欧李DAM5基因的克隆及表达分析

休眠相关MADS-box(DAM)基因在植物芽休眠诱导过程中发挥重要作用。该研究以欧李‘农大4号’不同阶段的芽为材料,利用PCR技术,克隆获得ChDAM基因。ChDAM基因全长705 bp,编码234个氨基酸。多序列比对与结构域分析发现,ChDAM基因编码的蛋白具有典型的MADS-box结构域和K-box结构域,其氨基酸序列与桃的DAM5蛋白相似性较高。启动子分析发现,ChDAM5基因的表达可能会受到低温和脱落酸的调控。实时荧光定量PCR分析发现,ChDAM5基因的表达随着休眠诱导进程逐渐升高。研究推测,ChDAM基因在诱导欧李芽休眠中发挥关键作用,为后续深入的代谢途径研究奠定了基础。

蓝莓花芽休眠相关MADS-box基因VcDAM1的克隆与表达分析

休眠相关MADS-box(DAM)基因在植物芽休眠及解除过程中发挥重要作用。本研究以‘蓝丰’蓝莓(Vaccinium corymbosum)休眠花芽为材料,利用RT-PCR及RACE技术,克隆获得Vc DAM1基因(Gen Bank登录号为KF871069)。该基因全长1376 bp,包含一个750 bp的开放阅读框,编码249个氨基酸。序列比对发现,该基因编码的蛋白质具有典型的MIKC^C型MADS-box结构域和K-box结构域,其氨基酸序列与砂梨DAM同源性较高。实时定量PCR结果表明,该基因在蓝莓花芽中表达量最高,且随花芽休眠进程呈现规律变化,在内休眠期间表达量持续上升,内休眠解除后表达量迅速下降;外源脱落酸能使该基因表达上调,外源赤霉素和单氰胺使该基因表达下调。推测该基因调控蓝莓花芽的休眠。

葡萄ARP/DRM基因家族克隆及其在休眠解除过程中的表达

生长素抑制蛋白(auxin-repressed protein, ARP)和休眠相关基因(dormancy-related proteins, DRM)是植物中常见的生长素抑制类基因,与植物休眠进程相关。为了鉴定葡萄ARP/DRM基因参与休眠的功能特点,本研究基于欧洲葡萄基因组数据库挖掘,采用同源克隆法获得了3条葡萄ARP/DRM基因家族成员序列,分别命名为VvARP/DRM1、VvARP/DRM2和VvARP/DRM3。序列分析的结果表明,所克隆的3条序列与其他植物的相应序列具有很高的一致性。实时荧光定量表达的检测结果表明,在单氰胺打破葡萄冬芽休眠的过程中,3个基因都是在处理前期表达较高,然后随着处理时间的延长表达水平不断下降。在整个单氰胺处理的过程中,对照组中的VvARP/DRM1、VvARP/DRM2和VvARP/DRM3的表达水平一直高于处理组。研究结果为深入分析ARP/DRM基因家族在葡萄冬芽休眠解除过程中的功能和作用机理提供了参考依据。