多位点连锁分析检测Wilson病基因携带者及症状前患者

应用Ｓｏｕｔｈｅｍ余交技术，以ＷＮＤ位点两侧的四个ＤＮＡ多态标记一Ｄ１３Ｓ１（ｐ７Ｆ１２／ＴａｑＩ）、Ｄ１３Ｓ３１（ｐＣＲ１３２４／Ｔａｑ１和ｐＣＲＩ３２４／ＰｖｕⅡ）、Ｄ１３Ｓ２６（ｐＨ２１０／ＥｃｏＲＩ）对１０个Ｗｉｌｓｏｎ病家系的５４名个体进行多位点限制性片晰长度多态性（ＲＦＬＰ）连锁分析，检出２例症状前患者，１１例肯定携带者及５名正常纯合子，证实它们用于Ｗｉｌｓｏｎ病的症状前诊断及杂合子筛选是有效可靠的。

林木全同胞群体的多位点连锁分析

多位点连锁分析是构建人类以及动植物的遗传连锁图谱的关键步骤之一,但是由 于林木遗传背景的复杂性,多位点连锁分析在林木的全同胞群体中还没有得到应用．本文将多位 点连锁分析应用到林木的F1代全同胞群体中．对于全同胞群体的任意分离比的两个位点,给出 了在不同的连锁相下从一个位点到另一个位点的转移概率矩阵．对于给定的一列标记位点,考虑 了不同分离比位点以及两位点间的连锁相信息,采用隐马尔可夫链模型计算极大似然函数和相邻 位点间的重组率．本文的方法有助于构建完整的高密度的林木遗传连锁图谱．

与Huntington舞蹈病基因位点连锁的一些DNA 标记

应用DNA重组技术,已分离了一些与HD基因位点相连锁的DNA标记:D 4 S10(G8)、D 4 S43、D 4 S62、D 4S95、D 4 S96、D 4S97、D 4 S98。其中G8是最早分离出来的;D4S43是新发现的DNA标记中离HD基因位点最近的,仅相距0～1.5cM;D 4 S95距HD位点也相当近,且具有高度的多态性;D 4 S62、D 4S96、D 4 S97、D 4 S98等位于G8的远端,其中D4S62是一个非常保守的DAN片段。研究结果初步认为它们在第4号染色体上的排列为:cen-D 4 S62-D 4 S10-D 4 S43-〔D 4 S95;HD〕-4 pter。尽管这些DNA标记单独或联合使用均能用于对HD症状前诊断,但仍然存在着一些问题。

重新评估Old Order Amish中双相情感性疾病与11号染色体位点的连锁关系

由于遗传异质性及非遗传型,使得描绘各种情感性疾病遗传位点发生困难。Egeland等发现几个位于美国宾州东南部的Old OrderAmish人群中情感性疾病高发家系。Old Order Amish为不到15000人的宗教群体,为30对保持传隔离的移民后代。

加拿大法裔人群中与肥胖相关的高血压的全基因组连锁分析

原发性高血压是一种由多种机制共同作用的多基因疾病。由肥胖导致的病理改变是与其相 关的一个信号通路。我们主要研究高血压的一个亚型——肥胖相关的高血压,以寻找其致病基因。我们入 选了55个有两个患病同胞或者更多患者的家系,他们均来自于地理位置偏远的加拿大法裔人群,其中15个 家系的肥胖发病率较高(≥70％)。我们在所有的高血压家系和有高肥胖发病率的高血压家系中利用多位 点连锁分析方法进行全基因组扫描(GeneHunter 2．1;位点密度:10 cm)。在所有55个家庭的扫描中,我们 在1号染色体和11号染色体上分别发现了两个连锁值显著(LOD score=2．5)的位点D1S1597和 D11S1999。我们对仅患有肥胖高血压的家系进行扫描,在1号染色体的同一区域内发现连锁值最显著 (LOD score=3．1)的一个位点是D1S1597。然后我们又D1S1597周围的其他遗传标记进行基因分型,得到 了一个连锁更加显著的位点D1S2672(LOD score=3．5)。与肥胖高血压相关的许多候选基因都位于这个区 域,其中包括肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2)和心房利钠肽基因(atrial natriuretic peptide genes)。这些结果表明,研究临床定义明确的高血压亚型可能有助于寻找、鉴定复杂性疾病的致病基因,例 如本研究中利用肥胖相关的高血压亚型。

梓醇通过上调BMP-2表达激活Wnt/β-catenin信号通路促进大鼠股骨骨折愈合

目的:探讨梓醇对大鼠股骨骨折愈合的作用及其可能的作用机制。方法:将48只SD股骨骨折模型大鼠随机分为对照组、梓醇组、梓醇+sh-NC组和梓醇+sh-BMP-2组,每组12只。梓醇组大鼠灌胃50 mg/kg梓醇,梓醇+sh-NC组大鼠灌胃50 mg/kg梓醇和尾静脉注射300μL sh-NC慢病毒液,梓醇+sh-BMP-2组大鼠灌胃50 mg/kg梓醇和尾静脉注射300μL sh-BMP-2慢病毒液,对照组大鼠灌胃等量溶剂,1次/d,连续给药3周。X线检测骨折愈合;Micro-CT检测骨体积(BV)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(TB.N)、骨小梁间距(TB.Sp)和骨小梁厚度(TB.Th);RT-PCR检测BMP-2 mRNA表达;Western blotting检测BMP-2、Runx2、ColⅠ、β-catenin、cyclinD1和c-myc蛋白表达;ELISA检测血清ALP和OCN水平。结果:与对照组比较,梓醇组大鼠X线评分、BV、BV/TV、TB.N、TB.Th、BMP-2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),ALP和OCN水平以及Runx2、ColⅠ、β-catenin、cyclinD1和c-myc蛋白表达显著升高(P<0.05),TB.Sp无显著差异(P>0.05);梓醇组和梓醇+sh-NC组大鼠各项指标差异无统计学意义(P>0.05);与梓醇+sh-NC组相比,梓醇+sh-BMP-2组大鼠X线评分、BV、BV/TV、TB.N、TB.Th、BMP-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),ALP和OCN水平以及Runx2、ColⅠ、β-catenin、cyclinD1和c-myc蛋白表达显著降低(P<0.05),TB.Sp无显著差异(P>0.05)。结论:梓醇可能通过上调BMP-2表达激活人无翅型MMTV整合位点家族/β-连锁蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路促进大鼠股骨骨折愈合。