神经营养蛋白低亲和力受体p75^(NTR)的结合蛋白

神经营养蛋白通过酪氨酸激酶受体Trk和低亲和力受体p75NTR发挥其多种生理功能。通过蛋白质相互作用的研究技术已确认了十多个与p75NTR相互作用的蛋白质分子 ,它们在结构和功能上都存在显著差异 。

感觉和运动雪旺细胞NGF及其低亲和力受体p75的表达

周围神经损伤后,近端再生的感觉性神经纤维和运动性神经纤维可以大体上特异性地长入相应的雪旺细胞基膜管。这种特异性再生的机制,目前认为主要是远端靶器官的诱导作用,以及局部微环境的选择性作用。由于神经损伤后雪旺细胞明显增殖,而且被证实分泌多种神经营养因子、细胞粘附分子,其细胞膜与轴突的相互作用也决定了轴突的延伸速度和方向。本实验研究的目的就是通过对感觉和运动雪旺细胞体外培养,以与神经纤维再生密切相关的两个因素:神经生长因子(NCF)及其低亲和力受体(p75)的表达为指标,研究两种雪旺细胞的生物学特性是否有差别,从而推断不同性质的雪旺细胞对神经纤维的特异性再生所起的作用。

七氟烷对发育期小鼠海马低亲和力神经营养因子p75和远期认知功能的影响

目的探讨不同体积分数七氟烷麻醉对发育期小鼠海马脑源性营养因子和远期认知功能的影响。方法选取出生后7d的C57BL/6雄性小鼠(由南京大学模式动物研究所提供)182只。取60只小鼠按随机数字表法分为1.0最低肺泡有效浓度(MAC)组、0.5 MAC组和对照组,每组20只,分别给予体积分数为0.025 0(1.0 MAC)和0.012 5(0.5 MAC)七氟烷吸入麻醉或仅吸入体积分数为0.4的O_2,4h后采用Western印迹法测定海马组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Casp_ase-3)蛋白质含量,ELISA法测定外周血S100钙结合蛋白β(S-100β)和海马组织脑源性营养因子前体(pro-BDNF)、低亲和力神经营养因子p75(p75^(NTR))蛋白质含量。另取72只小鼠按随机数字表法分为1.0MAC组、0.5MAC组和对照组,每组24只,分别给予体积分数为0.025 0(1.0 MAC)和0.012 5(0.5 MAC)七氟烷吸入麻醉或仅吸入体积分数为0.4的O_2,4、12周后行Morris水迷宫实验,记录大鼠在90s内穿越原平台位置次数和平台所在象限停留时间。其余50只小鼠分别于麻醉前、吸入1.0 MAC七氟烷麻醉1或2h后、吸入0.5MAC七氟烷麻醉1或2h后5个时间点,每个时间点取10只小鼠测定动脉血pH值、动脉血氧分压(p_aO_2)、动脉血二氧化碳分压(p_aCO_2)和动脉血氧饱和度(S_aO_2)。结果1.0 MAC组和0.5 MAC组外周血S-100β水平,1.0 MAC组海马组织Casp_ase-3、pro-BDNF、p75^(NTR)蛋白质含量,以及0.5 MAC组海马组织Casp_ase-3、p75^(NTR)蛋白质含量均显著高于对照组(P值均<0.05);1.0 MAC组外周血S-100β水平显著高于0.5 MAC组(P<0.05),海马组织Casp_ase-3、pro-BDNF、p75^(NTR)蛋白质含量与0.5 MAC组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。麻醉后4周,1.0 MAC组和0.5 MAC组小鼠的穿越原平台位置次数和平台所在象限停留时间均显著少于对照组同时间(P值均<0.05)。麻醉后12周,1.0 MAC组和0.5 MAC组小鼠的平台所在象限停留时间均显著少于对照组同时间(P值均<0.05),1.0 MAC组小鼠的穿越原平台位置次数显著少于0.5 MAC组和对照组同时间(P值均<0.05)。麻醉前、七氟烷1.0 MAC麻醉1或2h、七氟烷0.5MAC麻醉1或2h小鼠的动脉血pH值、p_aO_2、p_aCO_2、S_aO_2的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论七氟烷可损伤发育期海马神经元,使海马p75^(NTR)含量发生改变。降低吸入七氟烷的体积分数可减轻成年后学习记忆障碍。

低亲和性神经营养素受体p75在人胚胎视网膜中的表达

p75神经营养素受体在视网膜的发育以及再生过程中发挥着重要的作用 ,而在人类视网膜中的分布状况尚未被研究 .利用免疫组织化学方法 ,在光镜水平下确定了 p75在人胚胎发育 5、 6和 7个月的视网膜中的分布情况 .在视网膜神经节细胞层出现最强的p75免疫阳性反应 ,在其他各层也有较弱的免疫阳性反应 .在胚胎 6、 7月的视网膜中 ,主要由M櫣ｌｌｅｒ细胞的终足构成的内界膜上出现了比较强的 p75表达 .p75在人胚胎视网膜中的分布情况与大鼠视网膜中很类似 ,主要表达在M櫣ｌｌｅｒ细胞 ,在神经节细胞上也可能有表达 .

NGF与TrkA受体在儿童膀胱过度活动症中的研究进展

神经生长因子(NGF)因其在神经细胞的存活、生长以及分化过程中发挥重要作用而得到广泛研究。它分布于机体的各处,根据所结合受体发挥不同的病理生理作用。原肌球蛋白相关激酶A(TrkA)是其高亲和力受体,诸多研究表明NGF在与其结合后,根据其下游不同的信号转导通路而发挥不同作用。NGF与其结合后还对体内发生的其他信号转导通路有交叉影响作用。本文从不同的疾病症状对NGF与TrkA结合后的信号转导通路进行综述,从而探讨NGF/TrkA信号通路在儿童膀胱过度活动症的作用。

P75^(NTR)的研究进展

P75^(NTR)是神经营养素的低亲和力受体,近年来研究认为它具有逆行转输神经营养素、选择相应的神经营养素、调节神经营养因子的酪氨酸激酶受体的信号传递和介导细胞凋亡等方面的功能。另外P75^(NTR)与TrkA之间存在着相互抑制的关系;而且有人认为脑内Trks表达和功能异常及其与P75^(NTR)的关系失衡可能对阿尔茨海默病的病理发展起重要的作用。

p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达

目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC3中表达。方法:运用RTPCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC3细胞中,经G418筛选后,用RTPCR、间接免疫荧光化学和细胞免疫组织化学法在转录和翻译两个水平上检测表达产物。结果:酶切和测序证实所获得的重组质粒包含-p75完整基因;在转染pcDNA3.1(+)-p75的PC-3细胞中检测到转录和翻译产物。结论:成功地构建了-p75真核表达质粒并在PC-3细胞中表达,为深入研究p75在前列腺癌中的生物学功能奠定了基础。

神经营养因子低亲和力受体——P75NTR

P75NTR为神经营养因子低亲和力受体 ,在神经系统等许多组织中表达 ,为肿瘤坏死因子超家族第一个成员 ,它与NGF等神经营养因子以相似亲和力结合。生物学作用主要包括两个方面 ,与高亲和力受体 (Trk)协同作用 ,与细胞凋亡有关。

p75NTR、LINGO-1、miR-23a-3p在脑出血中的表达及与病情严重程度相关性研究

目的分析神经营养因子受体p75(p75NTR)、LINGO-1、患者血清微RNA-23a-3p(mi R-23a-3p)在脑出血患者中的表达及与病情严重程度的相关性。方法选取脑出血患者132例作为脑出血组,另选取健康人80例作为健康组。采用实时荧光定量法检测p75NTR、mi R-23a-3p表达量,采用Western Blot检测LINGO-1表达量,分析三者在脑出血中的表达及与病情严重程度的相关性。结果与健康组相比,脑出血组p75NTR、LINGO-1、miR-23a-3p表达升高(均P<0.05)。随着脑出血严重程度的加重,p75NTR、LINGO-1、miR-23a-3p的升高加剧(均P<0.05),重度脑出血>中度脑出血>轻度脑出血患者(均P<0.05)。p75NTR、LINGO-1、mi R-23a-3p为影响脑出血严重程度的因素(均P<0.05)。相关性结果显示,p75NTR与LINGO-1正相关(P=0.479,P<0.05);p75NTR与miR-23a-3p正相关(=0.388,P<0.05);LINGO-1与mi R-23a-3p正相关(=0.361,P<0.05)。结论p75NTR、LINGO-1、miR-23a-3p在脑出血中表达升高,且与患者疾病严重程度相关,可作为评估患者疾病严重程度的指标。

神经生长因子及其受体在人胚胎结肠神经系统中的表达与分布

目的:研究人胚胎结肠神经系统的发育过程中神经生长因子(NGF)与其两个受体TrkA、P75NTR在结肠神经系统中的分布及与结肠神经系统发育的关系。方法:采用一抗为PGP9.5、NGF、TrkA、P75NTR的免疫组织化学技术,显示结肠神经系统中的神经元。结果:随着胚胎结肠神经系统的发育,P75NTR表达水平不断下降,而NGF、TrkA表达水平不断上升,P75NTR与NGF、TrkA的比例在不断变化。结论:NGF、TrkA、P75NTR参与了结肠神经系统的发育。

神经营养因子受体蛋白在受激光损伤视网膜中的表达

目的探讨TrkA、TrkC和p75NTR受体蛋白在激光损伤视网膜中的表达及意义。方法采用Wistar二级大鼠分别于532nm调Q倍频Nd:YAG激光损伤后12h、24h、3d、7d、14d、28d取眼球,用HE染色、免疫组织化学染色观察视网膜组织形态及TrkA、TrkC和p75NTR蛋白在激光损伤视网膜中的变化。结果TrkA、TrkC和p75NTR在激光损伤视网膜时均有表达,且呈动态变化。TrkA主要分布于视网膜内侧的节细胞核、M櫣ller细胞内侧端突起及内核层内侧端其他细胞(如双极细胞);TrkC主要分布于外核层,位于细胞浆中;p75NTR主要分布于外核层M櫣ller细胞外侧端突起。结论TrkA、TrkC和p75NTR受体表达参与激光损伤视网膜的病理过程。

大鼠神经元凋亡相关碱性蛋白ARBP cDNA的克隆和功能

利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法 ,得到凋亡相关碱性蛋白 (ARBP)的全长序列 ,进而构建了其真核表达体系以了解其功能 .ARBP的全长cDNA序列为 90 1bp ,其开放读码框架编码 10 9个氨基酸残基 .免疫组化分析表明 ,ARBP蛋白在大鼠体内有广泛的分布 .在R2L1细胞中转染ARBP反义cDNA表达载体后 ,既可以促进细胞增殖 ,又可以抑制去血清诱导的细胞凋亡 .因而 ,ARBP蛋白对神经元细胞的凋亡具有重要的调节作用 .

p75神经营养因子受体在鳞状细胞癌中的表达

p75神经营养因子受体（p75）是神经营养因子（neurotrophin，NT）的两类受体中的低亲和力受体，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员之一，广泛分布于神经系统及众多非神经系统的组织及肿瘤细胞中。在大多数细胞中，p75能以近似相同的亲和力与所有的配体即NT结合，这包括脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophin faetor，BDNF）、NT3、NT4及NT5等。

寻常性银屑病皮损中神经生长因子受体P75^(NTR)和TrkA的表达

目的探讨神经生长因子受体P75^(NTR)和TrkA在寻常性银屑病发病机制中的作用。方法应用原位杂交和免疫组化技术对38例寻常性银屑病患者(进行期21例,静止期17例)皮损区、非皮损区及10例正常人皮肤组织中P75^(NTR)和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果与正常人比较,寻常性银屑病皮损及非皮损区P75^(NTR)和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P＜0．01)；进行期患者皮损与非皮损区P75^(NTR)和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平分别高于静止期(P＜0．01)。结论神经生长因子受体P75^(NTR)和TrkA mRNA及蛋白水平在进行期、静止期寻常性银屑病皮损及非皮损区的不同表达,提示神经生长因子可能参与了银屑病的发病。