猪繁殖与呼吸综合征病毒接触感染仔猪模型的建立

为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫杀猪进行剖检和肺脏组织病理学检查,并检测各器官病毒载量和组织分布。结果显示:接触感染仔猪出现高热和PRRS症状时间分别较人工接种猪推迟2~3d;第3天起血清检测PRRSV阳性,第10天病毒血症上升至较高水平(108.6拷贝/mL);第5天起粪便检测PRRSV阳性,第7天粪便排毒量上升至较高水平(103.9拷贝/0.1g);3头接触感染仔猪分别于同居后第12天和第13天死亡,较人工接种猪推迟1~2d,病死猪的主要器官病毒载量以及剖检和肺脏显微病理变化与人工接种病死猪相似。这些结果表明,本研究建立的接触感染仔猪模型可用于PRRS疫苗免疫效果评价。

猪葡萄球菌临床分离株感染仔猪渗出性皮炎模型的建立

为建立研究仔猪渗出性皮炎发病机制及治疗制剂的动物模型,本研究采用PCR及BLAST序列比对方法对猪葡萄球菌437-2株毒素基因型进行鉴定,采用纸片扩散法检测其耐药性,通过不同浓度菌液人工感染仔猪试验分析该菌株的临床致病力、最小致病浓度、发病周期及组织病理学变化。结果显示,该分离菌株为ExhD毒素基因型,其毒素基因与德国分离株(GenBank登录号:AM94662.1)和俄罗斯分离株(GenBank登录号:AM950188.1)的ExhD基因同源性达99%;药敏试验结果显示,该菌株为多重耐药菌株,对青霉素、磺胺异噁唑、链霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素、杆菌肽及诺氟沙星耐药;仔猪致病性试验结果显示,低剂量组在整个试验周期内仅注射部位表现出皮炎症状,而中、高剂量组在耳后皮下注射2d后均出现显著的渗出性皮炎症状,病猪表现为耳后出现油皮,全身被毛粗糙,皮肤呈深褐色厚皮痂,有大片蜕皮和黄色液体渗出;感染仔猪的脏器和皮肤病理切片结果显示,低剂量组仔猪脏器无异常,耳部皮肤角质层角化过度,炎性细胞浸润,无棘皮层细胞分离,而中、高剂量组感染仔猪脏器具有一定程度的损伤,皮肤表皮棘细胞层出现明显的细胞分离。上述试验结果说明,利用猪葡萄球菌437-2株可成功建立仔猪渗出性皮炎模型,所需的最小攻菌浓度为1×10^9 CFU/mL。

大肠杆菌热敏肠毒素对仔猪病理及生理学指标的影响

本试验旨在构建仔猪产热敏肠毒素大肠杆菌模型和热敏肠毒素模型,观察各组的病变情况,并检测相关生理生化指标和病理指标来进行对比分析。通过产热敏肠毒素大肠杆菌灌胃以及热敏肠毒素腹腔注射的方法建立2种仔猪腹泻模型;观察各组的病变情况,检测仔猪模型生理生化、病理指标。结果显示:2个试验组在试验期间与空白组相比较平均日增重均呈现负增长,白细胞和中性粒细胞数显著升高(P<0.05),淋巴细胞数显著降低(P<0.05);剖检可见肺实变严重,肠系膜淋巴结肿胀,肠腔积液;病理组织学检查发现,各试验组小肠肠壁变薄,肠绒毛脱落变短,杯状细胞增多;免疫组化结果显示,空肠组织中有热敏肠毒素存在。试验结果对比分析表明,毒素组与细菌组具有相似的症状表现与指标类型;热敏肠毒素可能为产热敏肠毒素大肠杆菌病的直接致病因子。

猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型的建立

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)是危害养猪业重要的病原,给我国养猪业造成了重大的损失,迄今为止仍缺乏猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型,建立合适的模型用于临床药物研发及机制研究为防控该病奠定基础。【目的】构建猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型,通过观察感染仔猪的临床变化、病理学变化、病原分离及PCR鉴定证实模型构建成功。【方法】选取6头健康的三元杂交猪仔猪,随机均分为A、B两组。A组仔猪接种猪链球菌,B组接种生理盐水作为空白对照,观察A组仔猪的临床症状、剖检变化、病理组织学变化。【结果】A组仔猪出现体温升高、精神沉郁、嗜睡以及严重的神经症状,甚至死亡;器官出现严重病变,如脊髓和大脑的神经元细胞的肿胀、坏死、溶解,小脑灰质区浦肯野细胞层和颗粒层见细胞灶状坏死并形成坏死后空腔。【结论】成功构建出猪链球菌2型感染仔猪的脑炎模型。

大肠杆菌107/86菌株人工感染小鼠的病理学观察

20只清洁级昆明系小鼠随机分为对照组与试验组(n=10),试验组经腹腔注射大肠杆菌107/86悬液,对照组注射等量灭菌生理盐水,注菌5 d后处死全部小鼠。小鼠攻菌后6h开始出现临床症状,24h试验组小鼠表现为后肢麻痹、偏瘫,眼睑、前额等部位水肿。对试验组小鼠进行剖检发现胃壁、肠系膜等多处水肿。试验结果表明,小鼠腹腔注射大肠杆菌107/86成功复制仔猪水肿病模型。