猪传染性胃肠炎与流行性腹泻的防控

养殖业生产中各种疾病的发生都是比较常见的生产情况,在生猪生产中也是一样的。猪传染性胃肠炎与流行性腹泻发生的情况较多,严重威胁着生猪业的快速发展。1流行病学。1.1病原体。引起猪传染性肠胃炎的病原体是传染性肠胃炎病毒;猪暴发流行性腹泻的病原体是猪流行性腹泻病毒。上述两种病毒都属于冠状病毒,并且只有一个血清类型,均对常见的消毒剂敏感,比如乙醚、氯仿等溶剂在自然环境下都能将病毒灭杀。传染性胃肠炎病毒呈圆形、椭圆形或类圆的多边形。

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的原核表达与纯化

为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E.coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组TGEV毒株S蛋白的分子量分别约为28 kDa、30 kDa,在不同诱导条件下均以包涵体形式存在,在28℃条件下以终浓度为1 mmoL·L^(-1)IPTG诱导4 h表达量达到最高。结果表明:试验成功制备了TGEV重组S蛋白,为TGEV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗、检测试剂的研究奠定了基础。

猪传染性胃肠炎的综合防治措施

猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病,是由传染性胃肠炎病毒引起的,典型的临床症状为不同程度的腹泻、呕吐、发热、脱水等。15日龄以内的仔猪发病率和死亡率比较高。无论任何日龄和品种的猪都可发生本病,仔猪感染后病死率较高。10日龄以内的哺乳仔猪病死率可达50%以上,成年猪感染本病14d后自动痊愈,很少死亡,但严重影响猪的生长和料肉比增加,给养猪业造成了严重的经济损失。

猪传染性胃肠炎的防治

猪传染性胃肠炎是由传染性胃肠炎病毒引起的一种急性肠道传染病。以呕吐、水泻、脱水为特征,被世界动物卫生组织列为B类动物疫病,此病可发于不同年龄阶段的猪群。1发病原因猪传染性肠胃炎病毒是冠状病毒的一种,其形态多样化,存在于猪各个器官、排泄物以及体液中,其中空肠、十二指肠存量最多。该病毒耐低温,不耐光照,粪便中的病毒在强光下3~5 h即可失去毒性,紫外线光照下半小时可灭活。此病传染渠道有多种,主要通过直接或间接接触经消化道传播。

猪传染性胃肠炎的诊断与防制措施

在生猪养殖的过程中,往往会产生各种疫病,猪传染性胃肠炎作为常见的一种病症,主要是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性的肠道传染病,冬、春季节是猪传染性胃肠炎的高发季节。该病于1945年在美国首次发现,并于1956年在我国发生,近年来呈上升趋势。同时,与猪流行性腹泻的混合感染率也在逐年上升。猪传染性胃肠炎的传播不仅降低了养殖户的经济收益,同时阻碍了当地养猪业的健康稳定发展。

猪传染性胃肠炎病毒微胶囊疫苗的制备及其免疫效果评价

【目的】制备猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)灭活病毒包被的微胶囊,并评价其对新生仔猪口服黏膜免疫效果,以预防TGEV引起严重腹泻和造成经济损失。【方法】采用一步法以海藻酸钠和壳聚糖为微胶囊壁材,以灭活的TGEV为抗原制备TGEV微胶囊疫苗。以包封率、蛋白载量、体外释放速率为微胶囊质量评价指标,分别从成囊材料的配比及不同盐水溶液对微胶囊性能的影响方面对TGEV微胶囊的制备进行筛选,并评价TGEV微胶囊在不同环境的释放速率和室温储存耐受性。最后进行免疫学分析,对仔猪进行口服免疫,测定各项免疫指标,开展抗体效价检测和病毒中和试验。【结果】筛选出的制备微胶囊的最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度1.5%,壳聚糖浓度1.2%,氯化钙浓度3.5%,灭活病毒抗原加入量为1~2 mL,在此工艺条件下制备的TGEV微胶囊在PBS和盐水溶液中第3天释放率均超过50%;第18天,释放率分别达到97%和88%。常温放置5个月最低释放率仍保持在80%以上。口服免疫仔猪,微胶囊高、低剂量组粪便样品中IgA抗体的D490 nm值分别为0.97和1.49,IgG的抗体的D490 nm值分别为1.03和1.75。病毒中和试验中,微胶囊高、低剂量组抗体IgG的病毒50%中和效价分别为1∶512和1∶256;微胶囊高、低剂量组抗体IgA的病毒50%中和效价分别为1∶128和1∶64。【结论】海藻酸钠-壳聚糖微胶囊不仅具有在肠道中释放灭活的TGEV抗原的缓释效果,且对于疫苗免疫具有佐剂辅助效果,可增加适应性黏膜免疫应答中的抗体效价,在肠道中释放灭活的TGEV可有效刺激黏膜和全身免疫反应。

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻的防治

随着经济社会发展,人们的饮食习惯也逐渐发生变化,肉类需求骤增,这在一定程度上促进了养殖业的发展。猪养殖业是养殖业的重要组成部分,可以在满足市场需求的同时,增加经济效益。然而在养殖工作中,常常伴有猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻,这两种疾病是由病毒感染引起的,具有高度的传染性和致死性。猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,简称TGE)和猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,简称PED)是目前猪场中常见的两种胃肠道疾病,都属于猪病毒性腹泻病。

猪传染性胃肠炎病毒荧光RT-RAA方法的建立及初步应用

旨在建立一种简便、高效的猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的检测方法。本研究针对TGEV N基因设计了特异性的引物和探针,并构建重组质粒标准品TGEV-N,经过筛选及优化后建立TGEV荧光逆转录重组酶介异等温扩增(reverse-transcription recombinase-aid amplification,RT-RAA)检测方法。结果显示,该方法在42℃恒温条件下进行,20 min即可完成检测,与猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪丁型冠状病毒、猪肠道α冠状病毒等猪源病毒均无交叉反应;将TGEV-N稀释后,以10^(0)~10^(6)拷贝·μL^(-1)作为模板,进行敏感性试验,结果表明,该方法最低检出限可以达到6.62×10^(1)拷贝·μL^(-1);采用该方法对50份猪源样品进行检测,阳性率为6%(3/50),检测结果与RT-PCR一致。本试验建立的TGEV荧光RT-RAA检测方法简便、高效、特异、灵敏,为TGEV的临床筛查提供可行技术。

猪传染性胃肠炎病毒感染仔猪免疫器官的组织病理学观察

为了探讨猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染对仔猪免疫器官的影响,选取10只健康状况良好的5日龄仔猪,随机分为空白对照组和TGEV感染组(n=5),感染病毒5 d后剖解仔猪,采集胸腺、脾、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、髂下淋巴结、颈浅淋巴结和下颌淋巴结,苏木精-伊红染色观察各组织器官的病理学变化,免疫组织化学检测TGEV在免疫器官的分布。组织病理学观察发现,TGEV感染主要引起仔猪胸腺小叶肿大,免疫细胞减少;脾红髓增多,大量血细胞浸润,脾索和脾窦界限不清晰;扁桃体淋巴滤泡减少;淋巴窦中有大量血细胞浸润并伴有铁锈色。免疫组化结果显示,TGEV存在于多种免疫器官,脾中的病毒载量最高,其次是颈浅淋巴结和腹股沟淋巴结,胸腺中病毒分布最少。上述结果说明TGEV能够感染仔猪免疫系统并引起仔猪免疫器官的病理损伤,降低机体免疫功能。本研究为TGEV的免疫致病机制提供理论依据。

猪传染性胃肠炎病毒基因组结构及主要基因功能研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是一种单股正链RNA病毒,为冠状病毒α亚群成员,全基因组7个分区,编码4种结构蛋白和18种非结构蛋白。开展基因组的研究利于完善临床诊断技术、探索病毒作用机制、开发新型疫苗和抗病毒药物,对病毒防控和治疗具有重要作用。文章从TGEV病原学、基因组结构、主要基因及其编码蛋白的功能等方面进行了综述,以期为后续TGEV的分子生物学基础研究提供参考。

猪肠道组织RIG-I的表达及其在猪传染性胃肠炎病毒致病机制中作用的初步研究

为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况,评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白,将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价。结果显示获得了效价可达1∶64000的兔RIG-I多克隆抗体。利用该抗体经western blot检测SPF猪各肠道组织中RIG-I的表达。结果显示,制备的多克隆抗体可与猪各肠道中的RIG-I反应,且RIG-I在SPF猪空肠中的表达量最高。利用该抗体经western blot检测TGEV感染的ST细胞及猪空肠中RIG-I的表达水平。结果显示,TGEV感染后ST细胞中RIG-I的表达水平极显著高于空白对照细胞(P<0.01);与正常SPF猪空肠相比,TGEV感染的SPF猪空肠组织中RIG-I蛋白的表达水平明显提高。表明TGEV感染后能够刺激细胞内源性及感染猪肠道组织中RIG-I蛋白的表达水平。将本研究构建的重组质粒pCAGGS-RIG-I-flag和RIG-I干扰RNA(siRIG-I)分别转染ST细胞,采用western blot鉴定RIG-I的过表达和敲低效果后,再利用TGEV感染,24 h后采用qPCR检测RIG-I对上述ST细胞中IFN-β转录水平的影响;收集细胞上清,采用TCID50方法测定病毒滴度。qPCR及病毒滴度的测定结果显示,与转染空载体的对照组相比,RIG-I过表达的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著升高(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度下降约75%;与转染NCsiRNA的对照组相比,敲低RIG-I的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著下降(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度升高约4.8倍。表明,TGEV感染细胞中的RIG-I能够促进细胞中IFN-β的转录,提高宿主细胞的抗病毒免疫反应,从而抑制病毒的复制。本研究结果证实RIG-I在介导TGEV诱导宿主细胞产生IFN的过程中发挥重要作用,该结果为深入探究TGEV的致病机制奠定了实验基础。

猪传染性胃肠炎病毒HB-1株的分离鉴定和全基因组序列分析

为了解河北省秦皇岛市某猪场猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的流行情况,本试验通过病毒分离培养、反转录PCR(RT-PCR)、间接免疫荧光试验(IFA)等方法进行病毒分离和鉴定,并分析其全基因组序列。结果显示,本试验从仔猪粪便样品中成功分离获得1株TGEV,命名为HB-1株。HB-1株全基因组核苷酸序列全长28 590 bp,含有9个开放阅读框,GenBank登录号为MZ368889;HB-1株与AYU和WH-1株全基因核苷酸序列相似性最高,同属Purdue谱系;与16个国内外毒株全基因核苷酸序列同源性介于94.5%~99.9%,与9个国内参考株全基因核苷酸序列同源性介于98.5%~99.9%。结果表明,本试验获得TGEV分离株与国内流行株亲缘关系较近,应为交叉感染导致,此结果为河北省TGEV分子流行病学调查提供参考数据。

紫甘薯花色苷制备及其抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)活性的研究

为研究紫甘薯花色苷对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的抑制作用,实验纯化了紫甘薯花色苷提取物,并采用液质联机的方法鉴定其结构组成;将制备的花色苷提取物作用于侵染TGEV的猪睾丸(ST)细胞,研究对TGEV诱导ST细胞的形态学变化和凋亡情况的影响,揭示花色苷对TGEV的预防和治疗效果。结果表明:紫甘薯花色苷提取物中主要含8种花色苷。花色苷质量浓度低于60μg/mL时,ST细胞生长良好且无细胞毒性;接种TGEV后,20μg/mL的花色苷就能抑制TGEV的增殖,且在安全浓度范围内抑制程度成剂量关系。在此体外实验中,花色苷对TGEV的预防效果比治疗效果更明显。结论:紫甘薯花色苷在20～60μg/mL质量浓度范围内对TGEV有很好的抗病毒功效。

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)种毒特性研究

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)可导致仔猪严重腹泻,死亡率极高,是危害养猪业的重要病毒。免疫接种是预防TGEV感染有效手段,TGEV疫苗开发对防治TGEV感染具有重要价值。制备纯净种毒是疫苗株基础。本试验通过细胞培养、病毒培养、间接免疫荧光、RT-PCR、理化试验、中和试验、纯净度检测等试验技术对TGEV自主致弱毒株HR/DN1进行系统特性,结果表明,该病毒理化特性和分子生物学特性均与TGEV相符,且该病毒具有繁殖滴度高、传代稳定、病毒纯净等特点,符合种毒制备基本条件,为开发TGEV疫苗提供基础。

NLRP1炎症小体的激活及其在猪传染性胃肠炎病毒感染中的作用

冠状病毒是一类单股正链不分节段的RNA病毒,属于尼多病毒目,冠状病毒科,根据其遗传演化可分为α、β、γ、δ4个属。炎症小体是一组蛋白质复合物,其激活时引发机体强烈的炎症反应,对组织稳态和病原体清除至关重要。β冠状病毒属的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染诱导机体的过度炎症反应与严重的新冠肺炎有关。作为一种α冠状病毒,猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染会导致仔猪严重胃肠炎,并破坏其肠道粘膜免疫稳态,导致乳猪的高发病率和死亡率。然而,对于TGEV感染后炎症小体激活的机制及其在宿主防御中的生物学功能仍不清楚。

猪传染性胃肠炎的治疗和预防

猪传染性胃肠炎主要是因为感染冠状病毒所造成的,为传染性较强的疾病类型,具有发病迅速、传播速度较快及死亡率较高的特征。患病猪多具有呕吐、腹泻及脱水等临床症状,可发生于任何年龄阶段的猪,尤其是两年左右的仔猪,其患病率相对较高,死亡率也高于成年患病猪。

猪传染性胃肠炎防治措施(上)

一、病原及流行现状1.病原猪传染性胃肠炎是目前生猪养殖中比较常见的一种高度接触性传染病。其主要病原为猪传染性胃肠炎病毒,属于冠状病毒科冠状病毒属。该病毒粒子大多呈现圆形、椭圆形,其表面存在囊膜。该病毒对热较为敏感,在56℃环境下经过30分钟可灭活;在37℃条件下,经过4天可丧失毒力;在低温条件下可长期保存,在液氮中存放3年,对毒力无明显影响。

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二重PCR检测方法的建立

通过对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因和猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因进行序列分析,本试验利用DNAStar软件分别设计2对特异性引物,扩增片段长度分别为299和437bp,建立一种针对TGEV和PEDV感染的二重PCR鉴别诊断方法。该方法能同时检测到TGEV和PEDV,而对猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)等均无扩增,其检测TGEV、PEDV的极限为104拷贝/μL;用该方法对临床收集的68份疑似病毒性腹泻仔猪粪便和肠道组织样本进行检测,结果表明本试验建立的二重PCR方法具有特异性强、灵敏度高等特点,能用于临床诊断及流行病学调查。

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用

本研究旨在建立一种用于临床腹泻病例中猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)快速检测的一步法双重RT-PCR方法。根据GenBank中收录的PEDV和TGEV的基因序列,分别设计两对特性引物,经最佳反应条件的优化和选择,结果显示,该一步法双重RT-PCR检测方法能同时特异性扩增PEDV和TGEV,该方法可检测到稀释度1×10-5的疫苗毒。应用本方法检测2015年度实验室收集的疑似样品,PEDV阳性率为100%。本研究建立的方法快速、敏感性高、特异性强,可用于临床PEDV和TGEV的快速检测及流行病学调查。