期刊文献+
共找到56篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
鸡大肠杆菌R质粒介导转移抗药性的启示 被引量:2
1
作者 李福岭 李宪柱 +2 位作者 李道明 吴振华 王祖京 《中国家禽》 北大核心 2002年第5期42-42,共1页
关键词 大肠杆菌 R质粒 介导转移 抗药性
下载PDF
家蚕精子介导报告基因gfp和egfp转移技术的研究 被引量:4
2
作者 左正宏 吴春旭 +2 位作者 桂慕燕 陈元霖 洪满贤 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期580-584,共5页
探讨家蚕精子介导基因转移技术能否有效地将外源基因导入并整合到家蚕基因组中,使之稳定遗传.分别进行了含gfp报告基因的pG350载体和含egfp报告基因的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体的精子介导基因转移实验.结果表明,导入线性pG350载体,... 探讨家蚕精子介导基因转移技术能否有效地将外源基因导入并整合到家蚕基因组中,使之稳定遗传.分别进行了含gfp报告基因的pG350载体和含egfp报告基因的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体的精子介导基因转移实验.结果表明,导入线性pG350载体,在14个G0代实验蛾区的DNA样品中,有5个PCR检测为阳性,阳性率为35.7%;对G1代的PCR与Southern blot检测的结果证明,导入的gfp基因存在于G1代的家蚕基因组中.导入不同浓度或构型的pMD-Fib-IE-EGFP与pEGFP-N3载体时,对G0代的PCR检测结果表明,导入线性pMD-Fib-IE-EGFP组的PCR阳性率为61.2%,而导入环状质粒组的PCR阳性率为57.1%;导入环状pEGFP-N3组的PCR阳性率为46.2%;对部分PCR阳性蛾区进行Southern blot检测结果表明,导入的egfp基因整合在G0代家蚕基因组中.本研究的结果表明,家蚕精子介导基因转移能够将外源基因有效地导入、整合于家蚕基因组,并可遗传至G1代. 展开更多
关键词 精子介导基因转移 家蚕 绿色荧光蛋白
下载PDF
脂质体介导基因转移技术在尘肺研究中的初探 被引量:2
3
作者 张慧峰 李秋营 张欣樵 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期37-38,共2页
脂质体介导基因转移技术在尘肺研究中的初探山西医科大学劳动卫生教研室(太原030001)张慧峰李秋营张欣樵*利用基因治疗原理,将外源目的基因导入肺组织特异细胞,以抑制肺组织纤维化过程,将为尘肺研究开辟新的途径,为此,必... 脂质体介导基因转移技术在尘肺研究中的初探山西医科大学劳动卫生教研室(太原030001)张慧峰李秋营张欣樵*利用基因治疗原理,将外源目的基因导入肺组织特异细胞,以抑制肺组织纤维化过程,将为尘肺研究开辟新的途径,为此,必须建立将外源基因导入肺组织的方法。... 展开更多
关键词 尘肺 脂质体 介导基因转移 基因治疗
下载PDF
减毒沙门菌体内介导基因转移对ACC-M抑制的实验研究 被引量:1
4
作者 江中明 赵平 +4 位作者 曹志中 刘军 刘宏 周中华 吕春堂 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2005年第2期145-148,共4页
目的:观察构建含有Tip30与人IFN-γ基因的真核表达及共表达质粒的重组减毒伤寒沙门菌对腺样囊性癌肺转移抑制作用。方法:4周龄BALB/Cnunu雄鼠25只,随机分成5组,每组5只,其中对照组5只(PBS)、单纯减毒沙门菌组5只(SL7207)、携带人IFN-γ... 目的:观察构建含有Tip30与人IFN-γ基因的真核表达及共表达质粒的重组减毒伤寒沙门菌对腺样囊性癌肺转移抑制作用。方法:4周龄BALB/Cnunu雄鼠25只,随机分成5组,每组5只,其中对照组5只(PBS)、单纯减毒沙门菌组5只(SL7207)、携带人IFN-γ基因减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-IFN)、携带Tip30基因减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-Tip30)、携带Tip30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的重组减毒沙门菌治疗组5只(SL7207/pCI-Tip30/IFN),均于尾静脉接种高转移腺样囊性癌(ACC-M)细胞。10d后对照组裸鼠口服PBS,其余各治疗组口服相应的减毒沙门菌,隔周1次,共3次。检测:裸鼠肺转移肿瘤细胞内IFN-γ、Tip30的表达、肿瘤生长体积、瘤体重量、带瘤存活期。结果:在治疗组裸鼠肺转移肿瘤细胞胞浆内有对应表达IFN-γ、Tip30;各治疗组均较对照组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长;携带基因治疗组较SL7207治疗组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长;联合基因治疗组较单基因治疗组肿瘤生长慢,肿瘤体积小,重量轻,抑瘤率高,带瘤存活期长。结论:减毒伤寒沙门菌不仅能作为载体介导基因对腺样囊性癌肺转移有抑制作用,而且自身对腺样囊性癌肺转移也有抑制作用。联合基因较单基因抑制效果好,有协同作用。 展开更多
关键词 介导基因转移 ACC-M 实验研究 IFN-Γ基因 减毒伤寒沙门菌 腺样囊性癌 TIP30基因 重组减毒沙门菌 共表达质粒 肿瘤生长 体内 转移抑制作用 BALB/C 肿瘤体积 治疗组 联合基因 转移肿瘤 存活期 对照组 抑瘤率 肿瘤细胞
下载PDF
精子介导基因转移的研究进展
5
作者 高晓平 吴无畏 《国外医学(遗传学分册)》 1996年第1期53-55,共3页
利用精子作为载体,将外源基因导入卵细胞获得受精卵或转基因动物,也许是最简单、有效的转基因技术。本文综述了精子载体法及其研究进展,这对于进行转基因研究工作可以提供参考价值。
关键词 精子 介导基因转移
全文增补中
病毒介导的基因转移技术在海洋无脊椎动物中的研究进展
6
作者 陈学美 申晓彤 +1 位作者 李炎 郭华荣 《海洋科学前沿》 2017年第2期55-60,共6页
病毒介导的基因转移技术是利用携带外源目的基因的病毒载体、1个或多个包装载体以及包装细胞,模拟病毒的侵染和转移行为,实现将外源目的基因导入宿主细胞的基因转移技术。目前,已建立的比较成熟的病毒基因转移系统包括逆转录病毒、腺病... 病毒介导的基因转移技术是利用携带外源目的基因的病毒载体、1个或多个包装载体以及包装细胞,模拟病毒的侵染和转移行为,实现将外源目的基因导入宿主细胞的基因转移技术。目前,已建立的比较成熟的病毒基因转移系统包括逆转录病毒、腺病毒、杆状病毒、腺相关病毒和慢病毒系统。这些病毒基因转移系统已在哺乳动物、鸟类和昆虫细胞上得到广泛应用,前三种病毒基因转移系统在海洋脊椎动物鱼类中也已得到很好的应用,而在海洋无脊椎动物中,仅能见到逆转录病毒和杆状病毒基因转移系统的应用报道。本文综述了逆转录病毒和杆状病毒介导的基因转移技术在海洋无脊椎动物中的研究进展,并对其应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 海洋无脊椎动物 病毒介导的基因转移技术 逆转录病毒载体 杆状病毒载体
下载PDF
脂质体法介导山羊精子转染外源DNA最适条件的研究 被引量:5
7
作者 孙新明 魏泓 +1 位作者 赵永聚 王爱平 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期77-82,共6页
研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后... 研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后阳性率分别为25.2%,22.6%,27.5%,差异不显著(p>0.05).③脂质体介导转染的精子消化前后阳性率在充分洗涤组为41.3%和25.5%,极显著高于原精液直接加入1∶10∶1转染液不洗涤处理组的25.6%和11.4%及原精液加入不含缓冲液的转染液处理组的17.2%和7.8%(p<0.01).④离心洗涤后精液分别与在转染缓冲液中加入0、0.1%、0.3%、0.6%BSA(质量/体积)的转染液共同孵育后的消化前后阳性率分别为41.3%和25.5%、35%和21.4%、27.5%和15.3%及11.2%和8.2%;⑤用不同缓冲液配制的转染液进行脂质体介导山羊精子转染外源DNA的效率有差异,其中以mDM液转染精子的消化前、后阳性率最高(为41.3%和25.5%).研究表明:脂质体介导转染外源DNA的独特机制使供精个体间精子转染效率趋于一致;精子与脂质体-DNA复合物混合前将精子充分离心洗涤可显著提高脂质体介导精子转染外源DNA的效率;血清白蛋白能降低脂质体对精子介导的转染效率;脂质体法介导山羊转染外源DNA的最适转染条件为用mDM液充分洗涤精子后再与脂质体-DNA复合物混合转染. 展开更多
关键词 精子介导基因转移 脂质体 山羊
下载PDF
精子介导GFP基因在小鼠早期胚胎中的表达 被引量:3
8
作者 董焕声 房勇卫 +5 位作者 李兰 李晓林 孙理兰 翟向玮 潘庆杰 沈伟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期535-539,共5页
利用DIG末端标记技术和免疫组化技术分析了小鼠精子体外结合内化外源DNA的效率。试验结果表明,不同小鼠个体的精子结合外源DNA的阳性率有明显差异(P<0.01),平均为13%。利用考马斯亮蓝染色评价了小鼠精子顶体反应发生的情况,筛选出TY... 利用DIG末端标记技术和免疫组化技术分析了小鼠精子体外结合内化外源DNA的效率。试验结果表明,不同小鼠个体的精子结合外源DNA的阳性率有明显差异(P<0.01),平均为13%。利用考马斯亮蓝染色评价了小鼠精子顶体反应发生的情况,筛选出TYH培养液为较合适的体外受精液。利用小鼠体外受精技术,将体外转染GFP基因并获能的小鼠精子与成熟卵母细胞进行体外受精,受精卵进行体外培养,表达GFP胚胎的阳性率为4.7%。验证了精子介导制备转基因小鼠胚胎的可行性,并建立了利用精子载体法制备转基因小鼠胚胎的平台。 展开更多
关键词 转基因动物 精子介导基因转移 体外受精
下载PDF
脂质体介导FecB基因转染太行山羊精子的研究
9
作者 崔凯 刘月琴 +2 位作者 张英杰 孙军龙 王鹏 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期97-100,110,共5页
以太行山羊为研究对象,探索精子作为外源基因载体建立转FecB目的基因山羊的可行性,以及脂质体对转染效率的影响。采用共培养与阳离子脂质体介导2种方法转染精子,用原位杂交等技术检测FecB目的基因片段在精子中的存在及存在部位,并对2种... 以太行山羊为研究对象,探索精子作为外源基因载体建立转FecB目的基因山羊的可行性,以及脂质体对转染效率的影响。采用共培养与阳离子脂质体介导2种方法转染精子,用原位杂交等技术检测FecB目的基因片段在精子中的存在及存在部位,并对2种方法进行分析。结果表明:太行山羊的精子具有主动捕获外源基因的能力,共培养法精子阳性率为18.3%,脂质体介导精子阳性率为38.7%,脂质体的存在显著提高了精子的转染效率。太行山羊的精子能够被脂质体包被的FecB目的基因片段转染,为精子载体法制备FecB转基因太行山羊提供依据。 展开更多
关键词 FECB基因 脂质体 精子介导基因转移 太行山羊
下载PDF
精子介导法生产转基因牦牛杂种胚胎的研究
10
作者 字向东 梁冠男 陈绍威 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期168-173,共6页
研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响。用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GF... 研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响。用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GFP表达情况。结果显示,用环形质粒、线性质粒pAcGFP1-hLF转染的精子及未转染精子IVF后的卵裂率分别为56.4%、54.8%和61.0%,线性转染的囊胚率显著低于环形转染(17.7%与35.7%)。环形质粒转染的精子用DNaseⅠ消化、不消化及未转染的精子IVF后卵裂率分别为44.8%、55.2%和56.3%,囊胚率分别为33.3%、33.3%和30.2%。未经DNaseⅠ消化洗涤的环形质粒组GFP胚胎阳性率显著高于线性质粒组(99.3%与76.6%);DNaseⅠ消化组GFP胚胎阳性率极显著低于不消化组(25.4%与99.3%)。结果表明,用环形质粒DNA转染牦牛精子不会影响其受精及早期胚胎发育能力,但DNaseⅠ消化洗涤显著降低GFP胚胎阳性率。 展开更多
关键词 牦牛 精子介导基因转移 胚胎体外生产 绿色荧光蛋白
下载PDF
磁小体介导制备转基因猪模型
11
作者 陈克研 陈振文 +1 位作者 董婉维 郑志红 《实验动物与比较医学》 CAS 2015年第4期288-293,共6页
目的以磁小体(BMP)和聚乙烯亚胺(PEI)为载体,通过睾丸注射精子介导法建立转基因猪模型。方法将实验室保存的脂蛋白磷脂酶A2(Lp.PLA2)绿色荧光蛋白(GFP)质粒与BMP和PEI混匀,制备BMP—PEI-PLA2-GFP混合物,采用睾丸多点注射法... 目的以磁小体(BMP)和聚乙烯亚胺(PEI)为载体,通过睾丸注射精子介导法建立转基因猪模型。方法将实验室保存的脂蛋白磷脂酶A2(Lp.PLA2)绿色荧光蛋白(GFP)质粒与BMP和PEI混匀,制备BMP—PEI-PLA2-GFP混合物,采用睾丸多点注射法接种巴马小型猪,于接种后第2周、4周、6周至第20周采集精液,分别用RT—PCR和免疫荧光鉴定外源基因的表达情况;取阳性精液,对母猪实施人工授精;PCR及RT—PCR对所产仔猪进行鉴定。结果精液中GFP基因于接种后第4周首现并持续至第16周;荧光显微镜检查可观察到GFP蛋白主要表达于精子项体后区及精子尾颈部;经人工授精所产21头仔猪中,9头猪用PCR可检测GFP片段,用RT—PCR检测PLA2表达,该9头猪的表达量明显高于其它猪,总阳性率达42.86%。结论BMP和PEI结合可作为良好的携带外源基因的非病毒性载体,用该载体通过精子介导法可以达到迅速制备转基因猪的目的,其成本低、方法简单、便捷。 展开更多
关键词 转基因 磁小体(BMP) 聚乙烯亚胺(PEI) 精子介导的基因转移
下载PDF
Tunneling Electrons Triggered Energy Transfer between Coherently Coupled Donor-Acceptor Molecules
12
作者 Huifang Wang 《Chinese Journal of Chemical Physics》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第4期497-504,I0093,I0094,共10页
Energy transfer is ubiquitous in natural and artificial lightharvesting systems,and coherent energy transfer,a highly efficient energy transfer process,has been accepted to play a vital role in such systems.However,th... Energy transfer is ubiquitous in natural and artificial lightharvesting systems,and coherent energy transfer,a highly efficient energy transfer process,has been accepted to play a vital role in such systems.However,the energy oscillation of coherent energy transfer is exceedingly difficult to capture because of its evanescence due to the interaction with a thermal environment.Here a microscopic quantum model is used to study the time evolution of electrons triggered energy transfer between coherently coupled donoracceptor molecules in scanning tunneling microscope(STM).A series of topics in the plasmonic nanocavity(PNC)coupled donor-acceptor molecules system are discussed,including resonant and nonresonant coherent energy transfer,dephasing assisted energy transfer,PNC coupling strength dependent energy transfer,Fano resonance of coherently coupled donor-acceptor molecules,and polariton-mediated energy transfer. 展开更多
关键词 Energy transfer Coherent energy transfer Scanning tunneling microcopy induced luminescence Plasmonic nanocavity Quantum master equation DEPHASING Fano resonance Polariton-mediated energy transfer
下载PDF
精子介导法建立sFat-1转基因小鼠模型
13
作者 李小平 曾博 +2 位作者 邹方东 岳碧松 尹海林 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第6期1003-1006,共4页
利用精子介导的基因转移(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)方法,将sFat-1 DNA片段直接和小鼠精子孵育,再通过体外受精、胚胎移植等技术建立sFat-1转基因小鼠模型。经PCR检测,16只后代中发现2只阳性个体,Southern blot进一步鉴定的结... 利用精子介导的基因转移(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)方法,将sFat-1 DNA片段直接和小鼠精子孵育,再通过体外受精、胚胎移植等技术建立sFat-1转基因小鼠模型。经PCR检测,16只后代中发现2只阳性个体,Southern blot进一步鉴定的结果显示有2只后代整合了sFat-1基因,成功建立sFat-1转基因小鼠模型,转基因率为12.5%。本研究运用精子介导的转基因方法将sFat-1基因整合到小鼠基因组中,为进一步研究sFat-1的生物学功能提供了实验动物模型。 展开更多
关键词 sFat-1基因 精子介导的基因转移 多不饱和脂肪酸
下载PDF
外源基因对精子的影响及其在山羊早期胚胎中的表达 被引量:4
14
作者 叶华虎 董罡 +7 位作者 袁菊芳 隋丽华 胡娟峰 李瑞生 刘彦 马啸 陈振文 曾林 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1421-1426,共6页
在前期实验中发现,山羊精子可自发结合外源DNA,但结合能力在不同动物个体之间差异显著。挑选结合能力明显不同的3只公羊,进一步探讨了外源DNA对精子的影响及其在早期胚胎中的表达,结果发现:外源基因与精子共同孵育后,精子的活率、顶体... 在前期实验中发现,山羊精子可自发结合外源DNA,但结合能力在不同动物个体之间差异显著。挑选结合能力明显不同的3只公羊,进一步探讨了外源DNA对精子的影响及其在早期胚胎中的表达,结果发现:外源基因与精子共同孵育后,精子的活率、顶体反应发生率和受精能力均呈下降态势,其降幅与精子的结合能力密切相关。利用与DNA共育后的精子进行体外受精,外源基因可被导入卵母细胞并在早期胚胎中获得表达,但胚胎阳性率因精子供体不同而差异显著(P<0.05);其中来源于高、中结合能力供体生产的胚胎,分别有16.2%(25/154)和5.3%(4/76)可检测到外源基因存在,但表达仅见于高结合能力供体生产的早期胚胎,表达率为6.5%(10/154);低结合能力供体生产的胚胎无外源基因。研究表明,在以精子载体方法生产转基因动物的实验过程中,筛选对DNA结合能力较强的精子供体是提高转基因效率的前提,但需要考虑外源DNA对精子受精能力的影响。 展开更多
关键词 精子介导基因转移 精子 胚胎 山羊
下载PDF
生长激素释放因子肝脏定向表达复合物在家兔体内的表达 被引量:4
15
作者 张永亮 田宝磊 +1 位作者 段洪涛 白忠彬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期358-360,共3页
外源基因在体内的转染及表达存在转染效率低、表达时间短等缺点 ,利用受体介导基因转移技术 ,可以将基因定向转入到特定组织 ,并且能提高转染效率和表达时间。在本试验中 ,利用肝脏去唾液酸糖蛋白受体 (ASGR)将生长激素释放因子 (GRF)... 外源基因在体内的转染及表达存在转染效率低、表达时间短等缺点 ,利用受体介导基因转移技术 ,可以将基因定向转入到特定组织 ,并且能提高转染效率和表达时间。在本试验中 ,利用肝脏去唾液酸糖蛋白受体 (ASGR)将生长激素释放因子 (GRF)基因定向转入到家兔肝脏组织并得到了表达。首先通过 DNA阻滞试验确定质粒 DNA与多聚赖氨酸 (poly- L- lysine,PL L)的结合比例及反应液的最佳 Na Cl浓度 ,然后将 PL L 与 α- D-吡喃半乳糖苯基异硫氰酸盐 (α-D- galactopyranosylphenyl isothiocyanate) (物质的量之比为 8∶ 1)在 p H9.0的 Na2 CO3溶液中进行糖基化反应 ,得到糖基化的 PL L(gal PL L)后透析除去未反应的糖并测定反应物糖含量。将糖基化的 PL L 与克隆有 GRF基因的 pc D-NA3- GRF质粒 (质量比为 3.16∶ 1)在 1.0 31m ol/ L的 Na Cl溶液中进行连接 ,最终得到 DNA- gal PL L复合物 ,电镜观察其结构。耳缘静脉注射质粒复合物到家兔体内 (1.5 mg/只 ) ,用 RT- PCR和 EL ISA检测不同组织的表达情况。结果注射后 7d家兔的肝脏 RT- PCR结果呈阳性 ,2 7d仍能检测到 GRF蛋白 ,但同时在其他的组织也检测到表达。并且进行了增重试验 ,发现定向转移 展开更多
关键词 生长激素释放因子 基因表达 定向表达 肝脏 家兔 去唾液酸糖蛋白受体 受体介导基因转移技术 增重试验
下载PDF
TNF-α基因转染增强树突细胞迁移及CCR7受体表达 被引量:2
16
作者 张卫东 杨泓 王泽华 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期133-135,共3页
为探讨腺病毒介导肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)基因转染诱导树突细胞 (DCs)趋化因子受体差异性表达 ,分别用 10 0 MOI的 Ad V- TNF- α和 Ad V- p L p A (无外源基因插入 )感染小鼠树突细胞 (m DCs) ,经流式细胞仪检测细胞表型变化 ,RNA... 为探讨腺病毒介导肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)基因转染诱导树突细胞 (DCs)趋化因子受体差异性表达 ,分别用 10 0 MOI的 Ad V- TNF- α和 Ad V- p L p A (无外源基因插入 )感染小鼠树突细胞 (m DCs) ,经流式细胞仪检测细胞表型变化 ,RNA酶保护实验检测其趋化因子受体表达 ,体内、体外细胞趋化试验分析比较其迁移差异。发现 Ad V- TNF-α感染 m DCs后 CD11b、CD40、CD86 ,ICAM- 1以及 CCR7受体表达较对照组明显增高 ,CCR2受体表达量却下调 ;体外细胞趋化试验表明 DCTNF -α对 MIP- 3β(CCR7配体 )迁移应答增强 ,体内细胞趋化试验显示 DCTNF-α淋巴结趋化迁移效率较空白对照组和 Ad V- p L p A感染组分别增高 7倍和 3倍。提示 :Ad V- TNF- α感染促使 m DCs成熟 。 展开更多
关键词 树突细胞 趋化迁移 趋化因子受体 腺病毒介导基因转移 肿瘤坏死因子-α 细胞迁移
下载PDF
肝癌细胞微细胞介导染色体转移方法学的建立与探讨 被引量:5
17
作者 刘虎 叶胜龙 +5 位作者 杨炯 汤钊猷 刘银坤 钦伦秀 邱双健 孙瑞霞 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期540-543,共4页
目的建立肝癌细胞微细胞介导染色体转移方法,为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位建立技术平台。方法人单染色体供体细胞通过微核化、出核、融合步骤将随机标记有耐药neo基因的正常人8号染色体导入到大鼠肝癌高转移细胞系C5F中,对微细... 目的建立肝癌细胞微细胞介导染色体转移方法,为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位建立技术平台。方法人单染色体供体细胞通过微核化、出核、融合步骤将随机标记有耐药neo基因的正常人8号染色体导入到大鼠肝癌高转移细胞系C5F中,对微细胞杂交克隆进行药物筛选和单细胞克隆,并用序列标签位点-PCR和全染色体涂染荧光原位杂交方法验证人染色体转移的结果。结果获得具有G418和HAT双重抗性的微细胞杂交细胞,通过单细胞分离克隆方法获得15个具有双重抗性的微细胞杂交克隆,序列标签位点-PCR结果发现导入染色体的随机片段丢失,全染色体涂染荧光原位杂交结果发现导入的人8号染色体与大鼠染色体发生了稳定的重组。结论成功建立微细胞介导的染色体转移技术,为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位奠定了技术基础。 展开更多
关键词 微细胞介导的染色体转移 序列标签位点 荧光原位杂交 原发性肝癌
原文传递
激光辅助制动对精子核DNA的影响 被引量:5
18
作者 徐志鹏 孙海翔 +2 位作者 胡娅莉 张宁媛 招霞 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期216-218,共3页
目的:研究激光辅助制动精子是否引起精子核DNA损伤。方法:23例行体外受精(IVF)的男性精液标本,上游法处理后用0.45ms脉冲激光照射精子尾部制动精子。采用末端转移酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL)和单细胞凝胶电泳法(SCGE)两种方法分别检... 目的:研究激光辅助制动精子是否引起精子核DNA损伤。方法:23例行体外受精(IVF)的男性精液标本,上游法处理后用0.45ms脉冲激光照射精子尾部制动精子。采用末端转移酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL)和单细胞凝胶电泳法(SCGE)两种方法分别检测激光辅助制动处理前后阳性精子百分率。结果:TUNEL法检测激光辅助制动处理前后阳性精子的百分率分别为(1.32±0.61)%、(1.41±0.51)%,差异无显著性(P>0.05);SCGE法检测处理前后阳性精子百分率分别为(1.59±0.70)%、(1.83±0.68)%,差异亦无显著性(P>0.05)。结论:激光照射精子尾部辅助制动精子对精子核DNA无明显损伤。 展开更多
关键词 精子制动 激光 DNA损伤 末端转移介导的dUTP末端标记法 单细胞凝胶电泳
下载PDF
TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进 被引量:18
19
作者 董小莉 谭宁 +2 位作者 符永恒 邓宇珺 孙凯亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1038-1040,共3页
目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm... 目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm)和冰冻切片(3μm)进行TUNEL染色。分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组。石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DA-PI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察。结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01)。结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法。 展开更多
关键词 心肌细胞凋亡 冰冻切片 脱氧核糖核苷酸末端转移介导的缺口末端标记法
下载PDF
转基因动物技术研究进展 被引量:2
20
作者 谷瑞环 陈学进 郭毅 《实验动物与比较医学》 CAS 2009年第5期347-351,共5页
转基因动物技术起始于上个世纪七十年代末,随着生物科学的飞速发展,此技术也得到很大的进步。转基因动物技术在生物医药、农业等领域具有重要的作用。本文就转基因动物技术的发展、方法、应用及面临的问题做一综述。
关键词 转基因动物 显微注射 精子介导基因转移 核移植
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部