峨眉山野生金蝉花孢梗束培养试验

为确定峨眉山金蝉花孢梗束培养的最佳工艺条件,对金蝉花孢梗束生长的常用培养基配方进行筛选试验,选用大米、小米、黄豆等原料进行配方试验,采用均匀设计试验法优化培养基配方。结果表明,金蝉花在以无机盐为主要营养成分的Richard琼脂培养基和Czapek琼脂培养基上均能产生孢梗束。在大米等的配方试验中,以大米为营养物质的金蝉花孢梗束生长最快,金蝉花氨基酸含量为23.4%,粗多糖含量为26.5%,蛋白质含量为29.3%,均高于野生金蝉花中该物质的含量。在均匀设计的配方试验中,10号培养基中的金蝉花孢梗束以珊瑚状为主,菌体形态最好,孢梗束产率可达57.4%。10号配方孢梗束中蛋白质的含量高达42.5%,氨基酸含量高达33.3%,均远高于野生金蝉花。

利用微载体系统规模化生产鸡成肌细胞

随着细胞培育肉产业的快速发展,应用于细胞培育肉生产的细胞规模化培养技术受到广泛关注。本研究采用3D Table Trix^(TM)和Cytodex 1两种微载体在转瓶中对成肌细胞进行悬浮培养,筛选出更适于成肌细胞大规模培养的微载体,进而采用单因素控制变量法探讨了不同培养条件对细胞大规模培养的影响。两种微载体的显微示意图显示,Cytodex 1是一种表面光滑且无大孔结构的球体,3D Table Trix^(TM)是一种表面多孔且孔隙较大的不规则球体。细胞转瓶培养结果显示,细胞在3D Table Trix^(TM)上生长更加高效,培养10 d后细胞收获量为8.97×10^(5)个/m L。优化细胞在3D Table Trix^(TM)的培养条件,结果显示,在细胞贴壁期,以40 r/min速率搅拌10 min、静置50 min的间隔搅拌方式培养最佳;在细胞接种密度1×10^(5)个/m L、微载体质量浓度2 mg/m L、搅拌速率40 r/min的条件下,初始培养血清体积分数为20%,培养24 h后更换为血清体积分数10%的培养基,并采用隔天更换50%培养基的补料方式,可获得最佳的细胞培养效率。通过微载体的珠对珠转移,将细胞转移至2 L转瓶,最终收获细胞数量1.07×10^(9)个,存活率达到95%以上。带有细胞的微载体还可以冻存和复苏,并且和解冻细胞的增殖状况和形态没有显著差异。优化后的培养工艺实现了在转瓶中成肌细胞高效的大规模培养,并在工业化大规模生产细胞培育肉领域具有良好的应用前景。