肾被膜下胰岛移植治疗1型糖尿病模型小鼠的研究

目的观察经肾被膜下小鼠胰岛移植模型改良方法的移植效果。方法采用胆总管内逆行灌注联合胰腺离体多点灌注法消化胰腺,镜下手工挑选胰岛细胞,分别用台盼蓝染色检测活性,双硫腙(DTZ)染色检测纯度,葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测分离提取胰岛的功能。链脲佐菌素170 mg/kg腹腔内注射,建立1型糖尿病小鼠模型;空白对照组(n=13),实验组(n=13)为1型糖尿病模型小鼠并给予同种异体胰岛细胞肾被膜下移植,移植术后监测随机血糖,移植后第10天行葡萄糖耐量检测,移植后第29天切除实验组左肾行HE染色观察移植物情况。结果每只小鼠可以获得(200.23±30.18)个胰岛细胞团,且纯度和活性都>90%;高糖组每个胰岛素释放量为(1.98±0.20)ng/胰岛,低糖组检测每个胰岛素释放量为(0.69±0.11)ng/胰岛,高糖组为低糖组的2.87倍(P<0.05);移植术后实验组血糖第1、2天逐步下降,并在第3天全部降至正常,移植术后第4、6、7、14、21、28天两组血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组摘除左肾术后血糖比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组糖耐量比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组切除左肾后血糖持续升高,HE染色切片显示肾被膜下胰岛移植物表面和内部已有新生血管生成存活良好。结论采用改进后分离和移植胰岛方法可以保证获得高质量的胰岛细胞,提高胰岛产量及移植模型的成功率,是一种高效稳定的技术方法,为下一步实验药物干预筛选奠定了基础。