逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因(mdr-1)导入小鼠造血细胞的实验研究

本文利用逆转录病毒介导的基因转移方法，将人多药耐药基因ｍｄｒ－１导入小鼠造血细胞，并对转基因造血细胞的耐药性及移植特性进行了初步研究。含人ｍｄｒ－１ｃＤＮＡ的重组逆转录病毒载体质粒，经脂质体介导的基因转移方法导入包装细胞ＰＡ３１７，再经秋水仙素筛选。获得产逆转录病毒的包装细胞，其病毒滴度可达１．２×１０５ｃｆｕ／ｍｌ。在含小鼠骨髓贴壁细胞层的长期培养体系中，利用逆转录病毒上清对造血细胞进行转染。通过抗性ＣＦＵ－ＣＭ检测，其基因转移效率可达７．０％。将转基因造血细胞移植经照射预处理的小鼠，可重建受体小鼠造血功能。小鼠造血重建后４个月，其骨髓造血细胞与外周血细胞可检测到人ｍｄｒ－１ｃＤＮＡ。