伏马菌素B2人工抗原的制备研究

为制备伏马菌素B2人工抗原,通过戊二醛法和碳二亚胺法将伏马菌素B2偶联到载体蛋白上,人工抗原免疫BALB/c小鼠后,酶联免疫吸附法测定抗血清的效价,竞争酶联免疫吸附法测定人工抗原的免疫原性。通过氨基化和羧基化的苏丹红作为内参,紫外可见光谱扫描图谱鉴定伏马菌素B2成功偶联到载体蛋白上,免疫原性鉴定证明,碳二亚胺法制备的人工抗原可刺激BALB/c小鼠产生抗伏马菌素B2的抗体。

硅胶柱层析分离制备阿维菌素B_2的效果

通过比较不同种类的层析柱分离AvmB2 ,以硅胶柱分离效果最好。不同洗脱液、不同比例及不同样品量比较结果表明 ,以石油醚∶异丙醇 =7∶1、硅胶柱容量 4 0 0 g、加样量 12mL(Avm油状物 )为最适层析柱分离B2 的条件。

CO_2激光去痣术后创面外用复方多粘菌素B软膏的疗效观察

目的:观察复方多粘菌素B软膏应用于CO2激光去痣术后创面的疗效。方法:选择笔者科室就诊的111名采用CO2激光治疗色素痣的患者,随机分为两组。治疗组外用复方多粘菌素B软膏,每日2次;对照组外用红霉素眼膏,每日2次,疗程为1周,随访3个月。结果:治疗组术后疼痛、创面感染发生率明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组术后瘢痕、色素残留发生率明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CO2激光去痣术后应用复方多粘菌素B软膏疗效肯定、安全。

曲古菌素A对去乙酰化酶2在子宫内膜癌细胞株HEC-1B中表达的影响

目的研究曲古菌素A(TSA)对子宫内膜癌细胞株HEC-1B中去乙酰化酶2(HDAC2)和p53表达的影响,及TSA对HEC-1B增殖的抑制作用,探讨TSA诱导HEC-1B细胞增殖抑制的机制。方法用不同浓度的TSA(100、200、400nmol/L)分组培养HEC-1B细胞(0、24、48、72h),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度、不同时间的TSA作用后子宫内膜癌HEC-1B细胞的增殖率。应用Western Blot以及RT-PCR方法检测HDAC2和p53的表达水平,研究TSA对其表达的影响。结果TSA对HEC-1B细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈时间依赖性(P<0.01)。HDAC2在该细胞中的表达随TSA的剂量和时间呈减弱趋势,而p53的表达呈升高趋势。结论TSA具有去乙酰化酶抑制剂作用,抑制HDAC2的表达并促进肿瘤抑制因子p53的活化与表达,能够抑制子宫内膜癌细胞的增殖。

5-羟色胺通过上调2B受体抑制放线菌素D诱导肝细胞凋亡初步实验研究

目的探讨5-羟色胺(5-HT)在肝细胞凋亡中的作用及机制。方法以不同浓度梯度放线菌素D(AcD)分别诱导HepG2和7702细胞凋亡,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术和TUNEL方法检测细胞凋亡,MTT法检测细胞存活率。AcD预处理HepG2细胞后分别加入5-HT、5-HT 2A受体激动剂DOI、5-HT 2B受体激动剂M110、5-HT 2B受体拮抗剂SB204+5-HT,AnnexinV-FITC/PI流式细胞术和MTT法分别检测细胞凋亡率和存活率,蛋白质印迹法检测蛋白水解酶3(caspase3)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)的表达。结果AcD以浓度依赖性方式分别诱导HepG2细胞和7702细胞的凋亡,50 ng/mL AcD处理两种细胞凋亡率均高于无血清对照组(HePG2细胞t=1.71,7702细胞t=1.98,均P<0.05),与单用AcD组相比,5-HT使HepG2细胞凋亡率从31.96%±2.13%降至10.24%±2.59%(t=1.62,P<0.05),5-HT 2B受体激动剂使其降至8.41%±0.96%(t=1.75,P<0.05),反之,5-HT 2B受体拮抗剂能拮抗5-HT的抗凋亡作用,其凋亡率为25.92%±1.33%(t=1.45,P>0.05)。5-HT及5-HT 2B受体激动剂均能够减少caspase3活化,增加AKT的磷酸化,使细胞凋亡减少。结论5-HT通过上调5-HT 2B受体促进AKT磷酸化,从而抑制AcD诱导的肝细胞凋亡。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B_1、B_2

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1、B2 的方法。玉米样品经甲醇 -水(4∶1)提取 ,提取液通过FumoniTest免疫亲和柱净化 ,净化液经柱前衍生、SpherisorbC18色谱柱分离、荧光检测器检测、外标法定量。对添加不同含量的伏马毒素B1、B2 进行 5次重复实验 ,得B1的平均回收率为 82 .3%～88.7% ,B2 为 74.9%～ 81.6 %。B1的变异系数 (CV)为 4.9%～ 6 .3% ,B2 为 5 .8%～ 7.2 %。检测低限B1为0 .0 2 0mg/kg,B2 为 0 .0 40mg/kg。

对婴幼儿口腔溃疡采取复方制霉菌素联合维生素B_2治疗的效果观察

目的：分析将复方制霉菌素、维生素B_2同时运用于婴幼儿口腔溃疡治疗的效果。方法：随机选择2014年12月~2015年12月本院收治患有口腔溃疡的84例儿童,将其平分成实验、对照两组,实验组42例施行维生素B2＋复方制霉菌素联治模式,对照组42例在常规口腔护理前提下施予西瓜霜涂药。对比两组疗效。结果：实验组总有效率97.62%,对照组为78.57%。两组对比,差异较大（P〈0.05）。实验组起效时间少于对照组,组间差异较显著（P〈0.05）。结论：以复方制霉菌素＋维生素B_2联合给药方式治疗婴幼儿口腔溃疡,可取得很好的疗效,促进患儿口腔内部的溃疡面尽快愈合,值得推广。

组蛋白乙酰化对A549和BEAS-2B细胞哮喘易感基因ADAM33的影响

目的:研究丁酸钠、曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)及腺病毒E1A相关的300 kD蛋白(adenoviral E1A binding protein of 300 kD,P300)介导的组蛋白乙酰化在人非小细胞肺癌A549细胞及人支气管上皮BEAS-2B细胞中对哮喘易感的解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因表达的影响。方法:将A549细胞及BEAS-2B细胞分别分为丁酸钠对照组(双蒸水处理)和1、2.5、5 mmol/L丁酸钠组,TSA对照组(0.1%二甲基亚砜处理)和0.2、0.4、0.8μmol/L TSA组,按照组别分别予以相应处理;另将BEAS-2B细胞分为对照组(转染P300突变质粒)和P300组(转染P300表达质粒);采用双荧光素酶报告基因法分析ADAM33启动子活性的变化,实时荧光定量PCR(quantitative real time-PCR,qRT-PCR)检测ADAM33 mRNA表达,蛋白质印迹法检测ADAM33蛋白表达。结果:在人非小细胞肺癌A549细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性明显降低(P<0.01);在BEAS-2B细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性、mRNA及蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。加大丁酸钠、TSA药物浓度,ADAM33表达无显著差异。在人支气管上皮BEAS-2B细胞中,与对照组相比,P300组ADAM33启动子活性、mRNA和蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论:丁酸钠、TSA通过组蛋白乙酰化降低人非小细胞肺癌A549细胞和人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达,P300通过组蛋白乙酰化降低人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达。

阿维菌素B_2海藻酸钠-壳聚糖包埋颗粒剂的制备及性能研究

为了提高阿维菌素B_2的农药利用率,以海藻酸钠与壳聚糖为复合载体,采用复凝聚法制备了阿维菌素B_2海藻酸钠-壳聚糖包埋颗粒剂,并研究了其理化性质及其在土壤中的释放性能。通过单因素试验筛选出对包埋颗粒剂包埋率影响较大的因素,并进行正交试验,以获得优化制备配方;用红外光谱表征包埋颗粒剂的化学结构,用扫描电子显微镜(SEM)观察其物理形态。采用土壤包埋法研究了其模拟释放性能。结果显示:制备阿维菌素B2海藻酸钠-壳聚糖包埋颗粒剂的优选配方为海藻酸钠质量分数1.5%,壳聚糖质量分数1%,Tween-20质量分数0.75%,投药量m(阿维菌素B2):m(海藻酸钠)=1:2,油水比[m(油相):m(水相)]=1:20;所制备的包埋颗粒剂的载药量为22.38%±0.25%,包埋率为95.26%±0.61%。SEM图像显示,包埋颗粒剂形状不规则;红外光谱数据显示,阿维菌素B_2被成功包埋于载体中。土壤中的释放性能试验结果表明:包埋颗粒剂在土壤中突释明显,在前30 d,阿维菌素B_2的释放量占80 d总释放量的60%以上;小粒径颗粒剂具有更快的释放速率。粒径150~300μm和>300μm的包埋颗粒剂释放符合一级动力学方程,粒径150~300μm和<150μm的包埋颗粒剂亦符合Higuchi方程。

5-氮杂-2-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对胃癌细胞SGC-7901MGMT表达及NF-κB活性的影响

目的研究5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycitydine,5-Aza-dC)及曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖、凋亡及移植瘤生长的影响,从体内、体外观察抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达,核转录因子NF-κB活性的改变,探讨5-Aza-dC联合TSA用于胃癌临床治疗的可行性。方法实验分对照组、5-Aza-dC组、TSA组和5-Aza-dC联合TSA组,利用CCK-8增殖试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡,RT-PCR检测各组MGMT mRNA表达,Western blot检测MGMT、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65的磷酸化水平。结果 5-Aza-dC、TSA单独处理均可抑制SGC-7901细胞的生长和促进其凋亡,联合用药后效果更明显(P<0.05);与对照组相比,单药组移植瘤变化没有统计学意义(P>0.05),而联合用药组较单药组移植瘤变小;5-Aza-dC、TSA单独或联合处理SGC-7901细胞和裸鼠移植瘤后,与对照组比较,MGMT基因mRNA及蛋白表达水平均上调,联合用药比单独用药升高明显,NF-κB p65在各处理组中的表达量未发生变化,但其磷酸化程度较对照组下降,联合用药较单药下降更明显(P<0.05)。结论 5-Aza-dC与TSA发挥抑制胃癌生长的作用可能是通过抑制NF-κB的活性,提高MGMT基因的转录和表达而实现的,两药联合使用的抗癌效果更加明显。

阿维菌素B_(2a)大环内酰胺的合成及生物活性

以阿维菌素B_(2a)为原料,经保护、开环、氧化、胺化和关环5个步骤合成目标化合物阿维菌素B2a大环内酰胺。通过核磁共振氢谱(1 HNMR)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、高分辨质谱(HRMS)等对目标化合物进行结构表征,并测定了目标化合物对东方粘虫、棉铃虫、蚊幼虫及朱砂叶螨的杀虫活性。结果表明,在浓度为10mg·L^(-1)时,目标化合物对幼螨的杀虫活性高达70%,优于阿维菌素B2a。

阿维菌素B2a衍生物类皮雷菌素对草地贪夜蛾的室内毒力

【目的】测定不同浓度的类皮雷菌素对草地贪夜蛾的生物活性,为草地贪夜蛾的绿色防控提供参考依据。【方法】于室内用不同浓度(0、0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mg/L)类皮雷菌素药液浸泡过的玉米叶片分别喂食10头草地贪夜蛾2龄幼虫,3次重复;于处理前和处理后24、48 h测量幼虫的体重、体长等指标,观察记录幼虫的死亡情况,研究类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫生长的影响。【结果】在室内条件下,用不同浓度的类皮雷菌素药液浸泡过的玉米叶片喂食草地贪夜蛾2龄幼虫24和48 h后,2龄幼虫的死亡率随药液浓度的增大而上升,其中4.00 mg/L类皮雷菌素药液处理24 h后草地贪夜蛾2龄幼虫的体长增长率为-1.06%、体长增长抑制率为120.88%、平均取食叶面积为4.67 mm^2、取食抑制率为39.13%,处理24和48 h后草地贪夜蛾2龄幼虫的体重增长抑制率分别为19.03%和56.07%。【结论】类皮雷菌素对草地贪夜蛾的体长、体重和取食量均有抑制作用,在草地贪夜蛾的防控中有广阔的应用前景。

玉米粉中伏马毒素B1和B2基体参考物质的研制

通过将产毒镰刀菌接种于玉米培养基,获得了含大量伏马毒素B1(FB1)和伏马毒素B2(FB2)的基质样本,与空白玉米粉逐级稀释后,获得了玉米粉中FB1和FB2基体参考物质。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法对制备得到的基体参考物质进行均匀性、稳定性检验,并采用6家实验室联合定值的方法对参考物质进行定值和不确定度评估。结果表明,制备得到的参考物质均匀性、稳定性良好,符合标准物质技术规范;参考物质中FB1和FB2的定值结果分别为1.07±0.09 mg/kg和0.43±0.07 mg/kg;该参考物质可用于玉米粉中FB1和FB2的定性和定量检测。

玉米中伏马毒素B1、B2间接竞争酶联免疫吸附方法的建立

基于伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)单克隆抗体建立了间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA),用于玉米中伏马毒素的初步筛查。该方法优化了抗原包被浓度和单抗体稀释倍数、抗原包被条件、酶标二抗稀释倍数、底物作用时间。结果显示,线性检测范围为1.41~54.2ng/m L,最低检测限为24.5μg/kg,实测玉米样品加标回收率为89.36%~108.54%。交叉反应结果显示,与伏马毒素B2(fumonisin B2,FB2)交叉反应率为129.88%,与其他真菌毒素交叉反应均小于10%,该ic-ELISA方法可对玉米样品中的FB1与FB2总量进行初筛。

5%阿维菌素B2防治大姜根结线虫药效研究

近年来,大姜根结线虫病危害日趋严重,受害地块大幅度减产,危害严重的失去商品价值和食用价值。为明确5%阿维菌素B2对大姜根结线虫的防治效果,安排了田间药效试验。结果表明,5%阿维菌素B2对大姜根结线虫病防效显著,其中大姜栽植期用5%阿维菌素B2水分散粒剂30 kg/hm^2拌细沙土225~300 kg/hm^2均匀施入播种沟内,然后栽植覆土,6月小培时用5%阿维菌素B2水分散粒剂30 kg/hm^2拌细沙土225~300 kg/hm^2撒施入沟,培土浇水,防效最为理想,对大姜根结线虫病的防效达到91.21%,对土壤中根结线虫的防治效果达83.48%。

17种植物性饲料原料中伏马毒素(B1+B2)、赭曲霉毒素A、T-2毒素、黄曲霉毒素B1污染状况调查检测分析

为了解掌握伏马毒素(B1+B2)、赭曲霉毒素A、T-2毒素、黄曲霉毒素B1在植物性饲料原料中的污染状况,指导饲料生产企业和养殖企业开展霉菌毒素防控,降低霉菌毒素对饲料产品质量及畜禽养殖危害,减少经济损失,2019年对17种62份植物性饲料原料进行采集,采用液相色谱—串联质谱法、免疫亲和柱净化—高效液相色谱法检测,依据《饲料卫生标准》(GB 13078—2017)判定分析。结果表明:伏马毒素(B1+B2)、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1在17种植物性饲料原料中的污染状况差别明显,伏马毒素(B1+B2)、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1平均检出率分别为37.09%、8.06%、29.03%,最大检测值分别为15.96 mg/kg、26.60μg/kg、351.00μg/kg。从检测结果得出,4种霉菌毒素在17种植物性饲料原料中的污染较重,整体污染率达48.40%,玉米皮、喷浆玉米皮、花生粕3种植物性饲料原料中黄曲霉毒素B1超标,污染率与超标率不一定呈正比,表明霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍,对饲料产品及养殖安全造成严重影响。针对该问题,提出控制植物性饲料原料质量建议,为今后控制饲料原料中霉菌毒素含量提供参考。

硝夫太尔制霉菌素软胶囊联合重组人干扰素α2b栓治疗复发性念珠菌性阴道炎临床研究

目的研究硝夫太尔制霉菌素软胶囊联合重组人干扰素α2b栓治疗复发性念珠菌性阴道炎的效果。方法选择复发性念珠菌性阴道炎患者84例,进行前瞻性随机对照研究。研究组采用硝夫太尔制霉菌素软胶囊及重组人干扰素α2b栓治疗;对照组采用克霉唑栓,同时口服制霉菌素片治疗。治疗后随访至6个月,比较2组疗效。结果研究组总有效率98%,对照组总有效率80%。结论硝夫太尔制霉菌素软胶囊联合重组人干扰素α2b栓治疗复发性念珠菌性阴道炎疗效满意。

阿司匹林、维生素B_2联合制霉菌素治疗足癣60例观察

目的:探讨阿司匹林、维生素B2联合制霉菌素外敷治疗足癣的临床疗效。方法:180例足癣患者随机分为观察组、对照1组、对照2组各60例,观察组外敷阿司匹林、维生素B2及制霉菌素混合物,对照1组外敷制霉菌素,对照2组外敷制霉菌素和阿司匹林混合物,早晚各1次,总疗程4周。比较三组临床疗效。结果:观察组治愈率和总有效率显著高于对照1组、对照2组,对照2组治愈率和总有效率高于对照1组,治愈率、总有效率均有显著差异(P<0.01、P<0.05)。结论:阿司匹林、维生素B2和制霉菌素联合应用治疗足癣治愈率高、效果显著。

5%阿维菌素B2水分散粒剂防治番茄根结线虫病效果研究

近年来,随着作物种植结构的调整,石家庄市蔬菜种植面积越来越大,目前已达到200万亩。并且由于蔬菜连茬、重茬种植,设施蔬菜种植面积不断扩大,蔬菜根结线虫病(Meloidogyne incognita)也越来越严重,其中番茄、甜瓜、黄瓜、茄子尤其严重。蔬菜根结线虫病给菜农们带来的直接经济损失达20%~30%,严重时高达40%~50%,有时甚至绝产。噻唑膦作为目前常用的杀线虫剂,在石家庄地区已使用多年,但噻唑膦是一种有机磷化学农药,长期大量使用会对土壤和地下水造成污染。

重组人干扰素α2b栓联合硝夫太尔制霉菌素软胶囊治疗复发性外阴阴道假丝酵母菌病的临床研究

目的探讨重组人干扰素α2b栓联合硝夫太尔制霉菌素软胶囊治疗复发性外阴阴道假丝酵母菌病的效果。方法选择2015年5月~2016年4月我院收治复发性外阴阴道假丝酵母菌病120例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各60例。对照组采用硝夫太尔制霉菌素软胶囊联合氟康唑分散片治疗;观察组采用重组人干扰素α2b栓联合硝夫太尔制霉菌素软胶囊治疗,观察两组治疗效果。结果观察组和对照组的总有效率分别为96.7%和71.7%,观察组优于对照组(P<0.05);观察组和对照组不良反应发生率分别为1.7%和11.7%,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组停药3、6个月后的复发率(0、3.3%)均明显低于对照组(10.0%、25.0%)(P<0.05)。结论重组人干扰素α2b栓联合硝夫太尔制霉菌素软胶囊治疗复发性外阴阴道假丝酵母菌病有助于提高治疗效果,降低不良反应和复发率,疗效显著。