王熙凤与平儿虚实主仆关系探考

《红楼梦》作为一部鸿篇巨著,刻画了形形色色的人物形象,不同人物之间又构成了交叉混合的复杂关系,其中主仆关系钩织了不同的人物关系网,男女主人与仆人的关系变化推动了小说情节的发展。王熙凤与平儿两人从根本上来说属于主仆关系,但是由于贾琏的存在,她们又是妻和妾的关系。二人的关系比较复杂,有虚有实,不同于普通的主仆关系,这与平儿的特殊的品性有关。平儿虽出身低微,但有着出色的才能和高尚的品德,她在整部小说中反仆为主,成为自己精神的主人。

唐初仆射与宰相名号关系探究

仆射,是唐代的百官之长,也是唐初公认的宰相,位高权重。但随着三省制逐渐演变为中书门下体制,仆射的宰相地位便成了体制内的较大问题,唐初统治者对这一问题有不同的解决措施,但最终的结果都是仆射被排除出宰相机构。仆射被正式排除出宰相机构的时间,是景云二年。然而,仆射并非是在这一年立即失去宰相的身份,而是先在神龙元年正式失去了正宰相的身份,而后才于景云二年被排除出宰相机构。

不同盐度、饵料和光照条件培养下拟伍氏游仆虫的种群动力学响应

为探究不同盐度、饵料和光照条件培养下拟伍氏游仆虫(Euplotes parawoodruffi)的种群动力学响应,本实验采用酵母和杜氏盐藻2种不同类型的饵料喂食拟伍氏游仆虫,在一系列盐度梯度(5、10、15、20、25)及2种光照条件[光照(14 L∶10 D)、全黑暗]下,测定了拟伍氏游仆虫的种群动力学参数变化。使用种群动力学参数(环境容纳量K、种群内禀增长率r、及世代时间G)评价盐度胁迫和不同培养条件对拟伍氏游仆虫的影响。结果表明:在盐度15处理组拟伍氏游仆虫的环境容纳量达到峰值,高盐度下(20~25)拟伍氏游仆虫的环境容纳量显著下降(P<0.05)。随盐度变化,杜氏盐藻组拟伍氏游仆虫的种群内禀增长率呈先上升后下降的趋势,酵母组种群内禀增长率呈先下降后上升的趋势;酵母组喂养的拟伍氏游仆虫环境容纳量高于杜氏盐藻喂养组,内禀增长率低于杜氏盐藻喂养组。光照条件下拟伍氏游仆虫的环境容纳量高于全黑暗条件,内禀增长率低于全黑暗条件。拟伍氏游仆虫对盐度胁迫的响应敏感,可作为环境监测的指示生物,在盐度为15,光照条件(14 L∶10 D)下使用酵母投喂,可实现拟伍氏游仆虫高密度的培养。

黄色伪角毛虫和扇形游仆虫对盐度的适应性

为了阐明原生动物纤毛虫对盐度变化的适应性,在(25±1)℃下,将生活在盐度30下的黄色伪角毛虫(Pseudokeronopsis flava)和扇形游仆虫(Euplotes vannus)分别接种于容积3 mL海水的六孔培养板中,虫体密度为10 ind.·mL-1,由高温灭菌的蒸馏水与海水晶配成盐度为10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65,及70的海水。每组3个平行,每24 h对两种纤毛虫进行计数并测量其体长和体宽,观察其种群密度变化和生态学变化。7 d的实验发现,两种纤毛虫在盐度10~70中均可存活,40盐度组生长率最高,随着盐度升高,黄色伪角毛虫的停滞期延长,而扇形游仆虫的停滞期下降;盐度高于55时,两种纤毛虫的细胞均皱缩,黄色伪角毛虫的长轴、短轴分别下降68.17%和69.26%,虫体变为圆形、梭形或其他不规则形状;盐度由55升至60时,扇形游仆虫的长轴下降了69.88%,短轴下降了72.01%;盐度升高至65后,虫游动减慢甚至停止,食物泡逐渐扩大直至充满整个虫体,体色改变;盐度70时,虫体变为圆型。两种纤毛虫的最适生长盐度为40。本研究结果可为水生生物适应海洋盐度变化的研究提供数据支持。

柳宗元“民本官仆”思想的形成和实践

柳宗元在任永州司马漫长的政治贬谪岁月中,在深入民间了解百姓疾苦之后,逐渐形成了“以民为本”与“吏为民役”的为官思想。在担任柳州刺史期间,柳宗元积极革除当地奴婢买卖陋习;重修孔庙,宣扬儒家教化、发展教育以改良社会风气;凿井、植树以改善民生,促进了柳州的发展。但其崇尚佛教有一定的愚民色彩,固守儒家重农抑商的传统等与“民本官仆”思想背离,显示出一定的历史局限性。

环境、政治与日常:郑州仆射陂的空间功能与城市记忆

城市湖泊是人类活动的产物,其兴衰变迁与城市环境、政治、文化的发展密不可分。仆射陂曾是郑州城东的一处湖泊,北魏孝文帝将其赐予尚书仆射李冲而得名,自此从自然湖变成“非自然”湖,是闻名遐迩的“官湖”。后在明清时期经过郑州圃田阴氏大族的几代营建,成为郑州八景之一“凤台荷香”的核心和依托,是郑州城市生活的重要标志性空间,交织了娱乐、生产与消费、文化、民间信仰等多元空间功能。清代以后,随着郑州城市水环境、政局、城市空间等多重因素的变迁,尤其是近代以来城市化、现代化的影响,仆射陂最终归于平陆。这一“水域空间”的演变历程,叠加了政治、文化、生态、城镇化等诸多因素,是郑州城市文脉与城市记忆不可或缺的一部分。

游仆虫中心蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体制备

中心蛋白是一种在微管组织中心的复制和分离中起着重要作用的蛋白质。为了进一步进行中心蛋白结构和功能的研究 ,我们克隆了单细胞真核生物游仆虫中心蛋白基因并构建了重组表达质粒pGEX 6P EoCen ,其在大肠杆菌BL2 1中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达 ,融合蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的 32 6 %。GST抗体进行Westernblotting检测结果为阳性。经GST亲和层析和superdex 75凝胶层析后得到 90 %以上电泳纯的蛋白。用纯化后的蛋白免疫大鼠产生抗血清 ,经ELISA检测抗体效价达 1∶2 5 6

游仆虫Rab蛋白基因的克隆表达与纯化

为对单细胞原生动物纤毛虫中Rab蛋白的功能进行研究 ,进而探讨以胞吞和胞吐为主要物质交换途径的纤毛虫中囊泡定向运输的机理 .利用PCR技术从游仆虫大核DNA及cDNA中扩增出rab基因 ,并进行了序列分析 ,该基因全长为 783bp ,两端为端粒序列 ,编码框为 6 2 4bp ,编码 2 0 7个氨基酸 ,开放读框中有 3个TGA ,在此编码半胱氨酸 .利用定点突变将rab基因中 3个TGA突变为通用半胱氨酸密码子TGC .将游仆虫Rab蛋白基因构建于原核表达载体pGEX 4T 2中 ,得到的重组质粒pGEX Eorab1转化至大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,IPTG诱导表达 .表达产物与抗GST抗体在 4 9kD处有很强的交叉反应 .融合蛋白GST EoRab1通过亲和层析柱纯化和凝血酶的切割 ,再经两步纯化得到电泳纯的游仆虫Rab蛋白 .

休眠期和营养期包囊游仆虫的纤毛器骨架及其微管蛋白

应用光镜和透射电镜术 ,显示了包囊游仆虫休眠细胞中纤毛器骨架的形态 ,并对该纤毛虫休眠细胞和营养细胞的纤毛器及其α、β -微管蛋白进行了免疫荧光定位的比较研究。由免疫荧光显微术显示 ,包囊游仆虫形成休眠包囊后 ,背部毛基体完整地按原有模式保存下来 ;纤毛杆解聚后微管蛋白多集中在细胞皮层 ,小部分均匀散布在细胞质中。据所得结果认为 ,包囊游仆虫形成包囊后 ,微管蛋白主要有 3个去向 ,即 :①处于自噬泡内被逐步消化 ;②以“微管蛋白库”的形式分布于细胞皮层及细胞质中 ;③保留在残留的基体中。此外 ,以往研究中发现的棘毛基部纤维网络未被标记上 。

海洋纤毛虫实验生态学研究 IV:不同人工海水培养液及温度对扇形游仆虫种群增长的影响

为了揭示出海洋纤毛虫在人工海水中及不同温度下的种群动力学,利用实验生态学方法,就4种培养液及2种(17℃和23℃)温度对海洋纤毛虫扇形游仆虫(Euplotesvannus Müller,1786)种群增长的影响进行了初步探讨.结果显示①该种纤毛虫原生动物在4种人工海水培养液中的种群增长率大小顺序为牛肉浸膏培养液>米粒培养液>酵母粉培养液>蛋白胨培养液;②种群密度大小顺序依次为米粒培养液>牛肉浸膏培养液>酵母粉培养液>蛋白胨培养液;③指数增长期及稳定期在米粒培养液中均长于牛肉浸膏培养液;④随着培养温度的升高,种群增长率增大,指数增长期及稳定期缩短;⑤温度系数(Q10)的大小顺序为蛋白胨培养液>牛肉浸膏培养液>米粒培养液>酵母粉培养液.结果表明,米粒人工海水培养液不仅适合于保种培养,而且适合于种群的扩大培养,而牛肉浸膏培养液更适合于种群的快速扩大培养,其他两种培养液则只适合于保种培养.

包囊游仆虫纤毛器微管在不同生理状态下的分化

应用FLUTAX染色及荧光显微术研究了包囊游仆虫的皮层微管胞器及其形成包囊和脱包囊过程中结构的分化:(1)细胞无性分裂过程中,棘毛基部的毛基体由紧密聚集状态逐渐分离、瓦解和消失;背纤毛基体逐渐膨大,基体内的周围微管散开成梅花形,之后在相应皮层区发生由颗粒组成的条带形原基.(2)细胞形成包囊时,口围带、波动膜和额腹横棘毛等微管胞器经历了部分去分化的过程,伴随着细胞体的凝缩,其纤毛器相互聚集,定位于球形体包囊细胞腹面;背纤毛按原有模式排列,位于包囊细胞背面.(3)脱包囊过程中,细胞吸水膨大,细胞体分化成变形虫状并显示一致的弱荧光,但未见微管胞器的荧光图像;细胞通过包囊壁背面小孔脱囊而出,恢复成为正常形态的纤毛虫;此后,在细胞脱包囊后残留的包囊壁背壁尚保存有部分背纤毛的痕迹.根据所得结果推测,形态发生中,纤毛器微管对新结构的形成可能有物质联系或物质贡献;脱包囊时,细胞成变形虫状,其微管结构可能发生了解聚和再分化的过程.

镰游仆虫腹面皮层细胞骨架的扫描电镜观察

应用非离子去垢剂抽提和扫描电镜样品制备、观察相结合的方法 ,显示了镰游仆虫的腹面皮层细胞骨架 ,详细描述了处于毛基体和毛基体下水平的口围带、口侧膜、额腹横棘毛骨架 ,以及口围带小膜托架、口侧膜托架、额腹横棘毛托架的主要附属纤维和非纤毛区表膜下皮层骨架的立体图形。作者据所述各种纤毛器托架附属纤维的定位和分布特征推测 ,这些附属结构可能与细胞内各种纤毛器间的联系 ,以及包括纤毛器运动在内的整个细胞运动的协调等有关.

EoRab43为八肋游仆虫中编码非典型Rab的基因

Rab蛋白是与真核细胞内的膜泡运输密切相关的调节分子。本研究运用简并引物PCR技术从原生动物八肋游仆虫大核基因组中克隆获得了一个全新的Rab基因,EoRab43 (GenBank登陆号为EU365391) ,该基因拟编码蛋白的氨基酸序列基本包括Rab蛋白保守的GTP结合区以及RabF模序。Blast结果显示,EoRab43序列与其它生物中Rab5A、Rab6和Rab13的一致性相对较高,但也仅为36·4 %-38·5 %,无法将其归类于任何现有的Rab蛋白亚家族。序列分析显示该基因拟编码的蛋白质属于非典型Rab,这是首次在游仆虫中发现的编码非典型Rab蛋白的基因,推测其在原生动物八肋游仆虫细胞内可能执行某些特殊的生理功能。

华美游仆虫细胞微管胞器的直接荧光和免疫荧光标记

应用直接荧光和免疫荧光标记显示,腹毛目纤毛虫华美游仆虫(Euplotes elegans)细胞微管胞器由口围带、波动膜、额腹横棘毛、缘棘毛、尾棘毛、背触毛等纤毛器微管以及纤毛器基部附属微管和非纤毛区皮层微管骨架组成。其中,口围带基部含有小膜托架、小膜附属微管,波动膜基部含有波动膜托架,额腹横棘毛基部含有前纵微管束、后纵微管束、横微管束或放射微管束,左缘棘毛和尾棘毛基部微管束分化不明显,背纤毛基部含有玫瑰花状的基体周围骨架,这些微管结构与细胞背腹面皮层纵微管与横微管网一起组织成该类纤毛虫的主要皮层细胞骨架。结果表明,游仆虫皮层细胞骨架是以微管为主要成分构建而成的,并且其棘毛基部微管的组成具有与其他类纤毛虫不同的特征;游仆虫间期细胞及形态发生时期纤毛基体或纤毛原基中存在中心蛋白,其可能与纤毛基体结构的维持及基体发生过程中微管的组装有关。

一种游仆虫皮层纤维结构的扫描电镜研究

应用扫描电镜研究了一种游仆虫皮层纤维结构。结果显示,口围带托架由横向组排在一起的小膜托架单元组成,每个小膜托架是由40—50nm直径的纤维编织成的长方形薄片,波动膜托架是横向平行排列和纵向平行排列的两部分共60多股纤维交错编织成的网状结构;额腹横棘毛区表膜下含有纵纤维层、球形纤维层和深部纤维层三层纤维,其纵纤维层在相应于游仆虫皮层脊(或脊和唇)之间的表膜下方被纵沟分成几部分;背面表膜下含有纵纤维层,这层纤维下似乎也有球形纤维层。此外,作者也推测了这些皮层纤维结构在游仆虫皮层形态的保持,支持纤毛器和纤毛器运动及形态发生等方面的作用。

包囊游仆虫包囊形成和解脱过程中纤毛器的分化

包囊游仆虫(Euplotes encysticus)形成包囊时,各类纤毛器中的纤毛杆被部分地或全部地吸收,毛基体被保留下来。休眠包囊中,背纤毛器的定位无明显变化,但原腹面纤毛器中的口围带和波动膜、额腹棘毛和横棘毛,以及左、右尾棘毛都按序陷入在细胞质内深处,并相互汇聚在一起。脱包囊时,纤毛结构在原毛基体上再分化,新纤毛器按口围带、横棘毛、额腹棘毛和左、右尾棘毛的顺序从细胞内显露出来。

美丽硬仆骨舌鱼mtDNA D-loop区遗传变异特征

采用直接测序法分析美丽硬仆骨舌鱼(Scleropages formosus)3个种群(金龙鱼、红龙鱼和青龙鱼)共24个个体的线粒体D-loop区的遗传变异特征。经序列比对、分析,金龙鱼、红龙鱼和青龙鱼的D-loop序列不仅在个体间存在位点序列的变异(17个简约性信息位点),而且还存在序列长度的多态性(长度为915-924 bp),这种长度的差异在于存在不同碱基长度的微卫星序列。3种龙鱼碱基组成基本一致,G含量偏低。定义了10种单倍型,但金龙鱼、红龙鱼和青龙鱼间没有共享单倍型,单倍型多样度较高(0.667-1.00),核苷酸多样度较低(0.001 09-0.003 23)。AMOVA分析显示,变异主要来自地理区内不同群体间,个体间遗传距离为0-0.008 7,显示遗传变异仍处于种内水平。NJ、MP和Bayesian构建的分子系统树拓扑结构基本一致,但不能有效地反映金龙鱼、红龙鱼和青龙鱼间的亲缘关系。

一种游仆虫棘毛基部纤维的形态及其在形态发生过程中的演化

游仆虫皮层棘毛基部纤维包括纵纤维、前纵纤维和放射纤维:额腹棘毛基部后纵纤维一般长而粗大,前纵纤维次之,放射纤维较细小;横棘毛基部前纵纤维几乎纵贯额腹横棘毛区皮层,而放射纤维较为细小;尾棘毛基部仅与一类更为细小的放射纤维相联系。不同额腹棘毛基部的同种纤维大小、形态不尽一致,各种纤维由棘毛基部区向皮层细胞质多个方向伸展,表现出极性和不对称性。并且额腹横棘毛基部纤维相互交联在一起,导致这一皮层区域形成强大的棘毛基部纤维网络。 游仆虫形态发生中,横棘毛原基向皮层裂口上方伸出一束粗大的纤毛芽时,先后发生模棘毛原基前纵纤维芽、额腹棘毛原基后纵纤维芽,以及这些棘毛原基放射纤维芽。纤维芽的发育顺序是从左列棘毛原基开始,到右侧的棘毛原基。这种纤维物质生长的顺序性,与新棘毛原基的发生和分化是相一致的。并且额腹棘毛基部后纵纤维和横棘毛基部前纵纤维形成中显示出极性和方向性,纤维物质生长伸长的方向与相应的新棘毛迁移方向相反。 老棘毛基部纤维在游仆虫形态发生过程中必然要退化。我们推测,其瓦解过程与细胞分化中老棘毛逐渐失去功能是有联系的。

纳米二氧化钛对纤毛虫阔口游仆虫超微结构的影响研究

为探讨纳米二氧化钛(nano-TiO2)对纤毛虫阔口游仆虫细胞(Euplotes eurystomus)超微结构的影响,研究选取了两种粒径(5 nm、25 nm)的TiO2对阔口游仆虫进行毒性处理,并采用透射电镜术对其超微结构进行观察。结果表明,纳米TiO2能穿破核膜及线粒体膜,并可引起阔口游仆虫背腹表膜下微管层局部缺失、细胞质空泡化、细胞核核仁减少及染色质聚集浓缩、线粒体变形瓦解等现象;与25 nm TiO2相比,5 nm TiO2对细胞的损伤更为严重。

包囊游仆虫皮层和营养核的超微结构研究

为研究纤毛虫在不同生理条件下结构的分化及其调节机理，本文应用透射电镜术显示，营养期包囊游仆虫背、腹面皮层表膜下合３种方式排列组成的纵微管层以及深部微管；口区皮层内含高电子密度的杆状小体；口围带小膜基部含电子致密带和小膜托架，棘毛基体基部及基体下微管束形成围棘纤维篮；背纤毛基体下方也含微管结构；大核染色质附着在核膜上，核膜其他区域有规则排列的核孔。