饲料中的转基因成分在家禽体内代谢残留的研究

用含20%抗草甘膦转基因豆粕的饲料喂养蛋鸡、番鸭,通过检测其内脏、肌肉、血液、粪便及肠道微生物的豆粕转基因成分,探讨饲料中转基因成分在家禽体内的代谢残留状况。以定性PCR检测含20%转基因豆粕的饲料及蛋鸡、番鸭的八种内脏样品(肠、胰腺、食道、肝、腺胃、肾、心脏、肌胃)、肌肉、血液、蛋品、粪便、肠道微生物的转基因豆粕的工具基因CaMV35S启动子与NOS终止子以及目的基因CP4-EPSPS等外源基因成分。PCR检测结果表明:除了含20%转基因豆粕的饲料外,蛋鸡、番鸭的八种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未检出转基因豆粕的CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS等外源基因成分。检测结果表明:长期喂养含20%转基因豆粕饲料的蛋鸡、番鸭的八种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未发现有转基因成分残留,说明饲料中的转基因成分,通过肠胃消化后充分降解,不会在鸡、鸭体内残留,也不会通过粪便排泄而扩散到土壤环境中。

丁香酚和三卡因甲磺酸盐在大口黑鲈中代谢残留的比较

为了确定大口黑鲈成鱼适合的麻醉方式和麻醉剂量,研究了不同浓度的丁香酚和MS-222对大口黑鲈的静水麻醉效果。在最适麻醉质量浓度下模拟运输24 h,记录24 h存活率并测定麻醉0.5、4、8、16和24 h后的血清生化指标、水质p H、氨氮以及麻醉剂的残留量。结果表明:随着丁香酚和MS-222浓度增加,入麻时间缩短,复苏时间延长;丁香酚和MS-222的最适质量浓度分别为18~20 mg/L、50~60 mg/L时,两麻醉组模拟运输和复苏24 h后的成活率为100%,显著高于无麻醉运输组的80%和90%(p<0.05);随着麻醉时间延长,丁香酚和MS-222组血清中的皮质醇(COR)分别从336.83pg/m L下降到291.41pg/m L,从286.11上升到367.05pg/m L(p<0.05),丁香酚组血清中的COR显著低于对照组;葡萄糖分别从14.36、7.48 mg/dL下降到7.36、3.11 mg/dL(p<0.05),而丁香酚组中乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(GOT)、尿素氮(BUN)的浓度显著低于MS-222组(p<0.05);残留检测结果表明在麻醉0.5h时,鱼肉中丁香酚含量达到最大值5.14mg/kg,在清水中复苏1d时丁香酚残留量为0.45mg/kg;而MS-222组在8 h残留量达到最大值为36.24 mg/kg,复苏4 d时基本消除完全。结果显示,丁香酚剂量小,代谢快,在诱发氧化应激和组织损伤时有较少的副作用。

转基因成分在肉鸡体内的代谢残留及对生化指标、器官发育的影响

试验选择1日龄AA肉仔鸡720只,随机分成4个处理组,用含有27%(25%)3、6%(34%)的抗草甘膦转基因豆粕日粮和常规豆粕日粮饲喂肉鸡,通过检测其肝脏、肾脏、脾脏、胸肌、腿肌、十二指肠、空肠和回肠的转基因成分,探讨饲料中转基因成分在家禽体内的代谢残留状况,同时研究了抗草甘膦转基因豆粕对肉鸡血清生化指标和器官发育的影响,结果表明,以定性PCR检测的转基因豆粕日粮肉鸡的八种样品(肝脏、肾脏、脾脏、胸肌、腿肌、十二指肠、空肠和回肠)中没有CP4-EPSPS外源基因成分,同时综合分析表明,转基因豆粕对肉鸡的血清生化指标和器官发育没有显著差异,在试验中转基因豆粕没有在肉鸡体内残留,对生化指标和器官发育没有显著差异。

饲料中的转基因成分在蛋鸡体内代谢残留的研究

用含20%抗草甘膦转基因豆粕的饲料喂养鸡蛋,通过检测其内脏、肌肉、血液、粪便及肠道微生物的豆粕转基因成分,探讨饲料中转基因成分在鸡蛋体内的代谢残留状况。以定性PCR检测含20%转基因豆粕的饲料及蛋鸡的8种内脏样品(肠、胰腺、食道、肝、腺胃、肾、心脏、肌胃)、肌肉、血液、蛋品、粪便、肠道微生物的转基因豆粕的工具基因CaMV35S启动子与NOS终止子以及目的基因CP4-EPSPS等外源基因成分。PCR检测结果表明:除了含20%转基因豆粕的饲料外,蛋鸡的8种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未检出转基因豆粕的CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS等外源基因成分。检测结果表明:长期喂养含20%转基因豆粕饲料的蛋鸡的8种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未发现有转基因成分残留,说明饲料中的转基因成分,通过肠胃消化降解后吸收,不会在鸡的组织器官内残留。

烟酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内代谢残留规律的研究

分析烟酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内代谢残留规律,准确制定该种药物的休药期,为有效、安全、合理地使用烟酸诺氟沙星提供准确科学的理论依据。选用松浦镜鲤(Cyprinus carpio L.)为实验对象,连续5 d口灌30 mg/(kg·d)烟酸诺氟沙星(norfloxacin nicotinate,NFX)后,分别于给药后1,2,3,4,5,6,7,9,11,13,15,20,25 d采集鲤血浆、肌肉、皮、肝和肾5种组织,通过高效液相色谱法检测其各组织内烟酸诺氟沙星的残留量。烟酸诺氟沙星在鲤体内吸收分布迅速,代谢较为缓慢,各组织分布量由多到少依次为:肾脏、肝胰脏、肌肉、皮肤、血浆,为避免组织内残留过多药物,建议休药期为24 d。

高效液相色谱- 串联质谱法检测鸡肌肉中尼卡巴嗪、地克珠利和托曲珠利的主要代谢物残留量

本研究建立鸡肌肉中尼卡巴嗪、地克珠利和托曲珠利的主要代谢物残留量的高效液相色谱-串联质谱检测方法,进行预处理后,取上清液用高效液相色谱-串联质谱法检测,在3.0~10.0μg/kg范围内,3种抗球虫药物的代谢物残留量呈良好线性关系,相关系数均>0.999,回收率在87.5%~109%,相对标准偏差在1.39%~2.04%。本法灵敏、准确,适用于鸡肌肉中尼卡巴嗪、地克珠利和托曲珠利的代谢物残留量的测定。

气相色谱-三重四极杆质谱法测定鸡蛋中氟虫氰及其代谢残留

建立了QuEChERS快速提取和净化样品,气相色谱-三重四级杆质谱联用法测定鸡蛋中氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈亚砜的方法。水和乙腈萃取、C_(18)和PSA净化样品,气相色谱分离,多反应离子监测模式测定。氟虫腈及其3种代谢物在5~400μg/L范围内线性关系良好,方法的检出限为1.0~2.5μg/kg;定量限为3.0~7.5μg/kg。在两个浓度水平进行加标,上述4种测定物的回收率为72.5%~95.3%,相对标准偏差为3.7%~7.5%。本方法可满足鸡蛋中氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈亚砜残留检测的实际需要。

兽药在动物体内残留代谢的研究进展

随着经济的发展,动物食品在人们生活中所占比例越来越大,而各种动物食品中的兽药残留污染,已成为危及人类健康的公共热点问题。兽药代谢残留种类繁多,分布广泛。主要介绍了常见兽药及其代谢残留的概况。

渔稻共作模式下稻谷中农药(包含代谢物)和抗生素残留量检测方法

为建立一种稻谷中农药(包含代谢物)和抗生素高通量检测方法,通过简单快捷的前处理,使用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(6495 Triple Quadrupole LC/MS System)检测57种化合物。样品经Mcllvaine-Na2 EDTA缓冲液充分润湿、乙腈提取,无水硫酸钠吸附水分,离心分层,过有机相微孔滤膜净化。液质联用仪采用甲酸水溶液(A)和乙腈溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱,质谱(ESI)采用多离子动态检测模式(dMRM)对57种农药和抗生素的定量离子和定性离子进行了监测。结果表明:在12 min内完成57种目标化合物的分离分析。57种农药和抗生素在2、4和20μg/kg(四环素类10、20、100μg/kg)添加水平的回收率为:60.01%~118.10%,相对标准偏差:0.04%~19.62%,相对标准偏差小于20.0%(n=6),方法定量限为1μg/kg(四环素类5μg/kg)。该方法快速、准确、灵敏,适合测定稻谷中农药(包含代谢物)和抗生素微量残留。

超高效液相色谱-串联质谱法测定芦蒿中7种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量

采用超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定芦蒿中7种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留。取芦蒿样品5.00g,用乙腈10mL超声提取5min,提取液用6.0g硫酸镁和1.5g乙酸钠脱水后,经QuECHERS固相萃取柱净化。净化液用(A)10mmol·L^(-1)甲酸铵溶液和(B)10mmol·L^(-1)甲酸铵-甲醇溶液的体积比为9∶1的混合液稀释至0.8mL后进行色谱分离,以Kinetex C18100A色谱柱为固定相,以不同体积比的上述两种溶液(A和B)的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析中采用电喷雾正离子源和多反应监测模式。7种化合物的线性范围均在0.50~20.0μg·L^(-1)之间;检出限(3S/N)为0.17~0.55μg·kg-1。加标回收率为67.4%~103%;测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~8.5%之间。

安克锰锌在荔枝树上施用的残留代谢消解规律与安全性评价

安克锰锌是烯酰吗啉两个异构体和代森锰锌组成的多元混合制剂。试样经粉碎、溶剂浸泡提取、混合柱净化,用气相色谱测定烯酰吗啉和代森锰锌母体(CS2),液相色谱测定代谢物乙撑硫脲(ETU)。仪器最低检出量:烯酰吗啉为1.436×10-12g,代森锰锌母体1.326×10-10g,ETU2.5×10-10g,最低检出浓度依次为0.02、0.025、0.02mg/kg,方法回收率依次为86.4%～90.8%、89.2%～95.9%、89.10%～95.13%;标准偏差为0.53～4.34;变异系数为0.58%～4.62%。安克锰锌在果皮中的消解方程广西和广东分别为C=1.2719e-0.1975T和C=1.045e-0.1972T,半衰期(T/2)均为3.5d;土壤中分别为C=0.8734e-0.1187T和C=0.6171e-0.1146T,半衰期(T/2)=6d;最高剂量250倍、最多施3次,最短距收期7d,在果肉中均未检出,果皮和土壤中的残留仅分别为0.1385～0.1745mg/kg和0.3105～0.3415mg/kg,均低于欧共体规定代森锰锌MRL值0.5mg/kg。

克露在荔枝果树上的残留代谢消解规律及安全性评价

克露是霜脲氰和代森锰锌组成的多元混合制剂。试样经粉碎溶剂浸泡提取,混合柱净化,霜脲氰和代谢物乙撑硫脲用液相色谱定量,代森锰锌气相色谱定量。在广西和广东采用田间试验方法进行了克露在荔枝果(皮)中的消解动态试验。结果表明,3d消解率分别为83.53%和82.96%,21d消解率均>97.00%。半衰期(T.2)分别为24h和19.2h;土壤中的消解速率与果(皮)相仿,半衰期两地分别为20h和18h。代森锰锌在荔枝果(皮)和土壤中均能产生代谢物乙撑硫脲,其产生量,荔枝果(皮)约为母体的4.68%～5.78%,土壤约为母体的8.26%～9.17%,最终残留检测,残留量与施药次数呈正相关,与距收期呈负相关。在果肉中均未检出有残留,即使采用最高浓度250倍,最多5次,最短距收期3d,在果(皮)和土壤中的残留也仅分别0.3657～0.3735mg·kg-1和0.4219～0.4831mg·kg-1,参照欧共体规定代森锰锌MRL值0.5mg·kg-1,分析结果均在允许值范围内。据此,说明用72%克露在荔枝挂果期用250～500倍,施药4～5次,距收期3～21d是安全的。

渔业养殖水体中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的检测方法研究

建立了渔业养殖水体中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的检测方法。水样经二氯甲烷液液萃取、中性氧化铝填料吸附除杂后,采用超高效液相色谱-串联质谱法检测。色谱条件为:Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温40℃,流动相由5 mmol·L^(-1)的乙酸铵缓冲溶液(含0.1%甲酸)和乙腈组成,梯度洗脱程序,流速为0.3 mL·min^(-1)。质谱条件为:电喷雾正离子模式、多反应监测扫描模式、内标法。结果表明,在标准溶液浓度为0.2~5.0μg·L^(-1)时,孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫4种组分的质谱信号强度与浓度之间均呈较好的线性关系,相关系数r大于0.998,方法检测限和定量限分别为2 ng·L^(-1)和5 ng·L^(-1)。在空白水样为5~100 ng·L^(-1)的添加浓度梯度下,4种组分的平均加标回收率为81.8%~109.5%,批内精密度和批间精密度均小于10%。说明该方法准确率高、重现性好,且定量限低,能满足对渔业养殖水体中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的检测要求。

同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的不确定度评定

建立同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中孔雀石绿、结晶紫、隐性孔雀石绿、隐性结晶紫残留的不确定度评定方法,依据GB/T 19857-2005《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》,建立数学模型,通过不确定度来源分析建立不确定度评价方法。结果表明:标准溶液的配制和标准曲线拟合引入的不确定度最大,而同位素稀释法可以减小前处理过程和基质效应引入的不确定度。水产品中孔雀石绿残留量为14.26μg/kg时,其扩展不确定度为1.35μg/kg(k=2);结晶紫残留量为15.28μg/kg时,其扩展不确定度为1.29μg/kg(k=2);隐性孔雀石绿残留量为14.47μg/kg时,其扩展不确定度为1.21μg/kg(k=2);隐性结晶紫残留量为14.69μg/kg时,其扩展不确定度为1.24μg/kg(k=2)。

气相色谱-质谱法测定蜂蜜中杀虫脒及其代谢物残留量的研究

样品中的杀虫脒用醋酸和氢氧化钠相继处理后水解成 4-氯邻甲基苯胺 ,以液 -液蒸馏提取器经水蒸汽蒸馏将 4-氯邻甲基苯胺提取到异辛烷中 ,在用盐酸溶液提取后 ,于碱性条件下提取至正己烷中进行气相色谱 -质谱测定。检测下限为 0 .0 0 5mg kg。

HILIC-MS/MS结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留

目的建立亲水作用色谱-串联质谱(HILIC-MS/MS)结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留。方法样品中加入^(13)C_(5)利巴韦林内标,1%乙酸乙腈超声提取,在37℃下经酸性磷酸酶酶解,经QuEChERS净化萃取包净化后用Waters ACQUITY UPLC BHE HILIC (2.1 mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵(含0.2%甲酸)-乙腈为流动相梯度洗脱,在电喷雾正离子电离多反应监测模式下监测,内标法定量。结果乌鸡白凤丸、复方鸡内金片中利巴韦林含量在1.0~100μg/kg之间时,相关系数大于0.999,方法检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg,日内回收率为95.47%~100.75%,日内精密度RSD为0.53%~2.76%,日间回收率为94.47%~101.11%,日间精密度RSD为1.00%~2.33%。结论该方法快速简便,线性范围宽,重复性好,可用于含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留的定性及定量检测。

罗非鱼硝基呋喃代谢物残留检测方法的运用

罗非鱼是一种世界知名的淡水鱼,目前兽药残留在水产上也十分严重,硝基呋喃已成为国内外常用的兽药之一,呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃酮、呋喃妥因是具有代表性的几种,具有抗菌和抗炎作用,已被广泛应用。但是,在食用含有硝基呋喃药物产生残留的动物后,会产生过敏等危害人体健康的疾病,因此需要建立快速、灵敏、准确的检测方法,本文结合实际情况,分析总结了国内外的硝基呋喃类分类和现行检测方法,以供参考。

莱克多巴胺的毒性及其残留免疫学检测技术研究进展

综述了莱克多巴胺(RCT)的化学结构、理化特性、构效关系、毒性作用、在动物体内的代谢残留及其免疫学检测技术研究进展。

恩诺沙星及其代谢产物在珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus ♀× Epinephelus lanceolatus ♂)体内的代谢及消除规律

本研究在连续给药的情况下,开展恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在珍珠龙胆石斑鱼体内的代谢残留情况研究,为科学合理使用恩诺沙星防治珍珠龙胆石斑鱼的细菌性疾病提供理论依据,也在水产养殖上为指导恩诺沙星科学用药提供借鉴。在28℃的水温条件下,以30 mg/(kg·bw)恩诺沙星对平均体重为(300±28)g的珍珠龙胆石斑鱼进行连续5 d口灌给药实验,用高效液相色谱-串联质谱法测定石斑鱼血浆、肌肉和肝脏中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星的残留含量。结果显示:恩诺沙星在血浆、肝脏和肌肉中很快达到最大值,达峰时间分别为第5天给药后3 h、第5天给药后3 h和第4天给药后3 h,其浓度分别为24.5 mg/L、13.0 mg/kg和8.20 mg/kg;恩诺沙星的代谢产物环丙沙星分别在第5天给药后3 h、第5天给药后3 h和第4天给药后3 h达到峰值,其浓度分别为0.276 mg/L、0.738 mg/kg和0.110 mg/kg,说明只有少量的恩诺沙星代谢成环丙沙星。根据本实验的数据,建议休药期不低于980度日。

恩诺沙星及其代谢产物在南美白对虾体内药代动力学研究

目的研究恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)及其代谢产物环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)在虾体内的组织分布和药物代谢随时间的变化规律。方法在(26±2)℃的养殖水温下,以30 mg/(kg·bw)的投喂剂量对南美白对虾进行单次投喂药饵给药,采用高效液相色谱-串联质谱技术(high performance liquid chromatographytandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)进行测定ENR与CIP的含量,其药-时数据通过DAS 2.0动力学软件分析。结果 ENR在南美白对虾体内药时数据符合一级吸收二室模型,而其代谢产物CIP在南美白对虾体内象不符合房室模型。ENR在肝胰腺和肌肉中的最快达峰时间(T_(peak))为1和8 h,达峰浓度(C_(max))分别为24451.2和14212.1μg/kg;药时曲线下面积分别为971766.2和116847.4μg/(L·h);消除半衰期(t1/2β)分别为59.5和33.6 h。CIP在肝胰腺和肌肉中的最快达峰时间(T_(peak))为8和20 h;达峰浓度(C_(max))分别为598.8和4566.6μg/kg。肝胰腺和肌肉的ENR残留量低于最大残留限量(maximum residual limit,MRL)分别为384 h和480 h,而肝胰腺和肌肉中的CIP分别从288和480 h开始低于检出限。结论在(26±2)℃养殖水温下,以30 mg/(kg·bw)剂量对南美白对虾进行单次投饵给药时,建议休药期不得低于20 d。