广西地区β地中海贫血杂合子β-LCR-HS_2多态性序列分析

分别应用 PCR产物直接测序法和 PCR-限制性内切酶 Xm n 酶切法分析 1 7例广西地区 β地中海贫血杂合子的 34条染色单体上β- L CR- HS2 核心区 AT重复序列 (AT) x Ny(AT) z 多态性类型及 85 80、85 98、91 1 4位点碱基改变、Gγ珠蛋白基因启动子 - 1 5 8位点 (Gγ- 1 5 8)单核苷酸多态性 (SNP) ,并观察它们与高 Hb Fβ地中海贫血杂合子的关系。结果共检出 9种 (AT) x Ny(AT) z 类型 :(AT) 9N1 2 (AT) 1 1 、(AT) 8N1 2 (AT) 1 1 、(AT) 9N1 2 (AT) 1 0 、(AT) 1 0 N1 2 (AT) 1 1 、(AT) 9N1 3(AT) 1 1 、(AT) 9N1 4(AT) 9、(AT) 1 0 N1 2 (AT) 1 0 、(AT) 8N1 2 (AT) 1 4和 (AT) 9N1 4(AT) 1 0 ,其中前 3种类型检出最多 (73.5 % )。β- L CR- HS2 的 85 80、85 98、91 1 4位点均未发现突变。 Hb F>3%的 1 2例受检者有 6例 Gγ- 1 5 8基因型为 C/ T,6例为 C/ C;作为对照的 5例 Hb F正常 (<2 % )者均为Gγ- 1 5 8(C/ C)。 (AT) 9N1 2(AT) 1 0 主要在 6例 Hb F>3%且 Gγ- 1 5 8(C/ T)的个体中检出 (5 / 6 )。提示 (AT) 9N1 2 (AT) 1 0 与 Hb F升高有一定关系 ,而且与 Gγ- 1 5 8(C→T)

红系特异表达载体在转基因小鼠中表达的研究

为在个体水平上研究珠蛋白基因位点控制区的HS2,HS3及HS2-HS3元件对β-珠蛋白基因的时空表达调控作用,选择本实验室构建的CMV/GFP,HS2ALL,HS3ALL,HS23ALL等4种重组载体,经限制性酶切及两步纯化,得到了5种重组DNA片段:CMV/GFP,HS2/GFP,CMV/HS2/GFP,HS23/GFP,HS3/GFP,并用显微注射技术获得转基因小鼠,用流式细胞仪分析转基因各组织中绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,结果表明HS2元件及1.7 kb的β-珠蛋白启动子足以调控β-珠蛋白基因的组织特异性表达。此外,在不同的转基因小鼠中,GFP的表达虽有明显的个体差异,但综合分析比较可以看出,HS2与HS3元件在调控β-珠蛋白基因表达方面,其增强子作用基本相当,且两者显示出显著的协同作用。