肥胖相关代谢性内毒素血症对精子畸形率的影响因素分析

目的探讨肥胖人群的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素分析。方法选取2021年1~12月就诊的畸形精子症患者453例作为观察组,选取同期精子畸形率正常人员231例作为对照组。检测身高、体重、血清人连蛋白(Zonulin)、血清脂多糖结合蛋白(LBP)、人精液弹性蛋白酶(Elastase)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、精子畸形率。采用多因素Logistic回归分析法、Pearson相关分析法探究肥胖人群相关的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素。结果观察组肥胖率显著高于对照组(72.4%∶25.1%,χ^(2)=8.231,P=0.009);观察组8OHdG异常率高于对照组(73.5%∶19.9%,χ^(2)=5.964,P=0.018);观察组Zonulin异常率显著高于对照组(79.7%∶8.2%,χ^(2)=9.635,P=0.002);观察组LBP异常率高于对照组(69.3%∶29.4%,χ^(2)=7.524,P=0.013);观察组雌二醇(E2)异常率高于对照组(43.5%∶10%,χ^(2)=6.954,P=0.019);在年龄、Elastase、FSH、LH、TT等观察指标方面,2组差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示,BMI(OR=5.984,P=0.004)、8OhdG(OR=3.521,P=0.001)、Zonulin(OR=3.241,P=0.017)、LBP(OR=5.511,P=0.001)、E2(OR=4.671,P=0.026)是影响精子畸形率的高危因素。BMI与Zonulin、LBP、8OhdG、E2存在相关关系(P<0.05)。结论肥胖可诱发代谢性内毒素血症,肠道通透性的增加以及内毒素水平的升高可造成全身炎性反应,诱导氧化应激的出现。由氧化应激造成白细胞释放的活性氧将会造成精子畸形率升高。因此,肥胖诱导的代谢性内毒素血症可引起Zonulin、LBP、8OHdG、E2升高,它们是影响精子畸形率的高危因素。

宽口径毛细管柱GC测定鸡粪中T-2毒素代谢产物的方法

目的测定鸡粪中Ｔ－２四醇、Ｔ－２三醇、Ｔ－２毒素、ＨＴ－２毒素的含量。方法人工染毒，化学提取，ＴＢＴ衍生，宽田径毛细管柱ＧＣ测定，投予剂量不同回收率略有差异。结果该方法的回收率 ２００ｎｇＴ－２四醇８３．１％～９２． ８％；Ｔ－２三醇 ８３． ６％～９０． ６％；Ｔ－２毒素、ＨＴ－２毒素 ７９． ６％～９０． ６％。结论方法的回收率高，操作简单，可供研究Ｔ－２毒素代谢机制应用。

模拟代谢性内毒素血症对肝损伤小鼠肝组织TLR4信号通路的影响

目的观察持续4 w的模拟代谢性内毒素血症对小鼠肝脏组织病理和4型Toll样受体(TLR4)信号通路的影响。方法将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(n=10)和内毒素组(n=10),均予以普通饲料喂养,和高脂组(n=10),予以高脂饲料喂养。内毒素组小鼠同时经腹部皮下植入的微泵注入内毒素300μg·kg-1·d-1,连续4 w,正常组小鼠皮下微泵持续注入生理盐水作为对照。4 w后测定小鼠血清内毒素水平,对肝组织切片行HE染色后进行非酒精性脂肪性肝病评分(NAS),采样Real time PCR法测定小鼠肝组织TLR4及其下游的My D88和TRIF-related adaptor molecule(TRAM)m RNA水平。结果内毒素组小鼠血清内毒素水平(0.62±0.04 EU/ml)显著高于正常组(0.50±0.06 EU/ml,P<0.05)和高脂组(0.49±0.05 EU/ml,P<0.05);内毒素组小鼠肝组织主要表现为单纯性脂肪变性,NAS积分为(2.30±0.49),高脂组小鼠肝组织炎症较明显,NAS积分为(4.20±1.61),显著高于内毒素组(P<0.05);与正常组相比,内毒素组小鼠肝组织TLR4 m RNA水平上调5.12倍(P<0.01),TRAM m RNA水平上调3.46倍(P<0.01),而My D88 m RNA水平与正常组比,无显著差别。结论持续4 w的模拟代谢性内毒素血症可诱导小鼠肝脏单纯性脂肪变性,TLR4 m RNA和TRAM m RNA水平上调,而My D88 m RNA水平无显著变化。

胶束电动毛细管色谱法分离定量T-2毒素代谢物

目的 建立一种测定 T- 2毒素代谢物 T- 2四醇 (T- 2 - 4- ol)、3′-羟基 - HT- 2毒素 (3′- OH- HT- 2 )、3′-羟基 - T- 2毒素 (3′- OH- T- 2 )、T- 2四醇四醋酸 (T- 2 - 4- ol- 4- ac)、T- 2三醇 (T- 2 - 3- ol)、HT- 2毒素和 T- 2毒素的方法。方法 采用胶束电动毛细管色谱法 (MECC)。结果 研究了不同浓度的 SDS和硼砂、不同体积分数的乙腈及不同温度对灵敏度和分离度的影响。发现柱温 30℃ ,所用缓冲液中 SDS的浓度为 6 0 m mol/ L,硼砂浓度为 10mm ol/ L,乙睛的体积分数为 15 %时 ,灵敏度和分离度最高。气压进样 10 s,信号噪音比为 3:1时 ,7种 T- 2毒素代谢物的检测极限 3′- oh- ht- 2是 4.7m g/ L 其余全部为 9.4mg/ L。在上诉条件下 ,所有分析物的浓度与峰面积之间均具有良好的线形关系。结论 MECC可以用来分离定量 7种 T- 2毒素代谢物 ,为测定人或动物体液中的 T-

Tracer GC/FTIR分析T-2毒素及其代谢产物

用TracerGC/FTIR系统测定了T-2毒素及其四种主要代谢产物(HT-2、T-2triol、T-2tetraol及NEO)的硅烷化衍生物的凝聚态红外谱图,在优化样品沉淀片移动速率的基础上,建立了五种毒素的气-红联用检测方法。用此方法分析染毒大白鼠全血样品,结果表明方法的适用性很好。

代谢性内毒素血症小鼠胰腺组织炎性递质的表达

目的观察代谢性内毒素毒血症（ME）小鼠胰腺组织脂联素、白细胞介素-6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2 mRNA的表达，探讨ME对胰腺组织炎性反应和胰岛素抵抗的影响。方法将纯系C57BL／6J雄性小鼠编号按随机数字法分为代谢性内毒素毒血症组6只和对照组6只，代谢性内毒素毒血症组采用皮下微型泵导入微量脂多糖，建立ME动物模型，对照组则每日泵入相应体积的生理盐水。采用实时荧光定量PCR法的相对定量分析（与GAPDH对照），检测小鼠胰腺组织脂联素、IL-6、MCP-1及其受体CCR2 mRNA的表达。结果代谢性内毒素毒血症组小鼠空腹血糖浓度降低（P〉0．05）；小鼠体重净增值、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数均升高（均P〈0．05）；小鼠胰腺组织中IL-6、MCP-1及CCR2 mRNA的表达均增强（均P〈0．05），脂联素mRNA的表达明显减低（P〈0．01）。结论代谢性内毒素血症能够增强胰腺组织中促炎因子的表达，减低抗炎因子的表达，促进胰腺组织的炎症反应，降低胰岛素敏感性。

肥胖人群的代谢性内毒素血症对精子DNA完整性影响的相关性研究

目的探讨肥胖人群的代谢性内毒素血症与精子DNA碎片指数之间是否存在相关性。方法选取2021年1月至6月在甘肃省妇幼保健院就诊的138例男性不育症患者,检测其血清人连蛋白(Zonulin)、血清脂多糖结合蛋白(LBP)、人精液弹性蛋白酶(Elastase)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、精子DNA碎片指数(DFI)等。采用Pearson相关系数分析各指标间的相关性。结果Zonulin与LBP之间r=0.352,P=0.000,呈正相关;LBP与8OHdG之间r=0.540,P=0.000,呈正相关;8OHdG与体重指数(BMI)之间r=0.562,P=0.000,呈正相关;LBP与DFI之间r=0.524,P=0.000,呈正相关;DFI与Elastase之间r=-0.035,P=0.680,无相关性;LBP与Elastase之间r=-0.008,P=0.923,无相关性。结论肥胖可诱发肠道细菌易位,易位的细菌可诱导代谢性内毒素血症发生,内毒素水平的升高可造成全身炎症反应,致使氧化应激出现,而氧化应激可造成白细胞释放活性氧,活性氧会造成精子DNA损伤。

同位素稀释-超高效液相色谱-线性离子阱串联质谱分析谷物及其制品中呕吐毒素及其衍生物和代谢物

建立了谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇的同位素稀释-超高效液相色谱-线性离子阱串联质谱（UHPLC-QTRAP-MS/MS）定性确证和定量测定方法。样品经乙腈-水（84∶16,V/V）混合溶液提取,乙腈饱和的正己烷除脂,HLB固相萃取柱净化,Waters Atlantis~T3色谱柱分离,以乙腈-0.02%氨水溶液为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下,采用多反应监测（MRM）-信息依赖性采集（IDA）-增强子离子扫描（EPI）模式检测,在线EPI谱库定性分析,同位素内标定量,在1~300μg/L浓度范围内,4种目标物的线性相关系数均大于0.999,检出限为0.1μg/kg,定量限为0.3μg/kg,添加5,50和200μg/kg的3个浓度水平,4种目标物的平均回收率均在81.3%~101.7%之间,相对标准偏差均小于5%,将该技术应用于FAPAS阳性玉米质控样品和5种代表性的样品进行测试,结果表明,本方法简单、准确、快速,适用于谷物及其制品中呕吐毒素及其衍生物和代谢物的快速确证和定量测定。

栀子对重症急性胰腺炎胰腺细胞结构和功能的影响及其与NO、内毒素、氧自由基的关系

目的探讨栀子对重症急性胰腺炎(SAP)胰腺细胞结构和功能的影响及其与一氧化氮(NO)、内毒素、氧自由基(OFR)的关系。方法经胆胰管逆行注射1.5%去氧胆酸钠建立SAP模型,给予栀子治疗,观察血中淀粉酶、内毒素、一氧化氮(NO)、过氧化脂质(LPO)以及胰腺细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、溶酶体酸性磷酸酶(ACP)释放率、微粒体细胞色素P450的变化,并进行相关分析及胰腺组织病理学检查。结果与对照组比较,模型组血中淀粉酶、NO、内毒素、LPO以及溶酶体ACP释放率明显升高(P<0.05),线粒体SDH活性和微粒体细胞色素P450则显著降低(P<0.05),光镜下胰腺组织病理损害明显;栀子治疗后上述各检测指标均较模型组明显改善(P<0.05);相关分析显示淀粉酶、NO、内毒素、LPO与溶酶体ACP释放率呈正相关,与线粒体SDH和微粒体细胞色素P450呈明显负相关。结论NO、内毒素、OFR破坏胰腺细胞的结构和功能。栀子能减轻三者的损伤,保护胰腺细胞。

大黄黄芪药对对慢性肾衰竭大鼠的肾保护作用与胃肠激素水平变化的相关性研究

目的:为了探讨胃肠激素与慢性肾衰竭大鼠肾功能损伤的相关性及大黄黄芪药对对慢性肾衰竭肾功能损伤可能的保护机制。方法:本研究采用5/6肾切除法复制慢性肾衰大鼠模型,按大鼠24 h尿蛋白(UPr)水平分为假手术组、模型组、贝那普利组、大黄组、黄芪组、大黄:黄芪1:1组、大黄:黄芪1:2组、大黄:黄芪1:4组和大黄:黄芪1:6组,5周后,检测24 h UPr、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的水平,及血清与胃窦中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、血管活性常肽(VIP)和生长抑素(SS)的含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠体重下降(P<0.01)、肾脏系数上升(P<0.01)、24 h Upr、Scr、Bun、GAS、VIP水平上升(P<0.01),MTL、SS水平降低(P<0.01);与模型组比较,除大黄组外,各给药组体重显著提高(P<0.01,P<0.05),大黄组、大黄:黄芪1:4组肾脏系数下降(P<0.01,P<0.05),24 h UPr、Scr、BUN水平下降(P<0.01,P<0.05),以大黄:黄芪1:2组最为显著,各治疗组胃肠激素水平得到适当的调整。结论:大黄黄芪可以使CRF大鼠体重恢复,抑制残肾的代偿性肥大,下调代谢毒素的水平,同时可以有助于胃肠动力的恢复,具有调节体内胃肠激素分泌的作用。推断其改善肾功能可能是通过调节胃肠激素水平,改善胃动力,恢复胃肠道运动,增加体内对代谢毒素的排除的方式来实现的。且配比给药疗效优于单味药,大黄:黄芪1:2组下调代谢毒素水平最为明显,疗效最优。

不同配比大黄黄芪对CRF大鼠TGF-β1/HGF因子表达的干预研究

目的:研究不同配比后的大黄黄芪对慢性肾衰竭(CRF)大鼠的肾间质纤维化程度及相关因子表达水平的影响,分析可能的相关作用机制。方法:采用5/6肾切除法复制慢性肾衰竭大鼠模型,模型大鼠按24h尿蛋白(UPr)水平分级后随机分为假手术组、模型组、贝那普利组(5×10^-3g/kg)、大黄组(1.5g/kg)、黄芪组(3g/kg)、大黄黄芪1:1(3g/kg)、1:2(4.5g/kg)、1:4(7.5g/kg)和1:6组(10.5g/kg),连续灌胃5周后,检查大鼠体质量、残余肾重及肾脏系数的大小,HE染色后观察肾组织形态学变化,检测各组大鼠24hUPr、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、TGF-β1(转化生长因子β1)、TGF-β1mRNA、HGF(肝细胞生长因子)和C-Met(肝细胞生长因子受体)的水平。结果:①12周后模型制备成功,模型组大鼠体质量显著下降,肾脏系数、24hUpr、Scr、Bun水平显著升高;②给药5周后,各给药组大鼠体质量明显恢复,24hUPr、Scr、BUN和TGF-β1水平显著下降,肾脏组织损伤程度得到明显改善;大黄组和大黄黄芪1:2、1:4组肾重显著降低,且大黄:黄芪1:4组肾脏系数下降明显;各药物治疗组(除贝那普利组)C-Met的表达水平显著升高;大黄黄芪1:2、1:4与1:6组的TGF-β1mRNA表达显著降低;大黄黄芪1:2、1:6组大鼠的HGF蛋白量显著提高;综合以大黄:黄芪1:2组改善作用最为显著。结论:大黄黄芪不同配比后可以有效恢复慢性肾衰竭大鼠体质量,抑制残肾的代偿性肥大,下调代谢毒素的水平,同时可以调整TGF-β1/HGF的平衡,减轻肾纤维化程度。且配比给药疗效优于单味药,大黄:黄芪1:2组改善效果最为明显。

肠道菌群与胰岛素抵抗

胰岛素抵抗不仅是代谢综合征的中心环节,也是2型糖尿病发病的关键环节,本文将对肠道菌群与胰岛素抵抗的关系作一综述。

玉竹提取物A对小鼠单核细胞体外诱生血栓素B2分泌量的影响

目的观察小鼠单核细胞在体外经内毒素刺激分泌血栓素B2的情况,及不同浓度玉竹提取物A对其分泌量的影响。方法实验于2004-06/2004-08在锦州医学院免疫实验室进行。选择普通级健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A500m g/L组、玉竹提取物A1000m g/L组、玉竹提取物A1500m g/L组,玉竹提取物A2000m g/L组共6组,每组6只。36只小鼠摘眼球取血,分离外周血单核细胞,分置24孔培养板中,每孔0.5m L。每组设6个平行孔,大肠杆菌内毒素为终浓度。正常对照组每孔加完全16400.5m L;模型对照组同样每孔加完全16400.5m L;同时4个实验组的单核细胞内分别加入相应浓度的玉竹提取物A;另取两个24孔培养板,每孔只加单核细胞悬液1m L。上述分离之单核细胞培养3d后换液1次,除正常对照组外,将10m g/L的大肠杆菌内毒素10μL加入其余5组,共育2h;同时取只加单核细胞悬液的后两板,每组加大肠杆菌内毒素浓度分别为0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2h。然后收集每孔上清液,放免分析法测定上清液中血栓素B2含量。观察体外给予不同浓度大肠杆菌内毒素,对血栓素B2分泌量的影响;不同浓度玉竹提取物A对同一浓度大肠杆菌内毒素刺激的血栓素B2分泌量的影响。结果36只小鼠均进入结果分析。①大肠杆菌内毒素维持在0.01,0.1,1,10mg/L时,其刺激小鼠外周血单核细胞合成血栓素B2水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内毒素浓度增加,血栓素B2合成水平亦升高(800,950,1180,1500ng/L),大肠杆菌内毒素为10m g/L时,刺激血栓素B2合成速率达峰值;当内毒素刺激量增至100,400m g/L时,血栓素B2合成水平不再升高,而呈下降趋势(1100,900ng/L)。②当用10m g/L的大肠杆菌内毒素分别刺激除正常对照组外的其余5组的单核细胞时,模型对照组血栓素B2分泌量明显高于正常对照组[(1382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P<0.01],4个浓度(500,1000,2000,4000m g/L)玉竹提取物A组血栓素B2的量明显低于模型对照组[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,P<0.01],与正常对照组(823±78)ng/L无显著差异。结论内毒素体外可以刺激单核细胞分泌血栓素B2,且刺激量为10mg/L时,单核细胞合成血栓素B2最旺盛;不同浓度玉竹提取物A体外均可显著抑制血栓素B2的分泌,但随着药物浓度的增大,其抑制作用并未增强。

肠道菌群与肥胖和2型糖尿病的关系

肥胖和2型糖尿病已成为严重威胁人类健康的全球性疾病,一直以来都被认为是由生活方式、遗传和环境等因素所导致的。肠道菌群作为进入人体的一个重要环境因素,影响着宿主的营养、代谢及免疫,在肥胖、糖尿病、代谢综合征和非酒精性脂肪肝等疾病中都有着非常重要的作用。

利格列汀对2型糖尿病大鼠代谢性内毒素血症的影响

目的探讨利格列汀对高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导的2型糖尿病大鼠代谢性内毒素血症的影响。方法30只健康雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字法选择10只作为正常对照组，以正常饲料喂养，其余20只以高脂饲料饲喂8周后，予一次性腹腔注射STZ（35mg／kg）制备2型糖尿病模型。将造模成功大鼠共16只按随机数字法分为利格列汀干预组（3mg·kg-1·d-1灌胃，n=8）和糖尿病对照组（等量生理盐水灌胃，n=8），干预4周后测定大鼠空腹血糖、空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯、总胆固醇、门静脉血浆脂多糖、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、二胺氧化酶（DAO）的水平，计算稳态模型评估．胰岛素敏感指数（HOMA-ISI）及稳态模型评估一胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）。结果与正常对照组相比，糖尿病对照组空腹血糖、FINS、HOMA-IR、甘油三酯、总胆固醇及体重等指标明显升高，In（HOMA-ISI）明显降低，而利格列汀干预组上述指标除体重外较糖尿病对照组均有改善（F=39．18—136．74，P均〈0．01）。糖尿病对照组门静脉血浆脂多糖、TNF-α、IL-6、血浆DAO水平明显高于正常对照组，而利格列汀干预组上述指标较糖尿病对照组有所下降（F=18．13～51．43，P均〈0．05）。结论利格列汀可以改善高脂饮食联合STZ诱导的2型糖尿病大鼠代谢性内毒素血症，并减轻全身系统性炎性反应。

双歧杆菌与2型糖尿病的关系

2型糖尿病已经成为严重危害人类健康的全球性疾病,但这并不能完全归因于人类基因组及饮食习惯、生活方式的改变,肠道菌群在糖尿病的发生、发展中也发挥着重要作用。肠道菌群与宿主代谢及免疫之间有着复杂的双向作用,肠道菌群的改变可以导致肥胖、胰岛素抵抗、代谢性内毒素血症、肠道渗透压改变,从而促进糖尿病的发生、发展。而双歧杆菌属作为肠道菌群中一种主要的益生菌,在2型糖尿病的发生、发展中所起的作用不容小视。

早期运动干预对高脂饮食诱导代谢性内毒素血症大鼠及其肝脏线粒体的影响

目的研究早期运动干预对于高脂饮食诱导代谢性内毒素血症的影响，了解其对线粒体形态功能的改变。方法将100g左右的SPF级SD雄鼠随机分为A组（正常饮食组）、B组（高脂饮食组）及C组（高脂饮食联合运动组）。于清洁级环境中饲养6周后处死，检测其体质量、血脂、血清内毒素水平。透射电镜了解其肝脏超微结构变化。差速离心法提取肝脏线粒体后，流式细胞仪检测其肝脏线粒体肿胀度及线粒体膜电位。结果饲养6周后，大鼠内毒素水平，B组相对于A组差异有统计学意义（2．916±0．761比5．454±1．254，t=-4．236，P〈0．05）；透射电镜下观察B组细胞中的脂滴，较A、C组明显增多。但c组血清内毒素水平与B组比较，差异无统计学意义（4．972±1．757比5．454±1．254，t=-0．547，P〉0．05）。比较各组大鼠肝脏线粒体肿胀情况，B组相对于A、C组，差异均有统计学意义（4．330±0．501比3．507±0．532，t=2．759，P〈0．05；4．330±0．501比3．581±0．188，t=3．426，P〈0．05）。各组大鼠肝脏线粒体膜电位情况，B、C组和A组比较，差异均有统计学意义（1．660±0．202比0．473±0．064，t=13．712，P〈0．05；2．012±0．506比0．473±0．064，t=7．411，P〈0．05）。但各组透射电镜中线粒体形态并没有出现显著性差异。结论大鼠经高脂饮食喂养6周后可出现代谢性内毒素血症状态。代谢性内毒素对肝脏线粒体膜电位水平的影响，说明代谢性内毒素血症可能对未来疾病的发生发展产生影响。早期运动干预对循环中内毒素水平无明显影响，也从侧面说明高脂饮食所带来的危害并不能单纯通过运动来控制，合理膳食对于青少年健康尤其重要。