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伊短菌素A标品的制备及HPLC定量分析
被引量:
2
1
作者
张翠央
杜杰
+6 位作者
陈武
龙青山
唐滢
黄军
雷平
郭照辉
刘清术
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期1070-1076,共7页
目的制备伊短菌素A标品并建立其定量分析方法。方法发酵液经过预处理后,采用阳离子吸附树脂富集和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,制备得到伊短菌素A。通过质谱、核磁共振谱等确证化学结构,高效液相色谱法测定样品纯度。定量分析方...
目的制备伊短菌素A标品并建立其定量分析方法。方法发酵液经过预处理后,采用阳离子吸附树脂富集和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,制备得到伊短菌素A。通过质谱、核磁共振谱等确证化学结构,高效液相色谱法测定样品纯度。定量分析方法采用XAqua C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:0.1%TFA水溶液-甲醇(90:10,V/V);流速:1 mL/min,检测波长:272 nm,柱温:35℃,进样量:20μL。结果制备了高纯度的伊短菌素A标品。优化定量条件下伊短菌素A在15~1200 mg/L范围内浓度与峰面积线性关系良好;加标回收率在92.61%~107.33%;测定峰面积的相对标准偏差为0.163566%(n=6),<1.0%;检测限和定量限分别为16.74 ng和55.79 ng。结论本文所建立的制备方法操作简单,易放大生产。定量方法简单快速,准确度和重现性良好。适用于伊短菌素A的定量分析。
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关键词
伊短菌素a
短
短
芽胞杆菌
高效液相分析法
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职称材料
Brevibacillus brevis B011次级代谢物中抗青枯菌活性物质的纯化鉴定及生物合成基因簇分析
被引量:
2
2
作者
周向平
陈武
+5 位作者
刘天波
王运生
王凯歌
刘峰
李小慧
袁志辉
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期927-935,共9页
青枯病是世界上最为严重的植物细菌性病害之一,生物防治是防控其危害的热点研究领域,而分泌抑菌活性物质被认为是生防菌抑制病原菌的主要作用机制。本研究在前期筛选到对青枯菌有良好拮抗活性的短短芽孢杆菌B011(Brevibacillus brevis B...
青枯病是世界上最为严重的植物细菌性病害之一,生物防治是防控其危害的热点研究领域,而分泌抑菌活性物质被认为是生防菌抑制病原菌的主要作用机制。本研究在前期筛选到对青枯菌有良好拮抗活性的短短芽孢杆菌B011(Brevibacillus brevis B011)基础上,采用色谱法分离纯化到抗青枯菌的主要活性物质,通过串联质谱和核磁波谱分析方法鉴定了其结构,并根据B011菌株全基因组序列,预测了活性化合物生物合成相关基因及其合成途径。结果表明,B.brevis B011次生代谢物中抑制青枯菌的主效活性物质为伊短菌素A(edeine A),次效活性物质为N-乙酰基色胺[N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)acetamide]。这两种化合物对青枯菌的抑制活性为首次报道。基因簇预测结果表明,B011菌株基因组中存在完整的edeine合成基因簇,共包括17个基因,即edeA~edeQ,且基因簇中的基因结构完整,基因序列高度保守。B011基因组中有多个N-乙酰基色胺的生物合成相关基因,包括17个脱羧酶编码基因和54个乙酰转移酶编码基因,可能分别参与色氨酸脱羧反应和色胺的乙酰基转移反应,但具体由哪些基因参与还需进一步的研究。研究结果可为该生防菌的应用提供理论指导,也可为后续解析其生物合成途径及通过合成生物学方法进行定向改造奠定基础。
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关键词
短
短
芽孢杆菌
伊短菌素a
N-乙酰基色胺
生物合成基因簇
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职称材料
题名
伊短菌素A标品的制备及HPLC定量分析
被引量:
2
1
作者
张翠央
杜杰
陈武
龙青山
唐滢
黄军
雷平
郭照辉
刘清术
机构
湖南省微生物研究院
湖南省农用微生物应用工程技术研究中心
湖南农业大学植物保护学院
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期1070-1076,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.31772216和No.32000047)
湖南省自然科学基金项目(No.2019JJ40169和No.2019JJ40119)。
文摘
目的制备伊短菌素A标品并建立其定量分析方法。方法发酵液经过预处理后,采用阳离子吸附树脂富集和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,制备得到伊短菌素A。通过质谱、核磁共振谱等确证化学结构,高效液相色谱法测定样品纯度。定量分析方法采用XAqua C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:0.1%TFA水溶液-甲醇(90:10,V/V);流速:1 mL/min,检测波长:272 nm,柱温:35℃,进样量:20μL。结果制备了高纯度的伊短菌素A标品。优化定量条件下伊短菌素A在15~1200 mg/L范围内浓度与峰面积线性关系良好;加标回收率在92.61%~107.33%;测定峰面积的相对标准偏差为0.163566%(n=6),<1.0%;检测限和定量限分别为16.74 ng和55.79 ng。结论本文所建立的制备方法操作简单,易放大生产。定量方法简单快速,准确度和重现性良好。适用于伊短菌素A的定量分析。
关键词
伊短菌素a
短
短
芽胞杆菌
高效液相分析法
Keywords
Edeine A
Brevibacillus brevis
High performance liquid analysis
分类号
R978.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
Brevibacillus brevis B011次级代谢物中抗青枯菌活性物质的纯化鉴定及生物合成基因簇分析
被引量:
2
2
作者
周向平
陈武
刘天波
王运生
王凯歌
刘峰
李小慧
袁志辉
机构
湖南省烟草公司永州市公司
湖南农业大学植物保护学院
湖南省烟草科学研究所
湖南科技学院化学与生物工程学院
湖南省银杏工程技术研究中心
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期927-935,共9页
基金
湖南省教育厅科学研究项目重点项目(21A0519)
湖南省重点研发计划项目(2022NK2050)
湖南省烟草公司永州市公司科技项目(YZ2022KJ04)。
文摘
青枯病是世界上最为严重的植物细菌性病害之一,生物防治是防控其危害的热点研究领域,而分泌抑菌活性物质被认为是生防菌抑制病原菌的主要作用机制。本研究在前期筛选到对青枯菌有良好拮抗活性的短短芽孢杆菌B011(Brevibacillus brevis B011)基础上,采用色谱法分离纯化到抗青枯菌的主要活性物质,通过串联质谱和核磁波谱分析方法鉴定了其结构,并根据B011菌株全基因组序列,预测了活性化合物生物合成相关基因及其合成途径。结果表明,B.brevis B011次生代谢物中抑制青枯菌的主效活性物质为伊短菌素A(edeine A),次效活性物质为N-乙酰基色胺[N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)acetamide]。这两种化合物对青枯菌的抑制活性为首次报道。基因簇预测结果表明,B011菌株基因组中存在完整的edeine合成基因簇,共包括17个基因,即edeA~edeQ,且基因簇中的基因结构完整,基因序列高度保守。B011基因组中有多个N-乙酰基色胺的生物合成相关基因,包括17个脱羧酶编码基因和54个乙酰转移酶编码基因,可能分别参与色氨酸脱羧反应和色胺的乙酰基转移反应,但具体由哪些基因参与还需进一步的研究。研究结果可为该生防菌的应用提供理论指导,也可为后续解析其生物合成途径及通过合成生物学方法进行定向改造奠定基础。
关键词
短
短
芽孢杆菌
伊短菌素a
N-乙酰基色胺
生物合成基因簇
Keywords
Brevibacillus brevis
edeine A
N-acetyltryptamine
biosynthesis gene cluster
分类号
S432 [农业科学—植物病理学]
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
伊短菌素A标品的制备及HPLC定量分析
张翠央
杜杰
陈武
龙青山
唐滢
黄军
雷平
郭照辉
刘清术
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
下载PDF
职称材料
2
Brevibacillus brevis B011次级代谢物中抗青枯菌活性物质的纯化鉴定及生物合成基因簇分析
周向平
陈武
刘天波
王运生
王凯歌
刘峰
李小慧
袁志辉
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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