一种乳鼠海马神经元原代培养方法的优化与鉴定

目的:建立一种稳定高效、纯度较高的大鼠海马神经元体外原代培养的方法,并用免疫荧光法对其进行纯度鉴定,为缺血性脑卒中研究的体外模型建立提供一定的实验技术参考。方法:取新生24h的SD大鼠,经消毒、断头取脑分离出海马组织,剪碎后经过消化、重悬,并用含10%血清的DMEM/F12培养基进行接种培养,于第2天半量换为Neurobasal+B27培养基,后每2天换液1次。倒置显微镜下观察不同时期神海马经元生长过程的形态学变化。采用MAP-2、Cy3神经元特异性抗体对其进行免疫荧光鉴定。结果:体外培养海马神经元结构特征明显,生长状况良好,能形成典型的神经细胞网络,细胞鉴定呈阳性,纯度较高。结论:上述改良后海马神经元的原代培养,可获得生长状态良好的海马神经元,是体外研究缺血性脑卒中的良好细胞模型。