代谢性谷氨酸受体亚型5对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓水平炎症反应的影响

目的:探讨鞘内注射mGluR5拮抗剂MTEP对骨癌痛小鼠热痛觉过敏及脊髓水平IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响。方法:C3H/HeNCrlVr雄性小鼠60只,随机分为:①MTEP+Tumor组:癌痛组从第14 d开始鞘内注射MTEP150nmol,qd,共7次;②生理盐水+Tumor组:以等体积的生理盐水代替MTEP;③MTEP+Sham组:用等剂量MTEP给予假手术组;④生理盐水+Sham组:用等体积的生理盐水给予假手术组;⑤正常组:正常饲养21d。应用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期(PWL)。应用Real-time PCR技术检测mRNA表达。结果:各组小鼠术前基础PWL差异无统计学意义(P>0.05)。术后14 d,与正常组相比,骨癌痛组PWL明显降低(P<0.05),假手术组PWL差异无统计学意义(P>0.05)。术后21 d,和正常组相比,MTEP+Sham组、生理盐水+Sham组PWL和脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达差异均无统计学意义(P>0.05);生理盐水+Tumor组PWL(6.18±1.29)s明显低于正常组(15.91±1.65)s(P<0.05),脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达则高于正常组;MTEP+Tumor组(9.39±1.94)s PWL高于生理盐水+Tumor组,脊髓IL-1β、IL-6、TNF-α表达则低于生理盐水+Tumor组(P<0.05)。结论:鞘内注射mGluR5拮抗剂抑制脊髓水平表达释放炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α可能是其抗癌痛作用机制之一。

鞘内注射代谢性谷氨酸受体亚型3激动剂/拮抗剂对小鼠骨癌痛的影响

目的探讨代谢性谷氨酸受体亚型3(mGluR3)对骨癌痛的影响及机制。方法 C3H/HeNCrlVr雄性小鼠84只随机分为:1正常组;2APDC+Tumor组;3DMSO+Tumor组;4APDC+Sham组;5DMSO+Sham组;6LY341495+Tumor组;7LY341495+Sham组。用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期(PWTL)。应用Real-time PCR和Western blotting技术检测mRNA和蛋白的表达。结果术后14 d,与正常组相比,假手术组PWTL差异无统计学意义,而骨癌痛组PWTL明显降低(P<0.05)。术后21 d,和正常组相比,APDC+Sham组、DMSO+Sham组PWTL和脊髓GFAP、IL-1β、IL-6、TNF-α表达差异均无统计学意义;DMSO+Tumor组PWTL(6.18±1.29)s明显低于正常组(15.91±1.65)s,脊髓GFAP、IL-1β、IL-6、TNF-α表达则高于正常组(P<0.05);APDC+Tumor组PWTL(9.39±1.94)s高于DMSO+Tumor组,脊髓GFAP、IL-1β、IL-6、TNF-α表达则低于DMSO+Tumor组(P<0.05);LY341495+Tumor组PWTL(6.09±0.26)s、脊髓GFAP、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平与DMSO+Tumor组差异无统计学意义;LY341495+Sham组PWTL(11.89±2.95)s低于DMSO+Sham组(16.57±1.86)s,脊髓GFAP、IL-1β、IL-6、TNF-α表达则高于DMSO+Sham组(P<0.05);和术后14 d(注药前)相比,APDC+Tumor组PWTL值升高(P<0.05),DMSO+Tumor组、LY341495+Tumor组和LY341495+Sham组PWTL值则降低(P<0.05)。结论鞘内注射mGluR3激动剂APDC具有抗癌痛作用,而鞘内注射mGluR3拮抗剂LY341495促进伤害性感受,调控星形胶质细胞活化,释放炎症因子可能是其机制之一。

大鼠神经系统内谷氨酸受体2/3亚型的定位分布

用特异性抗体的免疫细胞化学染色技术观察谷氨酸受体 2 / 3亚型 (GluR2 / 3)在大鼠神经系统的定位分布。结果显示GluR2 / 3样阳性神经元主要分布于大脑皮质、尾壳核、苍白球、隔核、海马CA1～CA4区、齿状回、乳头体、小脑Purkinje细胞层、动眼神经核、滑车神经核、臂旁核、三叉神经运动核、上橄榄复合体、三叉神经脊束核、面神经核、疑核、迷走神经背运动核、舌下神经核、楔束核、薄束核、延髓和脊髓背角I～Ⅱ层、背根节、三叉神经节等。本研究结果表明GluR2 / 3样阳性结构广泛分布于大鼠神经系统 ,为Glu发挥兴奋效应提供了作用位点。

离子型谷氨酸受体2B亚型在大鼠脊神经结扎后神经痛中作用的初步探讨

目的脊髓创伤后引起的神经痛是困扰患者的重要因素,目前临床上尚无有效的治疗方案。通过大鼠L5脊神经结扎(SNL)法建立后肢神经痛模型,观察不同时间点脊髓背根神经节中离子型谷氨酸受体2B亚型(NR2B)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达变化并探讨可能存在的分子作用机制。方法 36只成年SD雄性大鼠,随机数字表法分成对照组,假手术组和手术组。对照组不做任何处理,手术组建立脊神经结扎模型,假手术组操作同手术组仅不结扎脊神经。通过旷场试验及术侧足跖缩足阈值观察造模前,造模后第5,14天大鼠活动和神经痛情况,免疫蛋白印迹法检测大鼠术侧腰4-6段脊髓背根神经节NR2B及TNF-α和BDNF表达情况。结果造模后5 d,与对照组比较,假手术组大鼠总里程略降低[(18 225.15±371.76)mm vs(14 927.93±560.87)mm,P<0.05],活动时间相比差异无统计学意义(P>0.05);手术组大鼠总路程,活动时间较对照组均显著降低[(18 225.15±371.76)mm vs(3 224.92±89.64)mm,(727.93±16.29)s vs(203.48±19.94)s,P<0.01]。与假手术组比较,手术组大鼠总里程,活动时间显著减少(P<0.01)。造模后14 d,与对照组和假手术组比较,手术组大鼠总路程和活动时间明显减少(P<0.01)。造模前,3组大鼠PWT相比差异无统计学意义(P>0.05)。造模后5 d和14 d,与对照组及假手术组比较,手术组大鼠术侧PWT均显著降低(P<0.01)。假手术组大鼠疼痛阈值未受到明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。造模后5d,假手术组和手术组BDNF、TNF-α和NR2B表达较对照组升高(P<0.05),手术组BDNF、TNF-α和NR2B表达较假手术组升高(P<0.05)。造模后14 d,与对照组和假手术组比较,手术组BDNF、TNF-α和NR2B表达升高(P<0.01)。结论 NR2B和BDNF表达可能在参与调节了神经痛的发生、发展过程。

腺苷A2A受体拮抗剂对左旋多巴诱发异动症大鼠行为、纹状体A2A受体和代谢型谷氨酸受体5亚型蛋白表达的影响

目的 评价腺苷A2A受体拮抗剂（CSC）对左旋多巴（L-DOPA）诱发异动症大鼠行为、纹状体A2A受体和代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5）蛋白表达的影响.方法 6-羟多巴胺（6-OHDA）立体定向损毁大鼠右内侧前脑束,建立单侧损毁帕金森病（PD）大鼠模型.采用随机数字表法将40只成功PD大鼠随机分为4组（每组10只）：生理盐水组;L-DOPA 25 mg/kg＋苄丝肼6.25 mg/kg组;CSC 2.5 mg/kg组;L-DOPA 25 mg/kg＋苄丝肼6.25 mg/kg联合CSC 2.5 mg/kg组.给予大鼠每日2次腹腔注射,持续21 d.在治疗第2、9、11、18、21天观察大鼠行为学变化,Western blot检测纹状体区腺苷A2A受体和mGluR5的蛋白表达水平.结果 L-DOPA联合CSC组PD大鼠损毁对侧前肢跨步数显著增加,与治疗前比较差异有统计学意义,与L-DOPA组相比,前肢功能改善程度不随时间延长而减弱.单独CSC组治疗后对侧前肢跨步数明显增加,与治疗前比较差异有统计学意义,有疗效逐渐增加至稳定趋势.L-DOPA联合CSC组[（11±5）分]部分口颌及肢体异常不自主运动评分较L-DOPA组[（17±4）分]显著减少,差异有统计学意义（t=2.44,P＜0.05）.L-DOPA联合CSC治疗逆转了L-DOPA诱导的对侧旋转反应时间缩短和腺苷A2A受体、mGluR5蛋白表达的上调,差异均有统计学意义.结论 腺苷A2A受体与mGluR5均参与了L-DOPA诱发的异动症的发生发展,A2A受体拮抗剂能够改善PD运动症状,增强L-DOPA的抗PD效应且部分减轻异常不自主运动,对L-DOPA诱发的异动症的治疗有着较好的应用前景.

腺苷A2A受体和代谢型谷氨酸受体5亚型及其拮抗剂在帕金森病治疗中的作用

长期应用左旋多巴制剂（5～10年）会导致约50％的帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）患者出现异动症，称为左旋多巴诱发的异动症（L—DOPAinduceddyskinesia，LID），主要表现为舞蹈症和手足徐动症，严重影响PD患者的日常生活质量。LID的发生与黑质多巴胺能神经元丢失的严重程度、多巴胺波动性刺激引起的直接通路和间接通路的不平衡、突触结构发生可塑性改变以及年龄等密切相关。

代谢性谷氨酸受体第5亚型在正常牙髓中表达及分布研究

目的研究代谢性谷氨酸受体第5亚型(mGluR5)在牙髓各部位中的表达及分布。方法收集2009年7月至2010年1月山东大学口腔医院口腔颌面外科因正畸或其他治疗需要而拔除的健康前磨牙或第三磨牙5例,制成一系列石蜡切片,利用免疫组化方法检测牙髓各部位mGluR5的表达及分布情况,利用图像分析系统对其表达强度进行半定量分析,探讨mGluR5在牙髓中的作用和意义。结果正常牙髓从冠部、颈部到根部牙髓成牙本质细胞中mGluR5表达均呈阳性,且由冠部、颈部到根部mGluR5表达强度依次降低。结论 mGluR5在牙髓疼痛传递过程中可能具有一定的作用。

二次脑损伤后大鼠脑皮层mGluR2 mRNA的变化

目的 研究弥漫性脑损伤 (diffusebraininjury,DBI)及其合并二次脑损伤 (secondarybraininsults,SBI)后大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体 2亚型 (mGluR2 )的变化及其意义 .方法 SD大鼠 14 0只随机分为正常对照、假手术、DBI与DBI合并SBI4组 .在Marmarou弥漫性脑损伤模型的基础上 ,制成SBI模型 ,于伤后 1,3,6 ,12 ,2 4 ,4 8和 72h进行HE染色和mGluR2mRNA的原位杂交研究 .结果 与正常对照组相比 ,假手术组阳性神经元数无明显改变 (P >0 0 5 ) ;DBI组脑皮层mGluR2mRNA在伤后 12h表达开始减少 ,4 8h降至最低 (P <0 0 5 ) ;DBI合并SBI组mGluR2mRNA表达于伤后 6h即开始减少 ,2 4h降至最低 (P <0 0 5 ) .结论 在DBI及其合并SBI过程中 ,mGluR2mRNA表达降低 .mGluR2参与了DBI和SBI的病理生理过程 ,可能与脑保护有关 .

次声作用下大鼠脑皮质内mGluR5 mRNA表达的变化及其意义

目的 :探讨 8Hz、12 0 d B次声作用后大鼠脑皮质内代谢性谷氨酸受体 5亚型 ( m Glu R5 ) m RNA表达的变化及意义。方法 :SD大鼠 60只被随机分为对照组及次声作用 1、7、14次组和次声作用组 ,采用自制的次声压力舱用 8Hz、12 0 d B的次声按规定次数 ,每次作用 2小时。利用地高辛标记寡聚核苷酸探针原位杂交技术与计算机图像分析系统 ,在光镜与透射电镜下观察 m Glu R5分别在额、顶、颞及枕皮质 1区阳性神经元表达的改变 ,以及相应皮质的病理变化。结果 :次声作用 1次组 ,额、顶、颞、枕脑皮质内 m Glu R5 m RNA阳性神经元表达减少 ,次声作用 7次组脑皮质内 m Glu R5 m RNA阳性神经元表达数减少至谷底与对照组和次声作用 1次组比较 P均 <0 .0 1,次声作用 14次组脑皮质内 m Glu R5 m RNA阳性神经元表达数基本恢复到正常水平 ;阳性神经元在脑皮质浅层散在分布 ,m Glu R5 m RNA在胞浆和胞核内均匀地呈颗粒状表达。结论 :次声脑损伤可抑制m Glu R5的表达和生成 ,其作用可能与 m Glu R1α不同 ,参与机体对次声脑损伤的保护。

二次脑损伤鼠脑皮层mGluR3 mRNA改变及其激动剂DCG-IV的作用

目的 研究二次脑损伤 (SBI)后大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体 3亚型 (m Glu R3)的变化及其激动剂二碳酸环氧丙基甘氨酸 (dicarboxycyclopropyl glycine,DCG- IV)的作用 .方法 SD大鼠随机分为假手术对照、单纯脑损伤、脑损伤合并 SBI组及其 DCG- IV治疗组 4组 .在 Marmarou加速性弥漫性脑损伤模型基础上 ,以抽血造成低血压为 SBI指标 .在伤后不同时间进行原位杂交和病理学研究 .光镜下测计DCG- IV干预前后损伤神经元数目 .结果 与假手术对照组相比 ,单纯脑损伤组脑皮层 m Glu R3阳性神经元在伤后 12 h表达开始减少 ,48h降至最低 (P<0 .0 1) ;脑损伤合并 SBI组m Glu R3阳性神经元在伤后 6 h即减少 ,伤后 2 4h降至最低(P<0 .0 1) .形态学研究证实 ,DCG- IV干预能明显减轻脑皮层神经元损伤程度 .结论 在弥漫性脑损伤和 SBI所致的脑损害发生与发展过程中 ,m Glu R3的作用可能与脑保护有关 ,其激动剂 DCG- IV能有效降低脑组织损伤程度 .

mGluR5拮抗剂对FMR1基因敲除小鼠树突棘的影响及其机制探讨

目的:探讨代谢性谷氨酸受体5(mGluR5)拮抗剂2-甲基-6-苯基乙炔嘧啶(MPEP)对脆性X综合征树突棘发育的影响及其机制。方法:新生FMR1基因敲除(KO)小鼠腹腔注射MPEP1次、1周,以同龄KO鼠和野生鼠(WT)注射生理盐水对照。免疫印迹法检测微管相关蛋白1B(MAP1B)含量改变,并以单片Golgi染色方法观察皮质感觉区第Ⅴ层锥体神经元树突棘长度和密度。结果:KO小鼠树突棘长度和密度都显著高于WT小鼠,MAP1B含量也明显增高。MPEP干预1周MAP1B表达显著减少,树突棘长度、密度明显降低。MPEP1次干预明显减少MAP1B,对树突棘无影响。结论:脆性X综合征树突棘的发育异常与mGluR5信号的过度激活有关,MAP1B的过表达可能是主要环节。

脑出血术后肺部感染外周血中性粒细胞mGluR5和CD_(4)^(+)T细胞A_(2A)R表达水平及意义

目的 探究高血压脑出血术后肺部感染患者外周血中性粒细胞代谢性谷氨酸受体第5亚型(mGluR5)和CD_(4)^(+)T细胞腺苷2A受体(A_(2A)R)表达水平及意义。方法 选取2016年11月-2018年11月贵州省毕节市第一人民医院收治的高血压脑出血患者97例,根据术后是否发生肺部感染分为感染组46例,非感染组51例,分析两组患者外周血中性粒细胞mGluR5与CD_(4)^(+)T细胞A_(2A)R表达及其预测术后肺部感染的临床价值,并筛选肺部感染危险因素,比较炎症因子降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平差异。结果 感染患者共分离病原菌52株,其中革兰阳性菌29株占55.77%,革兰阴性菌20株占38.46%,真菌3株占5.77%,感染组中性粒细胞mGluR5及CD_(4)^(+)细胞A_(2A)R表达高于非感染组(P<0.05),PCT、CRP、TNF-α及IL-6水平高于非感染组(P<0.05),多因素分析结果,出血量、GCS评分、吸烟史、呼吸系统疾病、机械通气时间均为肺部感染的危险因素(P<0.05),受试者工作特征曲线(ROC)结果,中性粒细胞mGluR5与CD_(4)^(+)细胞A_(2A)R表达预测术后肺部感染曲线下面积为0.818与0.781。结论 中性粒细胞mGluR5及CD_(4)^(+)细胞A_(2A)R表达与高血压脑出血患者术后肺部感染发生密切相关,可为感染防治提供新的思路。

铝电解工人神经行为功能及mGluR1表达的改变

[目的]探讨铝电解作业工人神经行为功能与外周血淋巴细胞中代谢性谷氨酸受体I亚型(mGluR1)表达的变化。[方法]①从太原铝厂选取电解车间退休工人35名作为接触组,选取无职业接触铝的该铝厂退休工人32名为对照组,询问调查对象的一般状况;②采用世界卫生组织推荐的神经行为测试组合(NCTB)对两组工人神经行为功能进行测试;③用蛋白印迹(Western blot)检测外周血淋巴细胞mGluR1蛋白的表达水平。[结果]①接触组和对照组的一般情况(年龄、性别、工龄、教育程度、吸烟、饮酒和退休年数)均衡,差别没有统计学意义(P>0.05);②接触组情感状态指标愤怒-敌意(POMSA)和疲惫-惰性(POMSF)得分较对照组明显增加(P<0.05);困惑-迷茫(POMSC)、忧郁-沮丧(POMSD)、紧张-焦虑(POMST)和有力-好动(POMSV)的得分没有明显改变(P>0.05);数字广度(DSP)包括顺序数字广度(DSPF)和倒序数字广度(DSPB)、数字译码数(DSY)和目标追踪的正确打点数(PAC)均比对照组降低(P<0.05),简单反应时(SRT)、最快反应时(SRTF)、最慢反应时(SRTS)、非利手提转捷度(SANN)、利手提转捷度(SANP)、Benton视觉保留(BVR)和打点总数(PA)的得分两组差异无统计学意义(P>0.05),提示电解接触铝对退休的作业工人的情感状态和神经行为均产生了一定的负面影响;③Westernblot结果显示接触组mGluR1蛋白表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]铝电解工人神经行为功能受损,淋巴细胞mGluR1蛋白表达水平上调。

Homer蛋白在钙通道调控中作用研究进展

Homer蛋白是一种支架蛋白,包括Homer1、Homer2和Homer3 3种受体蛋白及其剪接体。Homer蛋白参与调节一系列Ca^(2+)调控蛋白,包括代谢性谷氨酸受体、三磷酸肌醇受体、瞬时受体电位通道、兰尼碱受体、基质相互作用分子1及Orial。Homer蛋白调控细胞内多种钙通道的开关。Ca^(2+)作为细胞内主要信使,参与多种细胞和组织生理活动,包括细胞吞噬、凋亡及基因调节,而细胞内Ca^(2+)稳态的维持需多种钙通道参与,阐明Homer对细胞内钙通道调控的作用有一定意义。本文就Homer蛋白在钙通道调控中作用的研究进展作一综述。