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题名鸡传染性法式囊病毒VP2原核表达蛋白的纯化和复性
被引量:1
- 1
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作者
樊国燕
胡平
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机构
郑州牧业工程高等专科学校
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出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第18期7639-7641,共3页
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基金
河南省重点科技攻关课题(0423011200)
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文摘
[目的]探讨鸡传染性法式囊病毒(IBDV)VP2原核表达蛋白的纯化和复性。[方法]对原核表达的IBDVVP2蛋白进行可溶性与不可溶性分析,并利用溶菌酶、Triton-100、尿素等试剂进行纯化和复性,对复性前后的蛋白分别与特异性多抗进行Dot-ELISA。[结果]可溶性与不可溶性分析的结果表明,蛋白主要以包涵体形式存在。Dot-ELISA表明,复性后蛋白的反应活性增强了10倍,对复性后的蛋白与IBDV16株单抗进行Dot-ELISA,其中有11株与其发生特异性反应。[结论]复性后的蛋白与鸡传染性法式囊病毒单克隆抗体的反应性明显提高。
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关键词
鸡传染性法式囊病毒
VP2蛋白
包涵体
纯化
复性
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Keywords
Infectious bursal disease virus
VP2 structural protein
Inclusion body
Purification
Refold
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分类号
S855.3
[农业科学—临床兽医学]
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题名鸡传染性法式囊病毒VP2原核表达蛋白的纯化和复性
- 2
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作者
王慧杰
杨向科
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机构
郑州牧业工程高等专科学校
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出处
《河南科学》
2006年第5期687-690,共4页
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基金
河南省重点科技攻关课题(0423011200)
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文摘
对原核表达的鸡传染性法式囊病毒(IBDV)VP2蛋白进行可溶性分析与不可溶性分析,结果表明蛋白主要以包涵体形式存在,利用溶菌酶、Triton-100、尿素等试剂进行纯化和复性后,对复性前后的蛋白分别与特异性多抗进行Dot-ELISA,复性后蛋白的反应活性增强了10倍,对复性后的蛋白与IBDV16株单抗进行Dot-ELISA,其中有11株与其发生特异性反应.
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关键词
鸡传染性法式囊病毒
VP2蛋白
包涵体
纯化
复性
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Keywords
infectious bursal disease virus
VP2 structural protein
inclusion body: purification
refold
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分类号
Q939.9
[生物学—微生物学]
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题名鸡法氏囊病毒多表位抗原的表达及免疫特性分析
被引量:2
- 3
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作者
胡巍
于妮娜
张海红
刘文
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机构
山东理工大学生命科学学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期165-169,共5页
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文摘
为进行传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位抗原的原核表达和免疫特性分析,应用重叠延伸PCR技术扩增合成由病毒VP2和VP3蛋白多个表位序列构成的重组抗原基因,并将抗原基因与原核表达载体pBVIL1重组,表达多表位融合抗原,通过与标准抗血清反应和动物免疫分别检测表达抗原的免疫反应性和免疫原性。结果显示,经42℃诱导后,含重组载体的大肠杆菌表达了31 kD的抗原蛋白,Western blot鉴定出现阳性条带,免疫小鼠后,抗血清的滴度为1∶6 400。说明原核表达载体构建成功,大量表达的多表位融合抗原具有IBDV抗原反应性。
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关键词
传染性法式囊病毒
多表位抗原
原核表达
免疫反应性
免疫原性
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Keywords
Infectious bursal disease virus(IBDV) Multiple epitopes antigen Prokaryotic expression Immunogenicity Immunoreactivity
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
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题名IBDV H1株VP2基因的原核表达
- 4
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作者
边传周
乔宏兴
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机构
郑州牧业工程高等专科学校生物工程系
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出处
《中国农学通报》
CSCD
2008年第3期20-23,共4页
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基金
河南省科技厅项目"鸡免疫抑制性疾病的诊断和防制"(0623012200)
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文摘
【研究目的】为了研究鸡传染性法式囊病毒的分子生物学特性,【方法】应用反转录(RT-PCR)技术从河南传染性法式囊发病鸡中总RNA克隆出1461bp的VP2基因,并将其克隆于pET-28a载体,筛选并构建了pVP2表达载体。【结果】经IPTG诱导后,在其宿主菌BL21(DE3)中成功表达了53.7ku蛋白。【结论】经SDS-PAGE和Western blotting分析,VP2表达产物以包涵体形式存在,并与鸡IBDV抗血清及1株IBDV单抗发生特异性反应。
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关键词
传染性法式囊病毒
VP2基因
原核表达
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Keywords
infectious bursal disease virus, VF2 gene, prokaryotic expression
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分类号
S852.659.4
[农业科学—基础兽医学]
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题名检测鸡IBDV血清抗体的IHA的建立
被引量:1
- 5
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作者
程太平
荣俊
刘晓娜
彭本英
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机构
长江大学动物科学学院
长江大学生命科学学院
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出处
《湖北农业科学》
北大核心
2007年第2期271-275,共5页
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基金
湖北省教育厅重点科技发展项目(992P0706)
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文摘
以大肠杆菌表达的传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2致敏绵羊红细胞,建立间接血凝试验(IHA)。对参考阳性血清(鸡新城疫病毒抗血清、鸡传染性支气管炎病毒抗血清、鸡禽痘病毒抗血清)及鸡参考阴性血清等分别进行微量IHA,加上抑制试验,结果证实其特异性高。对商品肉用仔鸡的30个血清样品、IBDV重组亚单位疫苗免疫试验鸡的20个血清样品,分别进行微量IHA和琼脂免疫扩散试验(AGID),将肉用仔鸡血清的阳性检出率进行t检验(P<0.05);而20份免疫试验鸡血清样品IHA阳性检出率与AGID阳性检出率均为100%。对30份肉用仔鸡血清样品和20份免疫试验鸡血清样品检测得到的阳性血清的平均滴度进行方差分析,IHA的平均滴度与AGID的平均滴度之间均具有显著性差异。对20份免疫试验鸡血清及IBDV参考阳性血清以3个批次和第2批次IHA试验制剂,分别进行重复性试验,对其IHA平均滴度进行了方差分析,均无显著性差异。对20份免疫试验鸡血清以在4℃、保存期分别为3、6、9个月的IHA的试验制剂进行了微量IHA,检出的IBDV抗体平均滴度中,3个月的与6个月的无显著差异;3个月的与9个月的及6个月的与9个月的,均有显著差异,结果表明该IHA试验制剂在4℃的保存期可达6个月。
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关键词
传染性法式囊病病毒
间接血凝试验
血清抗体
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Keywords
IBDV
IHA
sera antibody
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分类号
S852.659.4
[农业科学—基础兽医学]
S852.45
[农业科学—基础兽医学]
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