微滴式数字PCR定量检测伯氏考克斯氏体方法的建立及应用

为建立伯氏考克斯氏体(Coxiella burnetii,Cb)微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR, ddPCR)检测方法,研究以Cb IS1111基因为靶基因,并针对基因保守区域设计了特异性引物和探针,以使反应的条件更加完善,从而构建了ddPCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性及重复性作出了评估。结果显示,所采用的ddPCR方法最低可检测的浓度为0.52 copies/μL,敏感性较高;与动物布鲁氏菌、牛结核分枝杆菌、土拉杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌无交叉反应,特异性强;组内重复和组间重复变异系数均小于10%,重复性好。使用本实验建立的方法检测了42份疑似感染的临床样品,检测结果与荧光PCR鉴定结果一致。表明建立的ddPCR方法的特异性强、敏感性高、重复性和准确性好,可用于Cb的快速检测和精准定量,对Cb感染的防控具有重要意义。

伯氏考克斯体新桥株感染BALB/c小鼠的实验研究

目的:分析伯氏考克斯体新桥株对BALB/c小鼠的感染性。方法:用伯氏考克斯体新桥株腹腔接种感染小鼠,于感染后7,14,21,28 d分别处死小鼠,采用伯氏考克斯体特异的荧光定量PCR检测感染小鼠肝、脾、肺组织样本中伯氏考克斯体含量。采用间接免疫荧光法检测感染小鼠血清特异性抗体水平。结果:感染后28 d内,小鼠肝、脾、肺组织中均检出大量伯氏考克斯体,第7天检出量最高,脾的含量显著高于肝和肺,肝的含量显著高于肺。随着感染时间延长,伯氏考克斯体检出量呈下降趋势,但血清特异性抗体水平则不断升高。结论:伯氏考克斯体新桥株为强毒株,可以引起BALB/c小鼠较长时间的稳定感染;BALB/c小鼠可以用作伯氏考克斯体感染模型。

多西环素治疗急性Q热失败1例

Q热是由伯氏考克斯氏体引起的一种世界范围内高致病性的人畜共患疾病。Q热临床表现不典型,常规实验室及影像学检查缺乏特异性,多数患者症状轻微且可自愈。Q热不是我国法定传染病,国内缺乏相关的诊治指南,是一种长期以来被忽视和诊断不足的疾病。本文报告1例病例,通过血液宏基因组二代测序(mNGS)诊断为急性Q热,经14 d多西环素治疗发热不退,后经米诺环素治疗3 d病情好转,旨在提高临床医生对急性Q热的认识,缩短疾病诊治时间。

传染病

9939603 新出现的和重新出现的传染病:多学科的观点/Stephens DS∥Am J Med Sci.-1998,315(2).-64～75 医科情 9939604 免疫接种和免疫接种规划的人口生物学,进展及免疫学/Halloran ME∥Am J Med Sci.-1998,315(2).-76～86 医科情 9939605 急性慢性Q热病人IgA亚型对伯氏考克斯氏体反应的分类/Camacho M T∥Clin Immunol Immunopathol.-1998,88(1).-80～83

医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学)

0027673 新最低制菌浓度 MIC 测定盒对抗菌力的测定:培养条件严格的菌种的稀罕检出菌种为中心[日]/川上小夜子//感染志.-1998,72(10).-1017～1026冀医情0027674 伯氏考克斯氏体中与 Hap70有关的70kD 表面同源物的鉴定/Macellaro A//Infect Immun.-1998,66(12).-5882～5888 医科情0027675 大鼠卡氏肺囊虫与试管内肺泡上皮细胞的相互作用/Beck JM//Am JPhysiol.-1998,275(1 Pt 1).

我国Q热立克次体菌株23S rRNA基因插入顺序的分析

目的 对我国伯氏考克斯体分离株的２３Ｓ ｒＲＮＡ基因插入片段（２３Ｓ ＩＶＳ）作核酸序列分析。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增７株Ｃｂ中国分离株和２株外国参考株的２３Ｓ ＩＶＳ，用双脱氧核苷酸法对扩增产物进行测序。

慢性Q热并发心内膜炎二例

Q热系由伯氏考克斯体（C．burnettii）感染所致的自然疫源性疾病，是当前全世界分布广泛的人兽共患疾病之一，国外发病率较高，而国内仍较罕见，至2000年所报道的急性Q热100余例，慢性Q热仅1例。可能该病在我国发病率确实较低，但也不能排除临床对该病尚认识不足因而漏诊、误诊较多。我院至今仅诊断2例，均合并感染性心内膜炎，报告如下。