液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伏立康唑和伏立康唑氮氧化物浓度及其临床应用

目的建立同时测定人血浆中伏立康唑和伏立康唑氮氧化物浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,并应用于临床伏立康唑的治疗监测。方法酮康唑为内标,经甲醇沉淀蛋白后进行LC-MS/MS分析。电喷雾离子源,正离子模式监测,检测离子伏立康唑m/z350.1→m/z127.0,伏立康唑氮氧化物m/z366.1→m/z224.0,酮康唑(内标)m/z531.0→m/z82.1;色谱柱为Inertsil ODS-3(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相为甲醇∶10 mmol/L乙酸铵溶液(90∶10)。运用本法对本院23例患者进行伏立康唑和伏立康唑氮氧化物血药浓度测定。结果伏立康唑和伏立康唑氮氧化物在0.4~10.0μg/mL浓度范围内线性良好(r>0.999),最低定量限为0.4μg/mL。批内、批间精密度及基质效应RSD均小于15%。样本储存和处理过程中,化合物稳定良好。23例患者伏立康唑稳态谷浓度为0.4~14.3μg/mL,伏立康唑氮氧化物稳态谷浓度为0.5~7.2μg/mL,个体间差异较大。结论本文建立的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可应用于临床治疗药物监测。

高效液相色谱法测定肾移植病人泼尼松龙、伏立康唑及其氮氧化物浓度

目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱法测定病人血浆泼尼松龙、伏立康唑及其代谢物伏立康唑氮氧化物的浓度。方法色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse XDB C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈∶水(27∶73~60∶40)梯度洗脱;流速为1.0mL/min;波长为244 nm;柱温为30℃。收集2019年9月至2020年3月在安徽医科大学第一附属医院接受伏立康唑治疗的肾移植病人24例,检测24例肾移植病人血药浓度,男14例、女10例。结果 泼尼松龙、伏立康唑及其氮氧化物色谱峰分离良好。泼尼松龙在3.13~100.00μg/L范围内线性关系良好,r=0.993 1;伏立康唑在0.16~20.00 mg/L范围内线性关系良好,r=0.999 8;伏立康唑氮氧化物在0.16~10.00 mg/L范围内线性关系良好,r=0.997 3。三种化合物日内及日间RSD在1.93%~6.74%,绝对回收率在65.48%~86.68%。24例病人泼尼松龙浓度在7.75~72.75μg/L,伏立康唑浓度在0.17~5.44 mg/L,伏立康唑氮氧化物浓度在0.66~3.06 mg/L,个体差异较大。结论 该方法专属性强、灵敏度高,适合泼尼松龙、伏立康唑、伏立康唑氮氧化物血浆浓度的测定。

伏立康唑及其代谢产物浓度监测在异基因造血干细胞移植患者中的应用研究

目的:探索移植后植入前(即移植后+1至+30 d)伏立康唑(voriconazole,VRCZ)及其代谢产物氮氧化物(voriconazole N-oxide,VNO)浓度监测在VRCZ用于异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)患者防治真菌感染疗效和安全性中的应用价值。方法:分析VRCZ、VNO浓度及MR(CVNO/CVRCZ)的影响因素及在VRCZ防治真菌感染和发生肝肾损伤中的差异,并采用受试者工作特征曲线(ROC)对其进行分析(将曲线上约登指数最大一点对应值设定为临界值),确证其临界值。结果:影响VRCZ浓度(CVRCZ)、VNO浓度(CVNO)和MR的因素为:患者体重、VRCZ每日给药量及移植类型等(均P<0.05)。有效组CVRCZ和CVNO均明显高于无效组(P<0.001),MR则相反(P<0.001);肝、肾功能损伤组MR均明显低于正常组(P<0.05)。ROC显示,CVRCZ、CVNO和MR预测allo-HSCT患者移植后植入前VRCZ防治侵袭性真菌感染的临界值分别为0.95μg/ml、1.35μg/ml、1.645(AUC分别为0.9677、0.7634、0.9564)。CVRCZ和MR可以辅助提示患者肝[其临界值分别为0.65μg/ml、1.96(AUC分别为0.5971、0.6663)]、肾损伤[其临界值分别为0.95μg/ml、1.705(AUC分别为0.6039、0.6164)]。结论:同时监测VRCZ、VNO浓度及MR对预测allo-HSCT患者移植后植入前VRCZ防治侵袭性真菌感染具有重要价值,CVRCZ预测有效的准确性高于MR及CVNO;CVRCZ升高、MR降低会增加肝肾损伤的发生风险。

成人患者体内伏立康唑代谢的影响因素分析

目的分析影响成人患者体内伏立康唑代谢的因素,为伏立康唑的临床合理应用提供参考。方法回顾性分析2021年4月-2022年3月我院使用伏立康唑并进行治疗药物监测的103例成人患者资料,同时测定血浆伏立康唑谷浓度(c0)、伏立康唑氮氧化物浓度(cN),并计算c0/cN值;采用Pearson’s相关性分析影响伏立康唑c0、c0/cN值的因素;采用多元线性回归模型分析伏立康唑c0、c0/cN值的独立影响因素。结果患者基础疾病以肺炎、肾脏疾病和白血病为主;感染真菌中以曲霉菌、念珠菌和酵母样真菌为主;给药方式主要为静脉滴注,以联用质子泵抑制剂患者最多。C反应蛋白(CRP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)水平与伏立康唑c0均呈正相关,血小板计数和白蛋白水平与伏立康唑c0均呈负相关;CRP、TBIL、DBIL水平与c0/cN值均呈正相关,白蛋白水平与c0/cN值呈负相关。多元线性回归模型分析结果显示,伏立康唑c0的独立影响因素有CRP、IBIL、伏立康唑给药方式和给药剂量,伏立康唑c0/cN的独立影响因素有CRP、DBIL和年龄。结论CRP、IBIL、伏立康唑给药方式和给药剂量是影响伏立康唑c0的独立因素,CRP、DBIL和年龄是影响c0/cN值的独立因素;临床使用伏立康唑时,应考虑上述指标对伏立康唑代谢的影响,合理调整伏立康唑的给药方式和剂量。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中伏立康唑及其氮氧化代谢物浓度

目的:建立快速测定人血浆中伏立康唑及其主要代谢物伏立康唑-N-氮氧化物浓度的HPLC-MS/MS方法,用于人体药代动力学研究。方法:以伏立康唑和伏立康唑-N-氮氧化物的D3同位素为内标,血浆样品经蛋白沉淀后,用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)和API 4000质谱仪进行正离子模式电喷雾离子化分析。流速为0.6 mL·min^-1,以甲醇为有机相,0.1%甲酸为水相,按一定程序进行梯度洗脱。结果:伏立康唑和伏立康唑-N-氮氧化物在10.00~8000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,该方法的特异性、批内/批间精密度、准确度、介质效应、提取回收率、稳定性和稀释可靠性符合相关要求。结论:建立了一种准确、简便、可靠的HPLC-MS/MS分析方法,成功应用于健康中国人静脉注射4 mg·kg^-1伏立康唑后的药代动力学研究。

用HPLC-MS/MS法考察两种伏立康唑注射剂在大鼠体内的药动学及组织分布情况

目的:建立测定Wistar大鼠血浆中伏立康唑浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),考察两种伏立康唑注射剂及其代谢物伏立康唑氮氧化物在大鼠体内的药动学及组织分布。方法:把大鼠随机分为两组,从尾静脉分别注射国产和进口的伏立康唑注射剂,于不同时间点取血或脏器,采用HPLC-MS/MS法测定其浓度,流动相为乙腈-0.2%乙酸水溶液(内含20mmol/L乙酸铵)=80∶20(V/V),流速为0.5ml/min,以氟康唑为内标,采用多反应监测(MRM)方式检测伏立康唑和伏立康唑氮氧化物。检测离子对:伏立康唑m/z350.2→281.0,伏立康唑氮氧化物m/z366.1→224.0,内标氟康唑m/z307.1→220.1。采用PhoenixWinNolin64数据处理软件的非房室模型,以统计矩法比较伏立康唑及代谢物伏立康唑氮氧化物在心脏、肝脏、脑组织、肺、脾脏、肾脏中的组织分布。结果:伏立康唑及其氮氧化物的浓度与峰面积线性良好,精密度、重复性、稳定性良好。国产和进口伏立康唑注射剂中伏立康唑的血浆AUC0~24h分别为(244.4±25.1)、(207.1±19.1)μg·h·ml^-1;伏立康唑氮氧化物的血浆AUC0~24h分别为(60.5±8.6)、(61.3±5.8)μg·h·ml^-1。国产和进口制剂中伏产康唑和伏立康唑氮氧化物在各组织的AUC0~24h无显著性差异。结论:该方法简单快速,灵敏度高,可用于伏立康唑的体内过程研究。大鼠单剂量静脉注射国产和进口伏立康唑注射剂后,伏立康唑和伏立康唑氮氧化物在大鼠体内的主要药动学参数无显著性差异,在各组织的总体暴露未见显著性差异。

HPLC法测定人血浆中伏立康唑及其代谢物的浓度

目的建立一种快速、灵敏、准确、稳定的测定人血浆中伏立康唑及其代谢物浓度的方法,用于伏立康唑临床治疗药物监测。方法采用高效液相色谱(HPLC)-紫外(UV)检测法,以罂粟碱为内标,乙腈蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱为ACE5C_(18)-AR (150 mm×4.6 mm),流动相为0.025 mol/L磷酸二氢钠(含三乙胺400μl/L,用0.25 mol/L的氢氧化钠调至pH=7.0)-乙腈(67∶33),流速为l ml/min,柱温为40℃,检测波长为255、276 nm(双波长检测),进样量为20μl。结果伏立康唑氮氧化物、伏立康唑和罂粟碱的保留时间分别为4.5、11.3、13.7 min;血浆中伏立康唑、伏立康唑氮氧化物线性范围均为0.5～20.0μg/ml(r=0.999 5),定量下限均为0.5μg/ml,批内、批间RSD均<11%,定量下限、低、中、高梯度浓度提取回收率在90.3%～109.9%之间。结论该方法操作简便,结果准确,适用于伏立康唑的临床治疗药物监测和对其主要代谢物的测定。