抗-伤寒血清的制备方法

在医学检验专业细菌免疫学实验教学中，细菌的玻片凝集试验及试管凝集试验都是重要的实验内容，要求教师示教、学生动手操作，并要求学生熟练掌握操作技能。在实验教学中，细菌的玻片凝集试验一般采用伤寒杆菌及抗-伤寒血清；试管凝集试验的一个重要的临床运用是肥达氏实验，也需要抗-伤寒血清。所以，实验室应储备足够量的、高效价的抗—伤寒血清。一般实验室都是通过免疫动物获取抗-伤寒血清。笔者查阅相关文献资料，未找到一种详细介绍抗-伤寒血清的制备过程，

快速离心法测定伤寒血清凝集试验

快速离心法测定伤寒血清凝集试验贺娟，罗珊华伤寒血清凝集试验即肥达反应，国内常用的方法有试管法、微量反应法等，都存在着试验时间长的问题。针对这一问题，我们在原试管法的基础上将所有试管振摇混合后，再经离心机２０００转／分，离心５分钟。经４６例与常规方法平...

不同免疫途径制备伤寒抗血清效价的比较

目的 筛选制备高效价伤寒抗血清的方法。方法 分别通过腹腔、耳静脉、腹腔 +耳静脉途径 ,用伤寒“O”、“H”菌液免疫家兔 ,用试管凝集法检测并比较其效价。结果 腹腔免疫组、耳静脉免疫组、腹腔 +耳静脉免疫组抗血清几何平均滴度分别为 :“O”1:6 4 0、1:16 0 6 0、1:12 80 ;“H”1:1810、1:2 5 6 0 0、1:2 5 6 0。结论 伤寒“O”、“H”菌液通过耳静脉途径免疫 ,抗血清的效价优于其他两种方法。

肠沙门菌副伤寒甲血清型的萘啶酸抗性和克隆扩散

目的了解玉溪市1999年至2008年甲型副伤寒患者肠沙门菌甲型副伤寒血清型(SPA)分离株的萘啶酸抗性和克隆扩散。方法采用有对照的K-B纸片扩散技术对4060株SPA进行抗微生物药物敏感性试验;对随机选择的166个萘啶酸抗性(NAR)株和20个萘啶酸敏感(NAS)株进行SpeI消化染色体DNA脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型、聚类分析以及氟喹诺酮最小抑菌浓度(MIC)测定。结果分离株的NAR率由1999年的12.5%、2000年82.2%、2001年93%上升到2008年的100%;NAS株在1999年占优势,但在2000年以后被NAR株替代;166个NAR株都降低了对氟喹诺酮类药物的敏感性,其MIC值比20个NAS株的高得多。186个菌株SpeI消化产物得出以SpeI01、SpeI02型占优势的9种PFGE型。结论萘啶酸筛检实验可用于检测SPA降低氟喹诺酮敏感性,SpeI01和SpeI02是玉溪流行的主要克隆,建议制定并实施氟喹诺酮药物抗性株引起爆发流行的处理方案。

萘啶酸抗性甲型副伤寒病原菌的克隆扩散和遗传多样性

目的认识肠沙门菌甲型副伤寒血清型（SPA）的克隆扩散和遗传多样性，建立并确定病原菌流行克隆的分型方法。方法采用有对照的K-B纸片扩散技术对分离的3980株SPA进行抗微生物药物敏感性试验；经PCR扩增和基因测序检测15个萘啶酸抗性菌株喹诺酮抗性决定区的gyrA、gyrB、gyrC和gyrE基因；采用SpeI和XbaI消化染色体DNA脉冲场凝胶电泳（PFGE）对来自7个县的121个分离株进行分型和聚类分析。结果萘啶酸敏感菌株在1999年占有优势，但2000年以后被萘啶酸抗性菌株替代；15个萘啶酸抗性菌株的PCR扩增和基因测序显示抗性机制是由gyrA基因的单点突变引起；121个菌株SpeI和XbaI消化产物分别得出以SpeI01、SpeI02或XbaI01型占优势的5种和4种PFGE型，SpeI01和SpeI02分别占37．2％和57．9％，或XbaI01占95．0％。结论在研究期间SPA分离株萘啶酸抗性率上升；PFGE型的SpeI01和SpeI02或XbaI01是玉溪流行的主要克隆；采用SpeI和XbaI的PFGE是鉴别SPA的一项有用技术。

两种短程免疫方法制备伤寒抗血清的效价比较

目的通过对伤寒沙门菌抗体效价两种短程方法的比较,找出更为高效快速的免疫方法。方法采用鼠伤寒杆菌制备出伤寒沙门菌O抗原,将每天注射的免疫程序和每三天注射的免疫程序作比较,采用试管凝集法检测比较血清抗体效价,选出更为高效省时的制备免疫血清的方法。结果每天注射的免疫程序效价为1:2560,每三天注射的免疫程序效价为1:1280。结论将两种短效免疫方法进行比较,每天注射的免疫程序所制得的血清用时更短,效价更高。