伊维菌素微乳制剂的家兔刺激性试验

白兔背部分区进行脱毛处理,将伊维菌素微乳制剂一次性涂抹于暴露的皮肤,观察皮肤接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出等局部反应,评价药物对家兔皮肤的刺激性。同时将受试物滴于家兔眼结膜囊内,观察虹膜、角膜和结膜是否出现浑浊、充血、水肿等局部反应,评价药物对家兔眼睛的刺激性。结果表明,伊维菌素微乳制剂未引起白兔皮肤明显的充血、红肿;同时对兔子的结膜、虹膜和角膜也没有刺激性。因此该制剂对白兔的皮肤和眼睛的刺激程度为无刺激。本试验为伊维菌素微乳制剂的安全性评价提供了试验依据。

伊维菌素微乳无菌检查方法学的研究

本试验旨在对伊维菌素微乳制剂进行无菌检查方法学验证和无菌检查试验,确认本试验所用的方法适用于该制剂的无菌检查。按《中国兽药典》2005版一部(附录118)所载"无菌检查法"项下进行试验,通过对阳性对照菌、不同量冲洗液等条件的选择,采用薄膜过滤法对10瓶供试品(每种试验菌的样品量)进行检测,建立了无菌检查方法。经方法验证,用400mL 0.1%蛋白胨水溶液冲洗后,含供试品容器中的7个阳性菌试验组与阳性菌对照组相比均生长良好,说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计,可以用该方法进行供试品的无菌检查。对3批供试品进行无菌检查,阳性对照菌均在24h内生长良好,阴性对照均澄清,无菌生长,3批供试品均澄清,无菌生长,无菌检查试验结果符合规定。

伊维菌素微乳中伊维菌素的含量测定方法研究

为建立伊维菌素微乳中伊维菌素含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,选用Hypersil ODS2(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相为甲醇∶乙腈∶水为35∶60∶5(V/V/V),检测波长为244nm,柱温为30℃,流速为1mL/min进行测定。结果显示,伊维菌素在该色谱条件下,系统适应性良好,在80~320μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程为:Y=22 700X+2 510,R^2=0.9998,总平均回收率为101.90%±2.94%,RSD为2.88%,对中试生产的3批伊维菌素微乳进行含量测定,RSD为1.86%。表明该含量测定方法准确可靠,重现性好,可用于伊维菌素微乳中伊维菌素含量的测定,并为该新型制剂的质量标准的制定和质量评价提供依据,也为后期的临床安全应用提供可靠的参考。

伊维菌素微乳制剂的过敏性研究

本试验旨在观察伊维菌素微乳制剂对动物的过敏性反应。以《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导,选用豚鼠及Wistar大鼠为试验动物,采用全身主动过敏试验和被动皮肤过敏试验观察伊维菌素微乳制剂对动物的致敏作用。结果显示伊维菌素微乳制剂对豚鼠和Wistar大鼠的过敏性反应均为阴性。本试验为伊维菌素微乳制剂的安全性评价提供了试验依据。

HPLC法测定微乳中伊维菌素的含量

建立了HPLC测定伊维菌素微乳中伊维菌素含量的方法。色谱柱为ZirchromC18（4.6mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇∶水（85∶15）,测定波长为245 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃。伊维菌素与辅料及溶剂峰分离良好,在2.22～111.0μg/mL时线性关系良好（R^2=0.999 9）。HPLC测定伊维菌素方法便捷、准确、重复性好,可用于伊维菌素微乳含量的测定。

伊维菌素微乳制剂的溶血性试验

为了观察新型兽药制剂伊维菌素微乳是否具有溶血和红细胞凝聚等反应,试验以《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导,取兔血,采用常规体外试管法,观察伊维菌素微乳制剂是否出现溶血现象。结果表明:伊维菌素微乳制剂未出现溶血和红细胞凝聚现象,可供注射使用。说明伊维菌素微乳制剂无溶血性,安全可靠。