热应激对体外仔猪肝细胞AMPK活性及脂质代谢产物的影响

目的:研究提高细胞培养温度对仔猪肝细胞一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)活性及脂质代谢产物的影响。方法:采用单因子试验设计,以37℃细胞培养温度为对照组,42℃的细胞培养温度为热应激组,每个组均设60、120、180 min三个培养时间点,每个时间点9个重复。以原代分离的55d左右的仔猪肝细胞为材料,以油酸为脂质的研究对象,油酸的代谢方向通过检测示踪物[14C]-油酸的代谢产物进行标识。结果:热应激处理不影响谷丙转氨酸(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)及尿素氮(UN)含量的变化并可激活仔猪肝细胞AMPK活性;同时促进脂质分解代谢。热应激组的[14C]-二氧化碳及[14C]-酸溶性代谢产物的生成量均高于对照组。热应激处理抑制脂质合成代谢,降低肝细胞磷脂、甘油单酯、甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯的合成量。结论:热应激能体外激活仔猪肝细胞AMPK,促进脂质分解代谢产物,抑制脂质合成代谢产物的生成。

亮氨酸对早期断奶仔猪肝中内质网应激的影响

为探究日粮中亮氨酸水平对早期断奶仔猪(长×大)肝内质网应激的影响,利用透射电镜、细胞核质分离和蛋白质免疫印迹等技术,研究了在亮氨酸处理下肝细胞形态和内质网应激特征蛋白质的表达规律及对早期断奶诱导的肝内质网应激的影响。结果显示:在早期断奶诱导内质网应激模型中,与正常不断奶组相比,14日龄早期断奶组仔猪肝细胞中内质网口径增大,结构紊乱,同时细胞核内内质网应激相关蛋白XBP1的表达水平显著上调(P<0.05);在体外Hep G2细胞培养模拟试验中,培养基中葡萄糖和亮氨酸的缺失都能显著上调细胞核内内质网应激相关蛋白ATF4和ATF6α剪切体蛋白的表达(P<0.05),而在培养基中重补亮氨酸后,核内定位的ATF4蛋白出现了进一步的上调(P<0.05)。不同亮氨酸水平日粮的饲喂试验结果显示,在21日龄未断奶条件下,日粮亮氨酸水平对ATF4和ATF6α剪切体在细胞核内的表达无显著影响(P>0.05),而断奶24 h后,2.10%亮氨酸组仔猪肝细胞核内的ATF4蛋白表达水平显著高于1.66%亮氨酸组(P<0.05)。上述结果表明,早期断奶能够诱导仔猪肝内质网应激的发生,而亮氨酸对早期断奶引发的肝内质网应激具有重要的调节功能。

仔猪肝营养不良和桑葚心的区别与防治措施

肝营养不良和桑葚心是猪的硒和VE缺乏症最为常见的病型之一。由于VE和硒含量皆低下,致使生长迅速,发育良好的肥育猪最易发生本病,且多与肌营养不良症(白肌病)相伴发。