一种新的生物纯化技术:介体电泳技术

介绍一种用于生物纯化的介体电泳技术 ,对其优越性、原理及作用方式等进行了阐述。认为介体电泳技术相对于柱层析等目前常用分离技术 ,具有能够保持被分离物质的生物活性、回收率高、分辨高等优点 ,可考虑替代柱层析用于分离纯化生物活性大分子。

应用介体电泳技术纯化纤维蛋白原

目的 采用介体电泳技术从人血浆中纯化纤维蛋白原。方法在pH 8 3的条件下 ,纤维蛋白原和杂质都带负电荷 ,它们在电场作用下向同一方向运动 ,但分离膜只允许分子量较小的杂质通过 ,分子量较大的纤维蛋白原不能通过 ,而被分离在分离膜的另一侧。第二步是在pH 5 2的条件下 ,纤维蛋白原带正电荷而杂质带负电荷 ,纤维蛋白原和杂质在电场的作用下向两个不同的电极方向运动 ,结果纤维蛋白原得以进一步纯化。结果 SDS -PAGE结果显示经过两步纯化 ,99%杂质被除去 ,生物学检测纯化后的纤维蛋白原依然具有凝固作用。结论介体电泳技术纯化纤维蛋白原的时间短 ,回收率高 ,且成本低。

人鼠嵌合单克隆抗体c30.6的纯化

采用介体电泳技术对CHO细胞培养液中的人鼠嵌合单克隆抗体c30 6进行纯化 ,第一步在pH8 6条件下进行 ,抗体带正电荷而培养液中的大部分杂质带负电荷 ,抗体和杂质在电场作用下向两电极运动 ,结果被分离在分离膜的两侧 ,SDS -PAGE显示抗体纯度达 95 % ,且剩余杂质的分子量均小于抗体的分子量。第二步是在pH6 0条件下进行 ,此时抗体和杂质都带正电荷 ,它们在电场作用下向同一方向运动 ,但分离膜只允许分子量较小的杂质通过 ,抗体得以进一步纯化 ,抗体的回收率为 80 % ,而且生物活性未受影响。