人胎肝中低分子抑瘤物的分离纯化、结构鉴定及其对肿瘤细胞生长的选择性抑制作用

在胎儿组织中存在一类低分子肿瘤抑制物。胎肝细胞的甲醇－丙酮提取物中保留有大部分抑瘤活性。用体外液体培养条件下对人急性粒系白血病细胞系（ＨＬ－６０）的抑制作用为指标，跟踪指导分离过程。提取物经反相Ｃ１８中压液相色谱、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０凝胶色谱及氨基键合相高效液相色谱分离得到一纯活性物质，经ＮＭＲ和ＭＳ鉴定为７－酮基胆固醇（７－ｋｅｔｏｃｂｌｅｓｔｅｒｏｌ，７－ＫＣ）。体外琼脂培养条件下７－ＫＣ对小鼠ＷＥＨ１－３和Ｓ－１８０细胞较对正常小鼠骨髓粒一巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用。７－ＫＣ对ＨＬ－６０细胞增殖较对正常人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ有更强的抑制作用。

低分子抑瘤物净化白血病细胞的实验研究及临床应用

胎儿肝脏中存在一类小分子量（分子量＜１０ｋＤ）的肿瘤抑制物，其在体外对ＨＬ６０等多种白血病细胞系具有明显的选择性抑制作用，对急性白血病患者骨髓的白血病祖细胞也具有这种选择性抑制效果；分离纯化获得两种天然低分子抑瘤物（７ＫＣ和７βＨＣ）和一种外源性低分子抑瘤物（ＤＢＰ）；研究证实其抑制白血病细胞生长的作用机制是诱导白血病细胞凋亡；将其应用于白血病及恶性淋巴瘤自体骨髓移植时的体外净化，完成１２０余例自体骨髓移植，均获得造血重建，长期随访获得满意疗效。

胎儿肝脏中低分子抑瘤物对肿瘤细胞体外作用的初步研究

胎儿肝脏中低分子抑瘤物对肿瘤细胞体外作用的初步研究白海，吴祖泽兰州军区总医院（兰州７３００５０）我们以往工作表明，在人胎肝中存在着一类低分子抑瘤物［１，２］。作者应用细胞生物学方法对其作了进一步研究。材料与方法（一）人肿瘤细胞系：人肝癌细胞株用第二军...

胎脑低分子抑瘤物对白血病细胞作用的研究

目的 :探讨人胎脑低分子肿瘤抑制物对白血病细胞的作用机制及其细胞内游离Ca2 +浓度 ([Ca2 +]i)的变化。方法 :通过超滤技术分段提取胎脑低分子抑瘤物 ,采用光镜、相差显微镜和流式细胞仪检测凋亡 ,Fura 2荧光负荷技术测 [Ca2 +]i。结果 :胎脑低分子抑瘤物可明显抑制K 5 6 2白血病细胞的增殖 ,作用 4h后可出现典型的凋亡改变。白血病细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高。结论 :胎脑低分子抑瘤物可能是通过诱导白血病细胞凋亡而抑制其增殖 ,在白血病细胞凋亡过程中 [Ca2 +]i升高。

苦参联合胎肝低分子抑瘤物抗白血病及其机制

目的 :探讨苦参 (SF)、胎肝低分子抑瘤物 (LMW NTS)联合用药对正常人骨髓粒 巨噬系造血祖细胞(CFU GM )和急性髓性白血病细胞的影响及其作用机制。方法 :采用CFU GM集落培养、细胞液体培养、Wrigh giemsa染色、3H TdR掺入实验、DNA片段凝胶电泳和RT PCR等方法 ,观察SF和LMW NTS联用对白血病的作用。结果 :SF和LMW NTS联用 ,明显提高抑制白血病细胞增殖的能力 ,促进白血病细胞的凋亡 ,诱导白血病细胞中原癌基因c Myc的下调 ,抑制正常造血祖细胞CFU GM的作用明显低于抑制白血病细胞的作用。结论 :联合用药抗白血病的效果 。

胎肝天然低分子抑瘤物对肿瘤细胞增殖和分化的影响

目的 :观察胎肝天然低分子抑瘤物(LMW NTS)对不同组织来源的肿瘤细胞增殖和分化的作用。方法 :采用MTT比色法和 3H TdR掺入技术 ,测定培养中的肿瘤细胞DNA合成和线粒体琥珀酸脱酶活力 ,间接反映肿瘤细胞的增殖抑制和诱导分化情况。结果 :LMW NTS对受试的4种肿瘤细胞都有生长抑制作用 ,但作用强度有所不同 ,对来源于造血系统的肿瘤细胞作用最为显著。不同浓度的LMW NTS对肿瘤细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力的影响不同 ,低浓度时表现为促进作用 ,而高浓度时表现为轻度抑制作用。结论 :胎肝低分子抑瘤物能够抑制不同种类的肿瘤细胞的增殖 。

人类天然低分子抑瘤物净化自体骨髓移植治疗急性白血病

我们用人胎儿肝脏中分离出一种天然低分子物质，暂称人类天然低分子抑瘤物(Lmw-Nts)为净化剂，以Dexter骨髓细胞体外液体培养体系为基础，体外净化自血病细胞后自体骨髓移植治疗12例急性自血病。男性7例，女性5例。年龄10-43岁；ALL4例，ANLL8例，CR；6例，CR2 2例，CR至移植中位时间5个月。采集自体骨髓血(NC>2．5×10^3/kg)，经羧甲基淀粉沉降红细胞，离心洗涤后骨髓有核细胞加入体外净化培养体系7天，

新生牛肝中低分子抑瘤物体内抑瘤作用的研究

采用离子交换柱分离分子量小于1.0 kD的新生牛肝提取液,得到9份样品.在体外抑制肿瘤细胞增殖的基础上,选用体外抑瘤明显的离子交换柱层析获得的〈5〉组分进行体内对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长抑制实验.并从白细胞数、胸腺指数和脾指数三个角度分析了低分子抑瘤物对荷瘤小鼠免疫功能的影响;同时用斑点印记法,比较荷瘤前后重要脏器和肉瘤细胞内p27/k ip1细胞周期调控蛋白表达水平的变化.实验结果表明低分子新生牛肝提取液和经离子交换柱层析分离得到的〈5〉组分对荷S-180肉瘤小鼠的肉瘤生长有明显的抑制作用,实验同时发现来源于新生牛肝中的低分子抑瘤物,可通过增强荷瘤小鼠的免疫力,升高肉瘤细胞中的p27/k ip1蛋白表达水平的方式抑制肉瘤细胞的增殖,阻碍瘤细胞向正常组织的浸润和转移.

人胎肝中低分子天然抑瘤物对小鼠肉瘤S-180作用的研究

从人胎儿肝脏中分离出一种分子量较小的抑瘤物质(FLS-MeOH),观察了它对小鼠肉瘤S-180细胞生长的抑制效应。在体外琼脂培养中,当FLS-MeOH浓度达到300μg/ml时,可完全抑制S-180细胞的集落形成;给荷瘤小鼠每日注射FLS-MeOH8mg/g体重,共20d,可明显延长小鼠的存活时间,部分小鼠可以无病存活。这些结果说明FLSMeOH在体内外均有明显的抗肿瘤活性,而且具有分子量小、无组织和种系特异性,以及对肿瘤细胞不可逆的毒性作用等特性。

人胚胎脑组织中低分子肿瘤抑制物的实验研究

人胚胎脑组织提取液可以抑制人白血病细胞系的生长。分析表明:肿瘤抑制活性主要分布在小于10kDa组分,经Sephadex-G25凝胶过滤可初步分离为单一组分。这种低分子肿瘤抑制物具有广谱的抗肿瘤效应,在体外可以抑制人白血病、肝癌、胃癌细胞系和小鼠粒、单核和淋巴系白血病细胞,但对人骨髓CFU-GM和小鼠骨髓CFU-GM的抑制作用较弱,说明人胎脑低分子肿瘤抑制物对肿瘤细胞具有一定的选择性抑制作用。

胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物的制备及其抗肿瘤作用

目的 :探讨胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物 (LMW NTS)的理化性质、生物学特性、急性与长期毒性作用。方法 :从胎牛肝脏中分离提取出LMW NTS ,用高压液相色谱仪测定其分子量 ,紫外分光光度法测定OD2 6 0 及OD2 80 值。采用体外双层软琼脂细胞培养及腹腔注射LMW NTS治疗荷瘤小鼠 ,观察其体内外抗肿瘤作用、急性与长期毒性作用。结果 :胎牛肝细胞LMW NTS的分子量为 70 0 0～ 80 0 0 ,属核酸和多肽类物质 ,性质稳定。体外培养条件下胎牛肝细胞LMW NTS对小鼠S 180细胞较对正常小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用 ;腹腔注射胎牛肝细胞LMW NTS治疗荷瘤小鼠能显著延长小鼠寿命 (P <0 .0 0 1)。毒性试验证实胎牛肝细胞LMW NTS无毒副作用 ,长期应用安全。结论 :胎牛肝细胞LMW NTS是一类分子量小、在体内外均有明显抗肿瘤作用、应用安全可靠的抑瘤物。

胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物的生物学特性及抗肿瘤作用

[目的]探讨胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物 (LMW NTS)的理化性质、生物学特性及体内外抗肿瘤作用。[方法]从胎牛肝脏中分离提取出LMW NTS。用高压液相色谱仪测定其分子量 ,紫外分光光度法测定OD260及OD280值。采用体外双层软琼脂细胞培养及腹腔注射LMW NTS治疗荷瘤小鼠 ,观察其体内外抗肿瘤作用。[结果]胎牛肝细胞LMW NTS的分子量为7000KD～8000KD ,属核酸和多肽类物质 ,性质稳定。体外琼脂培养条件下胎牛肝细胞LMW NTS对小鼠S180 细胞较对正常小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用。腹腔注射胎牛肝细胞LMW NTS治疗荷瘤小鼠能显著延长小鼠存活期(P<0.001)。[结论]胎牛肝细胞LMW NTS是一类分子量小、在体内外均有明显抗肿瘤作用的抑瘤物。

人胎肝细胞和胎牛肝细胞低分子抑瘤物对小鼠腹腔积液型S-180细胞抑制作用的比较

目的 :对比观察人胎肝细胞和胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物 (L MW- NTS)对小鼠腹腔积液型 S- 180细胞生长的抑制效应。方法 :分别从胎儿肝细胞和胎牛肝细胞中分离提取出 L MW- NTS。采用体外双层软琼脂培养法检测它们对 S- 180细胞集落生成的抑制作用 ;给两组荷瘤小鼠每日分别腹腔注射人胎肝细胞和胎牛肝细胞L MW- NTS 0 .5 m g/只 ,每日 1次连续注射 2 1天 ,观察小鼠的寿命。结果 :人胎肝细胞和胎牛肝细胞 L MW- NTS对S- 180细胞的生长均有明显的抑制作用 ,且抑制作用随 L MW- NTS浓度增高而增强 ;腹腔注射治疗荷瘤小鼠均能显著延长小鼠寿命。结论 :人胎肝细胞和胎牛肝细胞中均存在着一种作用相似的 L MW- NTS,在体内外均具有明显的抗肿瘤活性。

胎肝低分子抑瘤物和维生素A酸对HL-60细胞中c-myc癌基因表达的影响

胎肝中存在着一类低分子抑瘤物,可明显抑制 HL-60细胞的增殖。为探讨其作用机制,本实验对 HL-60细胞经胎肝低分子抑瘤物和维生素 A 酸作用后 c-myc 癌基因的表达水平进行了检测。结果表明,维生素 A 酸可明显抑制 HL-60细胞中 c-myc 基因的表达,而胎肝低分子抑瘤物却无明显作用。

犊牛脾脏低分子提取物抗肿瘤作用研究

[目的]研究犊牛脾脏提取物的体内抗肿瘤活性。[方法]采用超滤和离心技术制备脾脏提取物,选取移植型S180荷瘤小鼠为动物模型,腹腔注射脾提取物,观察小鼠存活时间,并计算抑瘤率。[结果]脾脏提取物显著增加S180荷瘤小鼠的存活率,并抑制肿瘤的生长,治疗第15天,最高抑瘤率达到61%。[结论]脾脏提取物是一种分子量小且安全有效的抗肿瘤活性物质。

胎脑低分子提取物的抑瘤作用及其对NK细胞杀伤肿瘤细胞的影响

采用超滤技术分段提取1～3万、<1万、<5千、<3千分子量的胎脑提取物,检测其对K_(562)、L_(1210)肿瘤细胞株杀伤作用。发现<3千分子量的胎脑提取物其杀伤活性最强。为评估此种小分子提取物对细胞免疫作用的影响,我们测定了小分子提取物对NK细胞杀伤肿瘤细胞的作用,发现小分子抑瘤物可促进其对肿瘤细胞的杀伤作用。

体外液体培养联合天然抑癌物净化后自体骨髓移植治疗晚期淋巴瘤

大剂量化疗和放化疗后自体骨髓移植(ＡＢＭＴ)已广泛应用于某些实体瘤的治疗,尤其是淋巴瘤,取得较满意的疗效[1]。尽管自体骨髓回输提供了足够的造血干细胞,但因骨髓中存在的肿瘤细胞是移植后复发的重要原因之一,有报道骨髓穿刺、活检侵犯骨髓者达15%～63%,用多聚酶链反应...

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对正常造血细胞和髓系白血病细胞生长的影响。筛选出的低剂量（５０μｇ／ ｍｌ）抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，而对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随后作自体骨髓移植均获造血重建。