仓鼠糜酶2抑制剂高通量筛选模型的建立及其应用

本研究拟建立重组仓鼠糜酶2(chymase 2)抑制剂的体外高通量筛选模型,寻找新型的糜酶2抑制剂。首先,利用大肠杆菌表达、制备成熟的重组仓鼠糜酶2蛋白,以384孔微板为媒介,建立基于荧光方法测定酶活性的抑制剂筛选模型,结果表明所建立的糜酶2抑制剂高通量筛选模型具有灵敏、稳定、重复性好的特点(Z'=0.84)。利用建立的模型对40 080种样品(包括28 060种化合物和12 020种天然产物提取物)进行抑制活性筛选,取抑制率大于90%的613种样品进行复筛。最终确定化合物J16647和J16648具有较强的抑制活性,其IC50值分别为0.823和0.690μmol.L?1。