药物代谢酶基因多态性与白血病治疗反应及预后相关性的研究新进展

药物代谢酶参与许多常见化学致癌物和药物的代谢活化或解毒过程。由于存在基因多态性,药物代谢酶活性具有个体及种族差异。有关药物代谢酶基因多态性对白血病治疗反应及预后影响的研究,目前正日益吸引越来越多人的关注。从分子水平研究基因的多态性与药物治疗效应多样性之间的关系,研究不同个体的基因多态性对药物治疗效应以及预后的影响,以此在治疗前可以提前预测疗效和预后,并指导合理用药。本文选择有关药物代谢酶基因多态性与白血病药物治疗反应及预后有关的最近主要研究文献进行综述。

氟喹诺酮类药物对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响

目的比较4种氟喹诺酮类药物[左氧氟沙星(LVFX)、加替沙星(GTFX)、莫西沙星(MXFX)、帕珠沙星(PZFX)]对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系的影响。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、LVFX组(LV组)、GTFX组(GT组)、MXFX组(MX组)、PZFX组(PZ组),每组6只,给药方案为120mg/(kg.d),尾静脉注射给药,连续7d。末次给药后24h处死动物,差速离心法制备肝微粒体混悬液,Lowry法测定肝微粒体蛋白浓度,分光光度法检测肝微粒体CYP450酶系的含量及活性,并采用单因素方差分析进行统计。结果与空白对照组比较,MX组和GT组大鼠肝重明显降低(P<0.01,P<0.05),LV组、GT组和MX组大鼠肝微粒体蛋白浓度明显增加(P<0.01),LV组和GT组CYP450含量增加(P<0.05,P<0.01),GT组细胞色素b5(Cytb5)含量增加(P<0.05)。肝微粒体NADPH-CytC还原酶活性测定结果显示,给药组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。氨基吡啉-N-脱甲基酶活性测定结果显示,LV组、GT组和MX组酶活性与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。红霉素-N-脱甲基酶活性测定结果显示,与空白对照组比较,GT组酶活性降低,MX组酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠肝微粒体CYP450酶系亚家族活性检测结果显示,与空白对照组比较,LV组、MX组和PZ组7-苄基香豆素脱烃酶(BROD)活性升高(P<0.01),GT组7-甲氧基香豆素脱烃酶(MROD)活性降低(P<0.05)、7-苯基香豆素脱烃酶(PROD)活性增加,PZ组PROD活性降低(P<0.01),4种药物均可使乙氧基香豆素脱烃酶(EROD)活性增加(P<0.01)。结论 4种氟喹诺酮类药物对CYP450酶系均有肯定作用,对不同的酶其作用效果不同,从影响范围来看,GTFX、MXFX、LVFX和PZFX的作用依次减小。

冷冻复苏对大鼠肝细胞代谢活性的影响

目的研究冷冻复苏对肝细胞代谢活性及细胞色素P450(CYP)mRNA表达调控的的影响,为冷冻复苏肝细胞用于实验研究提供依据。方法采用程序冷冻降温仪冷冻新鲜分离的大鼠肝细胞,1个月后复苏。实时荧光定量PCR法检测细胞CYP1A2,CYP2B1和CYP3A1 mRNA的表达;高压液相色谱-串联质谱法检测细胞内咪达唑仑α-羟基化、双氯芬酸4-羟基化和右美沙芬去甲基化的代谢产物生成量。结果肝细胞冷冻复苏后存活率与新鲜细胞无明显差异,显微镜下可见细胞贴壁并连成片状,细胞核圆而亮。冷冻复苏肝细胞中CYP1A2和CYP2B1 mRNA的诱导表达与新鲜细胞无明显差异,CYP3A1 mRNA无明显表达。与新鲜细胞相比,咪达唑仑α-羟基化代谢产物水平无明显差异;双氯芬酸4-羟基化产物约为1/2;右美沙芬去甲基化产物则增加了1倍。结论冷冻复苏对肝细胞的代谢活性有一定的影响。在药物代谢研究中须考虑冷冻复苏因素对肝细胞代谢活性的影响,以助于对实验结果做出客观和恰当的判断。

汉族人群药物代谢酶基因多态性位点基因型分布频率的研究

目的了解汉族人群7种主要药物代谢酶基因14个多态性位点基因型的分布频率及其特征。方法收集1382名汉族人外周血样品，常规提取基因组DNA。用PCR-限制性内切酶片段长度多态性方法检测细胞色素P450酶（CYP450）的CYP3A4＊1B、CYP3A5＊3、苯醌氧化还原酶1（NQ01）的C609T（NQO1C609T）、髓过氧化物酶（MPO）的G463A（MPOG463A）、5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）的C677T（MTHFRC677T）、A1298C（MTHFRA1298C）、N-乙酰基转移酶2（NAT2）的NAT2＊5AC481T、NAT2＊6AG590A、NAT2＊7AC857A和巯基嘌呤-S-甲基转移酶（TPMT）的TPMT＊3BG460A、TPMT＊3C4719G多态性位点基因型，用多重PCR方法检测谷胱甘肽硫转移酶（GST）的GSTM1、GSTT1基因型，用等位基因特异性PCR（AS—PCR）检测TPMT＊2G238C基因型。结果野生、杂合变异和纯合变异基因型频率CYP3A4＊1B分别为99．8％、0．2％和0，CYP3A5＊3为8．4％、34．3％和57．3％；NQO1C609T为28．7％、49．7％和21．6％；MPOC463A为75．0％、23．2％和1．8％；MTHFRC677T为25．9％、44．9％和29．2％，MTHFRA1298C为67．3％、30．4％和2．3％；TPMT＊3CA719G为96．8％、3．2％和0。表达型和缺失型基因型频率GSTM1分别为36．1％和63．9％，GSTT1分别为54．4％和45．6％。NAT2＊4／＊4、＊4／＊5、＊4／＊6、＊4／＊7、＊5／＊5、＊5／＊6、＊5／＊7、＊6／＊6、＊6／＊7和＊7／＊7基因型频率分别为34．5％、4．3％、24．3％、18．2％、0．1％、1．8％、1．5％、5．0％、7．6％和2．6％，NAT2＊4、＊5、＊6和＊7等位基因频率分别为57．9％、3．9％、21．8％和16．3％，快乙酰化和慢乙酰化基因表型频率分别为81．4％和18．6％。TPMT＊2G238C和TPMT＊3BG460A野生基因型频率均为100％。结论药物代谢酶基因常见的遗传多态性在中国汉族人群中的分布及其频率与白种人和黑种人存在明显差异，与亚洲其他黄种人也存在一定的差异。

复合氨基酸缓解顺铂治疗肺癌患者肾毒性临床观察

目的观察9复合氨基酸(9-AA)缓解非小细胞肺癌(NSCLC)患者含顺铂(DDP)方案化疗肾毒性的疗效。方法60例肾功能正常的NSCLC化疗患者随机分为治疗组与对照组,动态检测血肌酐(sCr)、尿素氮(BUN)、肌酐清除率(cCr)、尿比重(uSG)以及尿酸碱度(upH),并对比它们在不同时间点的变化。结果两组BUN、sCr、uSG均随时间递增,以第三周期后最高,差异有统计学意义(P<0.05);cCr和upH值则随时间递减差异有统计学意义(P<0.01);处理因素及其与时间因素的交互作用对cCr及uSG的影响有统计学意义(P<0.01)。结论9-AA对DDP治疗NSCLC患者肾毒性有较好缓解作用。

急性有机磷农药中毒的救治进展

急性有机磷农药中毒是临床常见病,有机磷能够通过抑制神经肌肉接头处的乙酰胆碱释放而引起肌肉麻痹,从而引起相应的临床症状。清除毒物、应用特效解毒药物、及时处理并发症等是主要的治疗措施。本文简要综述了有机磷中毒的救治进展。

都匀毛尖对小鼠肝脏CYP3A酶活性及其mRNA水平的影响

目的:研究绿茶对细胞色素P450 3A(CYP3A)酶活性及其mRNA水平的影响,推测绿茶对药物代谢的作用。方法:绿茶选用都匀毛尖,120只昆明种雄性小鼠随机分为4组,对照组正常饮食饮水,低、中、高剂量绿茶组分别予0.25 g/(kg·d)、0.5 g/(kg·d)、1.0 g/(kg·d)都匀毛尖茶汤灌胃,分别在1周、2周、3周时处死小鼠,测定小鼠肝脏微粒体CYP3A的活性,并用RT-PCR技术检测小鼠肝脏中CYP3A11 mRNA水平。结果:都匀毛尖能抑制CYP3A酶活性,呈时间-剂量依赖性;都匀毛尖可抑制CYP3A11mRNA表达,且呈时间-剂量依赖性。结论:都匀毛尖对CYP3A的酶活性及mRNA水平均呈时间-剂量依赖性抑制作用,提示都匀毛尖可能通过影响CYP3A酶活性对药物的代谢发挥作用。

碱化丁卡因溶液尿道粘膜表面麻醉的临床观察和药代动力学研究

１６例接受膀胱镜检的患者分为临床碱化组和临床对照组；将２０只家兔匀分为动物碱化组和动物对照组。碱化组均给予ｐＨ７．１５的１％丁卡因溶液，对照组给予ｐＨ５．１的１％丁卡因溶液。结果，临床碱化组麻醉效果优于临床对照组（Ｐ＜０．０５）。但临床对照组药液在血液中达峰时间（Ｔｐｅａｋ）快；峰浓度（Ｃｍａｘ）及血药浓度的各个时点均高于临床碱化组（Ｐ均＜０．０１）。两组中分布半衰期，消除半衰期无显著性差异。表现分布容积（Ｖｄ），药时曲线下面积（ＡＵＣ）和清除率（ＣＬ）有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）。动物碱化组丁卡因在血中浓度低，而在膀胱组织中浓度高（Ｐ均＜０．０１）。认为碱化丁卡因具有效果好，毒性低和清除快的优点，用于临床尿道粘膜表面麻醉安全有效。

纳米银用于Ⅱ度烧伤创面的疗效及安全性评价

目的观察纳米银应用于Ⅱ度烧伤创面的感染防治、创面愈合作用及安全性。方法将6％～10％Ⅱ度（深、浅）烧伤创面患者按随机表方法分为试验组（纳米银敷料组）和对照组（质量分数为1％磺胺嘧啶银霜组），每组35例，按分组在5％TBSA上进行相应处理，创面敷料及用药每天更换1次，连续使用7d后，同其他剩余创面一样，采用10g／L碘伏纱布常规换药处理。两组分别在创面换药前后进行创面细菌培养，观察创面愈合时间；换药前和换药后的1，7，14d采集血和24h尿标本，采用电感耦合等离子体质谱测定血清银离子和24h尿平均银离子水平；测定患者第7，14天的肝、肾功能。结果试验组治疗后细菌培养阳性率（3％）与对照组（3％）相近，均较治疗前（12％、19％）下降，但差异无统计学意义。试验组的浅Ⅱ度创面愈合时间（9．18±1．9）d比对照组（12．9±1．3）d提前3d多，差异有统计学意义（P〈0．01）。两组患者创面使用银制剂前血银离子水平为（1．55±1．26）μg/L和（1．54±1．28）μg／L，24h尿排银量为（1．67±1．05）Ixg和（1．87±1．37）μg，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）；使用银制剂均能造成血中银离子水平蓄积性升高（P〈0．01），但试验组血清离子水平明显低于对照组（P〈0．01）；24h尿的平均银离子水平及24h尿银排出量跟血清中银离子水平呈相同规律的变化。两组少数患者的血清ALT出现无明显规律的异常变化，肾功能正常。结论对烧伤Ⅱ度创面来讲，纳米银较磺胺嘧啶银更能提前其愈合时间；从银代谢安全性角度来看也有较大的提高，是一种比较理想的烧伤创面用药。

不同价态染砷大鼠肝脏MRP2表达水平与砷甲基化产物关联性

目的分析亚砷酸钠（iAs3＋）和砷酸氢钠（iAs5＋）染毒后，对大鼠多药耐药相关蛋白2（MRP2）表达的影响，及其与肝脏砷及甲基化产物的关联性，寻找不同价态砷体内代谢转运间的差异，为进一步阐明砷毒作用机制提供依据。方法70只Wistar大鼠分成7组，第l组为正常对照组，给予饮用去离子水；第2—4组为染毒iAs3＋高、中、低剂量组，分别给予20．0、6．7、2．2mg／kg体质量亚砷酸钠溶液；第5—7组为染毒iAs5＋高、中、低剂量组，分别给予20．0、6．7、2．2mg／kg体质量砷酸氢钠溶液。各组大鼠于染毒90d后处死，取肝脏组织，用蛋白印迹法（Western—blotting）测定MRP2表达的变化。采用高效液相一氢化物发生原子荧光光谱分析法（HPLC—HGAFS）分析各组肝脏中砷及甲基化产物含量，并运用Pearson相关法分析MRP2表达与砷及甲基化产物的相关性。结果对照组、iAs3＋和iAs5＋高、中、低剂量组MRP2蛋白表达分别为1．21±0．13、1．85±0．09、1．65±0．19、1．61±0．18、1．69±0．04、1．42±0．19、1．27±0．10，iAs3＋的高、中、低剂量组和iAs0‘高、中剂量组MRP2蛋白表达均高于对照组（P均〈0．05）；相同受试物比较，iAs3＋和iAs5＋的高剂量组MRP2蛋白表达均高于低剂量组（P均〈0．05）；不同受试物同一剂量组比较，iAs“高、中、低剂量组的MRP2蛋白表达均强于iAs5＋高、中、低剂量组（P均〈0．05）。同时，iAs3＋染毒组肝脏中MRP2蛋白表达量与iAs3＋和砷甲基化代谢产物MMA和DMA的含量均呈正相关关系（r值分别为0．575、0．678、0．395，P均〈0．05）；iAs5＋染毒组肝脏中MRP2表达量与MMA和DMA的含量均呈正相关关系（r值分别为0．593、0．643，P均〈0．05），与iAs3＋的含量无相关关系（P〉0．05）。结论随着砷染毒剂量的增加，MRP2表达逐渐上调，从而致使肝细胞膜上MRP2表达代偿性改变。MRP2外排通路可能在iAs3＋代谢径路中发挥重要作用。肝脏MRP2与不同价态砷甲基化产物的负荷或水平密切相关。