仙客来枯萎病病原鉴定及其生物学特征研究

[目的]本文旨在明确仙客来枯萎病病原、病原菌的生长特性及病害的发生规律。[方法]采用组织分离法从叶柄部获得病原菌,并对其从形态学、分子生物学进行鉴定,通过设定不同的温度梯度研究病原菌的生长特性,结合生产实际设置T1(昼温控制在20~25℃)、T2(昼温控制在25~30℃)、T3(昼温控制在30~35℃)3个处理进行盆栽试验,研究温室中仙客来枯萎病发生规律。[结果]仙客来发病初期呈萎蔫状,逐渐叶片黄化变褐,叶柄前期水渍状软化、逐渐出现缢缩、变褐,球茎腐烂变软,整个植株的维管束受损,颜色发暗,直至坏死;分离纯化病原菌,由病原菌分生孢子的形态特征、rDNA-ITS和TEF1-α基因序列分析,鉴定仙客来枯萎病病原菌为尖孢镰孢仙客来专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cyclaminis);由生物学特征显示病原菌菌丝生长、分生孢子萌发的最适温度为25~30℃,菌丝的平均生长速率为7.46 mm·d^(-1),分生孢子的平均萌发率可达到90.22%;盆栽试验,仙客来从开始发病到整株死亡一般是5~8 d,病情发展迅速,昼温控制在25~30℃,发病最快,接种病原菌后9 d开始发病,第18 d全部发病;其次为T3处理,T1处理发病最慢。[结论]仙客来枯萎病发病早期呈萎蔫状,其发生与温度密切相关,将温度控制至低于25℃可有效降低仙客来枯萎病的发生率。

仙客来枯萎病病原菌产孢培养基筛选及培养条件优化

为了获得高浓度的仙客来枯萎病病原菌的孢子悬液,通过对不同营养培养基进行初筛,再以初筛营养成分进行正交试验,得到最佳营养配比,进一步通过单因素试验对培养基的pH和培养温度进行筛选。结果表明,马铃薯、绿豆、蔗糖为仙客来枯萎病病原菌产孢培养基的最佳营养成分,最佳配比为绿豆5.0%、蔗糖0.5%、马铃薯20%,培养基最佳pH为6,最佳培养温度为30℃。研究结果明确了仙客来枯萎病病原菌的产孢条件,为仙客来枯萎病的感病机理、防治技术及孢子萌发抑制等研究奠定基础,同时对指导实际生产中科学管理、综合防治病害具有重要意义。

我对仙客来养护的体悟和做法

从2012年开始对多肉植物有所了解,并对其养殖产生了浓厚的兴趣,为了养好多肉植物,我查阅了多种有关资料,在论坛和群里跟花友们交流养护的心得体会,从此开启了我的家庭花卉园艺的探索之旅。其间不断地认识一些新的植物,并将其种植在自己的庭院里。就这样,不论是和煦的春天还是凉爽的秋日,院子里的各种花卉紫嫣红,让人赏心悦目,唯独那阴冷的冬日里没有可供观赏的花卉,成了生活中的一件憾事。

仙客来花粉离体萌发主要影响因素研究

为提高仙客来杂交育种效率,明确花粉萌发率的主要影响因素,以当前12个仙客来主栽品种及自交系AH为试验材料,利用培养基法进行了不同品种、植物生长调节剂、糖类、硼酸、pH值的花粉离体萌发试验。结果表明:不同品种间花粉萌发率存在显著差异。不同植物生长调节剂对仙客来花粉萌发的促进作用存在显著差异,芸苔素及赤霉素均可促进仙客来花粉萌发,以芸苔素0.02 mg·L^(-1)效果最好,复硝酚钠对仙客来花粉萌发无影响。蔗糖可显著提高仙客来花粉萌发率,浓度以10%最佳,葡萄糖对仙客来花粉萌发无促进作用,10%蔗糖+0.02 mg·L^(-1)芸苔素可显著提高花粉萌发率。硼酸单独作用对仙客来花粉萌发的促进作用不大,与10%蔗糖联合作用则显著提高仙客来花粉萌发率。不同pH值显著影响仙客来花粉萌发率,pH值为6.0时萌发率最高,pH值为7.0时次之。根据正交试验结果,促进仙客来花粉萌发的最佳配方为10%蔗糖+0.2%硼酸+0.02 mg·L^(-1)芸苔素。品种、植物生长调节剂、糖类、pH值等因素均会对仙客来花粉萌发产生重要影响。

仙客来(Cyclamen persicum Mill.)的种质资源RAPD分析

利用RAPD技术对 2 0个现今栽培的名优仙客来品种的分类和亲缘关系进行研究 ,从 1 0 0个随机引物中筛选出 1 8个用于PCR反应 ,共在 1 5 3个位点上扩增出条带 ,平均每个引物扩增位点8.5个 ,多态性位点 1 44个 ,占总带数的 94.1 %。这种多肽性可以进行品种的鉴定 ,聚类分析将各品种材料分为 4个类群。提出仙客来除目前的观赏性状分类以外 ,还应具有更科学的以遗传基础为基准的分类方法。也从分子水平揭示了目前栽培的仙客来品种的遗传基础的狭窄性。

仙客来(Cyclamen Persicum Mill)胚性愈伤形态和组织结构的动态观察

用仙客来 (Cyclamenpersicum Mill)成苗叶柄作为外植体 ,培养在附加 2 ,4 D和KT的 1/2MS培养基上诱导体细胞胚性愈伤组织的发生 ,对体细胞胚性愈伤组织发生过程中外部形态和组织细胞学结构进行了动态观察 .结果表明 ,叶柄组织脱分化的起始部位在维管束的维管束鞘细胞 ,启动时间是培养后 2d ;叶柄外植体培养至 2 0d左右 ,愈伤组织呈松散透明状态 ,胚性细胞出现 ,标志着进入胚性愈伤组织阶段 ,胚性细胞多发生在所形成的愈伤组织的表层或近表层细胞 ,细胞大而壁薄 ,与非胚性细胞联系疏松 ,细胞核大 ,并位于细胞中央 ,细胞质浓厚 ,分别观察有单细胞。

仙客来(Cyclamen persicum Mill)液体培养提取物的抑菌活性

对仙客来愈伤组织进行液体培养,分别得到培养液(胞外产物)和愈伤组织(胞内产物).用石油醚、氯仿、无水乙醇对其提取,用硅胶柱层析对提取液进一步分离,利用滤纸片法对分离得到的组分进行抑菌活性研究.结果表明,从愈伤组织(胞内产物)的石油醚提取物中得到的多个组分对供试菌株有较强的抑菌活性,其中有3个组分对5种供试菌株均有较好的抑菌作用;从氯仿提取物中分离得到的组分只对革兰氏阳性菌有抑制作用;从无水乙醇提取物中分离得到的各组分均无抑菌活性.从培养液(胞外产物)的氯仿提取物中分离得到的3个组分对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌有明显抑制效应,从无水乙醇提取物中分离得到的4个组分对供试菌株有抑菌活性,其中各组分对啤酒酵母表现出相对较弱的抑制作用.通过对比实验发现,仙客来愈伤组织经液体培养后所含活性组分要明显高于栽培植株.

不同品系仙客来生物学性状与光合特性的关系

以4个不同品系仙客来为试材,采用细胞生物学与光合生理参数结合的方法,研究了不同品系仙客来的光合参数与各品系生物学性状、气孔特性和叶片解剖结构的影响,并对叶片显微结构、生物学性状与光合参数进行了相关性分析,以期探讨不同品系仙客来生物学性状与光合特性的关系。结果表明:‘XW-21’光合饱和点高于其它3个品系,在相同叶面积下气孔密度及气孔宽度也存在差异,‘FS-35’密度最大,为38个·cm^(-2);‘XW-21’气孔宽度最大为9.4μm,叶片显微结构中‘XW-21’栅栏组织厚度显著(P<0.05)高于‘FS-25’,高出4.23%,而海绵组织厚度较后者仅高出1.7%;叶片显微结构与光合作用的相关性分析表明Pn与上表皮厚度、叶厚、栅栏组织、海绵组织均呈显著正相关作用。

每年买一盆仙客来

最近几年每年买一盆仙客来,特爱它们喜庆的花形和颜色,一副昂扬向上的生长势头,给人精神和力量。即使干得瘫倒在盆内,让人误以为再也活不过来了,浇上两次水它们又能“起死回生”了,让你感觉这花太好养了。其实不然,我已连续5年都买一盆仙客来,就是养植技术没到位,每次到了炎热的夏天它们开始休眠,就因为我没把握好浇水的方法,导致它们烂根,至今我还没养活过一盆仙客来。最近我又买了一盆仙客来,想好好琢磨它们一下,看能否成功培植一株。花友告诉我浇水要从边缘浇或浸泡根部。想想是以前养的植物太多没有细心照料它们,觉得反正不贵,“挂”了也无妨。

高温胁迫对仙客来根系活力和叶片生化指标的影响

仙客来的两个品种在 35℃高温胁迫下 6 0h后根系活力急剧下降 ,同时叶片细胞膜脂过氧化产物丙二醛开始升高。伴随着根吸收能力下降 ,叶片含水量的降低 ,游离脯氨酸积累急剧上升。超氧物歧化酶 (SOD)活性表现出先升高 ,后迅速下降的趋势。这些变化同仙客来遇高温后停止生长。

仙客来离体叶培养与植株再生

以仙客来叶片、叶柄及其不同部位为外植体进行诱导,结果幼叶基部(叶子基部与叶柄相连处的断口部分)诱导愈伤组织频率最高,可达100％。愈伤组织在N_6+BA2mg/1+2,4-D0.5mg/1培养基上培养,约40d左右可100％分化出不定芽,其不定芽数量一块愈伤组织最多可分化出30个以上。将幼苗移入1/2MS+NAA 0.5mg/1培养基中生根最好。

TDZ对仙客来不同外植体再生的影响

在无菌条件下培养仙客来种子,并以无菌萌发植株的子叶节、子叶、叶片及叶柄为外植体进行芽分化诱导。试验结果表明,不同浓度TDZ对各外植体的诱导效果不同,用子叶节、子叶、叶片及叶柄均可诱导出再生芽,但以叶片为材料的诱导效果最佳,其中1.0 m g/L TDZ对叶片再生芽的诱导效果最好,而子叶以0.5 m g/LTDZ、子叶节和叶柄以0.2 m g/L TDZ诱导再生芽的效果较好。

转MnSOD基因仙客来植株的获得及其对高温胁迫的抗性

【目的】制备转MnSOD基因仙客来植株,检测其对高温胁迫的抗性。【方法】以仙客来组培苗的叶片为受体材料,采用根癌农杆菌介导法将MnSOD基因导入仙客来,对获得的抗性株系进行分子生物学检测,并测定转MnSOD基因仙客来组培苗在36℃高温胁迫下的SOD活性、MDA含量、细胞膜相对透性和可溶性蛋白含量。【结果】获得35个仙客来抗性株系,其中3个株系经GUS组织化学染色、PCR和Southern印迹检测表现为阳性,表明外源基因整合到仙客来基因组中。转基因仙客来的SOD活性始终高于非转基因植株,细胞膜透性和MDA含量上升的速度低于非转基因植株,可溶性蛋白含量高于非转基因植株。【结论】获得了转MnSOD基因仙客来植株,其对高温胁迫的抗性高于非转基因植株。

仙客来叶片光合特性及其与环境因子的关系

为了探讨仙客来光合特性及环境因子对仙客来光合速率的影响 ,对仙客来叶片光合速率及主要环境因子的周年变化进行了研究。结果表明 :仙客来在晴天光合速率周年的日变化呈双峰曲线。强光、高温和低湿引起仙客来叶片光合“午睡”。中位叶光合速率、光饱和点和光补偿点等较下位叶高 ,具有较高的光合生理特性。同时进行遮荫和喷雾处理可以明显改善植株生长发育的小气候条件 ,降低高温的抑制 ,从而提高光能利用效率 ,降低夏季休眠 ,促进球茎形成 ,有利于翌年春季开花。图 2表 2参 1

激素、光照对仙客来叶片愈伤组织诱导、分化及试管苗生长的影响

激素、光照对仙客来叶片愈伤组织诱导、分化及试管苗生长的影响庞基良，林波，梁海曼（杭州市农业科学研究所，３１０００８）（杭州大学生物系，３１００１２）关键词仙客来；叶片；植物激素；光照ＥｆｆｅｃｔｏｆＰｈｙｔｏｈｏｒｍｏｎｅａｎｄＬｉｇｈｔｏｎＣａｌｌ...

利用仙客来种苗组培快繁建立单株无性系的研究

利用仙客来 (Cyclamen persicum)种苗进行组培快繁建立良种无性系 ,对初培养、继代、生长及生根各时期的适宜配方进行了研究 ,并对继代期间不定芽分化等进行了数量性分析。结果表明 :在初培养时 ,6 - BA和2 ,4 - D的配合对不定芽的分化启动是必须的。在继代过程中 ,激素、不同品种和单株对芽分化能力和苗再生都有显著影响。在组培苗生根过程中品种间的差异极显著。不定芽生根前经一代生长壮苗后其生根状态及生长状态均优于未经生长直接生根的植株。

赤霉素对仙客来生长与开花的影响

研究了不同的赤霉素浓度对仙客来生长与开花的影响。结果表明:20mg/kg赤霉素处理的植株比其它处理区植株开花较早,而且整体观赏效果较为理想。即株高和花茎高度适宜,花数增多,花径增大。此项技术应用在生产上,可解决东北地区当前仙客来栽培中存在的花期延迟的问题。

麝香百合、仙客来、瓜叶菊花芽分化的调控

复合生长调节剂处理对麝香百合等花芽的分化有明显的作用，其中Ａｌ，Ａ2可促进麝香百合花芽的分化，Ａ2效果较Ａ1好，经Ａ，处理后，百合开花率达１００％，同时使植株的开花数增加了 １倍，花径增长 １倍；Ｂ1，B2明显促进仙客来花芽分化，B2效果较 Ｂ1好，经 Ｂ2处理后，处理仙客来较对照植株的花蕾数增加 ４１％；Ｃ1，Ｃ2明显促进瓜叶菊花芽分化，其中 Ｃ1处理的瓜叶菊较对照植株的花蕾数增加５２％。

不同基质配比对仙客来花期生长的影响

研究了不同配比基质对仙客来花期生长的影响,结果表明:以固体基质泥炭、珍珠岩和陶粒按4∶1∶2、2∶1∶2、6∶1∶2配制成的混合基质,可延长仙客来花期,增加花朵数和叶片数,但仙客来的冠幅未受到明显影响。

高温胁迫下甜菜硷和甘露醇对仙客来的保护效应

用仙客来幼苗作试材 ,对高温胁迫前后的根系活力、叶内游离脯氨酸、叶绿素、丙二醛及叶片渗漏液电导率进行测定。结果表明 ,在 35℃高温下 ,仙客来幼苗根系活力下降 ,叶绿素破坏 ,叶内游离脯氨酸、丙二醛及叶片渗漏液电导率上升 ,且随着高温程度加强 ,其伤害程度加重。在 4 5℃高温胁迫前用甜菜硷 (10 0 m g/L )或甘露醇 (5 0 mg/L )处理仙客来叶片 ,可减轻高温对根系活力和叶绿素的影响 ,同时可使高温胁迫下叶片游离脯氨酸、丙二醛及叶片渗漏液电导率上升幅度降低。