体健康的影响,使用人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验对象,采用实验室自制的μs脉冲磁场发生器产生不同磁感应强度的μs脉冲磁场（磁感应强度为1~200 m T,上升时间为800 ns,脉冲宽度为8.4μs,频率为8 Hz）处理细胞3 d时间,每天间隔12 h时间处理1次,每次处理时间为1 h。处理结束后24 h时间分别使用噻唑蓝（MTT）和流式细胞术（flow cytometry method,FCM）来检测细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果显示：增殖抑制率与脉冲磁场的磁感应强度不呈现趋势变化关系,且增殖抑制率均低于5%,μs脉冲磁场对SKOV3细胞的增殖抑制率不具有统计学意义（概率P〉0.05）;肿瘤细胞的凋亡率与脉冲磁场的磁感应强度也不呈现趋势变化关系,且凋亡率均低于12%,脉冲磁场对SKOV3细胞的凋亡也不具有统计学意义（概率P〉0.05）。研究结果揭示：不同磁感应强度（1~200 m T）的μs脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3无显著影响。