水溶性低分子质量壳聚糖致鼠脱毛的毒理性研究

通过对水溶性低分子质量壳聚糖致鼠脱毛的毒理性研究,评价低分子质量壳聚糖的潜在毒性.实验包括致小鼠脱毛观察、生理指标检测、组织切片等.结果表明,水溶性低分子质量壳聚糖致鼠脱毛与肾毒性相关.

低分子质量壳聚糖的制备及质量控制

目的:制备低分子质量的壳聚糖并建立相应的质量控制手段。方法:采用纤维素酶水解技术,以脱乙酰甲壳素为原料制备低分子质量壳聚糖,利用超滤技术分离不同分子质量壳聚糖;以凝胶渗透色谱法测定壳聚糖分子质量,由水解比色测定法测定壳聚糖的纯度与含量。结果:通过控制酶水解的时间,并采用截留分子质量分别为50 kD和10 kD的中空纤维素膜进行截流与浓缩,得到低分子质量壳聚糖;经凝胶渗透色谱法测定,其平均分子质量为20 kD,纯度(96.60±1.56)%。结论:采用酶解法制备低分子质量壳聚糖反应条件温和、过程容易控制,用超滤方法可实现不同分子质量水解产物的有效分离;采用凝胶渗透色谱法和水解比色法测定,可进行水解壳聚糖质量的有效控制。

低分子质量壳聚糖对鲤鱼生长和消化酶活性的影响

旨在探讨低分子质量壳聚糖(low molecular weight chitosan,LMWC)对鲤鱼(Cyprinus carpio)生长和消化酶活性的影响。采用单因子浓度梯度法,设基础饲料组和质量分数分别为0.25%、0.50%、0.75%、1.0%LMWC组;分别在30、45、60d对不同组鲤鱼质量增加率、投饵系数以及肝胰脏和肠道淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的活性进行动态分析。结果表明:随着LMWC添加量增加和时间延长,与对照组相比,鲤鱼质量增加率、淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性都呈现逐渐升高的趋势,投饵系数呈现逐渐下降的趋势。在45、60d时0.75%LMWC组鲤鱼的质量增加率,淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活性相对于对照、0.25%、0.50%、1.0%LMWC组,升高趋势最为明显。1.0%LMWC组鲤鱼随着时间延长,质量增加率和消化酶(淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶)活性的升高趋势逐渐变缓;饲料中添加不同质量分数的LMWC对鲤鱼消化酶活性的影响不同,0.75%为LMWC的最适添加量。

低分子质量壳聚糖季铵盐改性亚麻织物活性染料染色机理

使用自制的低分子质量壳聚糖季铵盐对亚麻织物进行改性,绘制改性后亚麻织物活性染料染色上染速率曲线和吸附等温线,并进行热力学和动力学的拟合、计算.结果发现:改性后亚麻织物活性染料染色上染速率曲线符合准二级模型,较符合准一级模型,属于非定位多分子层吸附;吸附等温线符合Langmuir(朗格缪尔)模型,较符合Freundlich(弗罗因德利希)模型,同时存在定位吸附和非定位吸附,染色平衡吸附量随着温度的升高而降低;亲和力随着染色温度的升高而降低,染色热为-27.586 k J/mol,染色过程是放热反应,染色熵为-0.056 5 k J/(mol·K),染料在纤维上的取向程度较小.

低分子质量壳聚糖对镉胁迫引起河南华溪蟹氧化损伤的保护作用

采用浸浴法,研究低分子质量壳聚糖(LMWC)对镉胁迫引起河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)肝胰腺组织中镉积累情况、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响,旨在评价LMWC的保护作用。设置镉处理组(29、58、87mg/L)、LMWC组(20、40、80mg/L)、LMWC组(20、40、80mg/L)和镉(58mg/L)联合处理组,对照组;处理时间为96h。结果显示:与对照组相比,LMWC单独作用下,SOD活性和MDA含量变化不显著,不会引起肝胰腺组织脂质过氧化。但58mg/L镉单独作用下,SOD活性显著降低,MDA含量显著增加,降低了机体抗氧化能力。镉积累量随着镉浓度升高逐渐增加,加入LMWC后镉积累量显著降低,且具有质量浓度-效应关系。GST活性和GSH含量随着镉质量浓度升高逐渐降低,而加入LMWC后其水平比镉染毒组(58mg/L)显著升高。LMWC对镉胁迫引起的肝胰腺组织氧化损伤可以起到良好的保护作用。

低相对分子质量壳聚糖季铵盐碘络合物性质

壳聚糖(CTS)氧化降解得低相对分子质量壳聚糖(CTS′),接入3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CTA)单体得低相对分子质量壳聚糖季铵化衍生物(CTS′-CTA).CTS′-CTA与单质碘能生成稳定络合物(CTS′-CTA-I2).在络合物溶液中,络合物呈一定规则形态,粒径主要分布在1 000nm左右.CTS′-CTA-I2与壳聚糖和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)混合制备凝胶薄膜(CTS-[CTS′-CTA-I2]-PVP),扫描电子显微镜(SEM)显示碘络合物均匀地分布在凝胶薄膜上.CTS-[CTS′-CTA-I2]-PVP凝胶薄膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌环直径均大于15mm,为高度敏感.

低相对分子质量壳聚糖/多元羧酸对亚麻织物的防皱整理

使用低相对分子质量壳聚糖和多元羧酸(柠檬酸和马来酸酐)联合整理亚麻织物,改善其防皱性能,探讨低相对分子质量壳聚糖用量、柠檬酸用量、马来酸酐用量、次亚磷酸钠用量、焙烘温度、焙烘时间对织物褶皱回复角和织物经向断裂伸长率的影响.得出最佳防皱整理工艺如下:低相对分子质量壳聚糖12.5%(o.w.f);柠檬酸15%(o.w.f);马来酸酐12.5%(o.w.f);次亚磷酸钠20%(o.w.f);焙烘温度180℃;焙烘时间180 s.将最佳工艺与未整理及单独整理工艺进行对比,发现低相对分子质量壳聚糖与多元羧酸联合整理后的织物防褶皱性能及耐久性最好,白度和柔软度有所下降,机械性能下降明显.整理后的织物表面变得更加光滑,有涂覆感.

非专一性酶纤维素酶降解壳聚糖的研究

采用非专一性酶纤维素酶降解壳聚糖，探讨了不同条件对壳聚糖降解的影响．结果表明：在pH4．0～8．0、温度40～50℃、壳聚糖与酶比值为5：1～20：1范围内，该酶能达到较好的降解效果，在pH5．0、温度50℃、壳聚糖与酶比值为10：1的条件下，降解5min、30min、60min和240min，壳聚糖的平均相对分子质量从酶解前的5．18×10^5分别降到8．58×10^4、7．02×10^4、5．23×10^4和2．44×10^4，降解率分别为初始值的16．5％、13．5％、10．9％和4．7％．从降解情况可以得到酶降解过程中的几个特点：水解初期，溶液粘度迅速下降，说明酶以内切方式作用；提高酶浓度可加快反应速度．

装载黄芩苷的溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖纳米凝胶的制备及表征

目的基于蛋白-多糖纳米凝胶的制备技术,通过低相对分子质量壳聚糖对溶菌酶的修饰以及对环境因素的调节筛选,控制溶菌酶的自组装行为,制备一种绿色环保的具备核壳结构的溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖纳米凝胶,从而达到减小粒径,提高包封率和载药量的目的,使其更有利于肾靶向。方法利用Maillard反应将溶菌酶与低相对分子质量壳聚糖按不同比例合成溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖枝接物,通过SDS-PAGE蛋白电泳来优选出产量最高的合成比例;对合成的产物进行内源荧光、紫外测定等表征,并通过2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro-benzenesulfonic acid,TNBS)法测定接枝率;以粒径为评价指标,对溶菌酶浓度,反应体系pH值、加热温度等条件进行筛选优化,得到空白纳米凝胶最佳合成条件;选取适宜的载药方法,得到了载黄芩苷纳米凝胶。结果合成纳米凝胶的最佳工艺为溶菌酶与低相对分子质量壳聚糖比例1∶2、反应体系pH值11、溶菌酶-壳聚糖接枝物质量浓度为0.6 mg/mL、加热温度71℃、加热时间51 min。得到的溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖枝接物接枝率为(24.7±2.9)%,空白纳米凝胶的粒径范围为16~120 nm、平均粒径为49.02 nm、PDI为0.132,载黄芩苷纳米凝胶的包封率为(95.00±2.54)%、载药量为(17.00±1.26)%。结论通过Maillard合成了溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖纳米凝胶,并找到了最优的合成工艺。制备的纳米凝胶包封率高,粒径小,分布均匀,缓释效果明显。

低相对分子质量壳聚糖及其纳米粒对三七总皂苷肠道渗透性的影响

目的利用人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞模型,考察低相对分子质量壳聚糖(LMW-CTS)及其纳米粒(LMWCTS-NPs)对三七总皂苷(PNS)肠道渗透性的影响。方法采用固相化壳聚糖酶酶解结合超滤分离技术制备LMW-CTS,渗透凝胶色谱法(GPC)测定其相对分子质量(Mw)。离子凝胶法制备LMW-CTS-NPs,并通过扫描电镜、纳米粒度分析和红外光谱进行表征。建立并验证Caco-2细胞模型,评价LMW-CTS和LMW-CTS-NPs对PNS渗透性的影响。结果 LMW-CTS平均均相对分子质量为5 760,多分散系数为1.42。LMW-CTS-NPs形貌圆整,粒度分布窄,平均粒径为115.5 nm,Zeta电位为+37.1 mV。PNS原料药各组分的表观渗透系数(Papp,AP→BL)均小于1×10-6 cm/s;LMW-CTS组中,三七皂苷R1(R1)和人参皂苷Rg1 (Rg1)的Papp分别提高17.83%和20.29%,其他组分则无明显提升;而LMW-CTS-NPs组R1、Rg1、人参皂苷Re (Re)、人参皂苷Rb1 (Rb1)和人参皂苷Rd (Rd)的Papp比对照组分别提高35.66%、23.28%、29.41%、37.99%和36.00%。结论 LMW-CTS可明显促进R1和Rg1的肠道渗透性,但对Re、Rb1和Rd无明显促进作用;而LMW-CTS-NPs显著提高PNS中主要单体皂苷组分的渗透性,进一步改善PNS的肠道通透性。

低相对分子质量壳聚糖-乙酰半胱氨酸偶合物肾脏靶向递送系统的研究

目的合成低相对分子质量壳聚糖-乙酰半胱氨酸(LMWC-NAC)偶合物,并且评价其在急性肾损伤模型动物体内的肾脏靶向性及疗效。方法以碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺为缩合剂,将乙酰半胱氨酸通过酰胺反应嫁接到低相对分子质量壳聚糖上,并且采用核磁共振进行结构确证。在体外细胞实验中,考察LMWC-NAC偶合物被肾小管上皮细胞(HK-2)摄取的能力以及参与摄取过程的megalin受体。此外,用荧光材料吲哚菁绿标记LMWC-NAC偶合物,并对其在裸鼠体内的分布情况进行考察。腹腔注射脂多糖(20 mg·kg^(-1))构建急性肾损伤动物模型,给药72 h后检测各组小鼠的血肌酐、血尿素氮、炎症因子(TNF-α和IL-1β)、氧化应激(MDA),HE染色观察肾脏组织的病理学改变。结果通过酰胺反应得到LMWC-NAC偶合物,体外实验证实其通过megalin受体的介导被HK-2细胞摄取,而体内分布实验表明,LMWC-NAC偶合物在肾脏组织具有较好的分布,AKI小鼠尾静脉注射LMWC-NAC偶合物后,血清尿素氮和肌酐得到显著改善(P<0.01),炎症因子和氧化应激指标也显著下降(P<0.01),减轻肾脏病理损伤。结论 LMWC-NAC偶合物对肾脏具有较好的靶向性和改善其功能的能力,表明其可用于急性肾损伤的治疗。

窄谱低相对分子质量壳聚糖的制备

目的：为了制备特殊用途的壳聚糖衍生物质．必须将其相对分子质量控制在4000～7000Da之间，制成窄谱低相对分子质量壳聚糖。方法：采用化学降解方法制成分子质量参差不齐的壳聚糖混合物，然后通过多次分离去除较高及较低分子．最后得到目标产物。结果：采用凝胶过滤色谱（GFC）捡测分析．得到相对分子质量4000～7000Da壳聚糖。结论：运用化学降解及多级分离方法可以制备相对分子质量可控的目标分子质量壳聚糖。

Er(Ⅲ)-CTS′配合物的合成、表征及生物功能研究

合成了Er(Ⅲ)与低相对分子质量壳聚糖(CTS′)配合物Er(Ⅲ)-CTS′。通过UV光谱、IR光谱、1 H核磁共振、热稳定性对其进行表征,并对配合物的抑菌性和作为抗肿瘤药物载体进行初步探讨。结果表明:Er(Ⅲ)与壳聚糖的-NH2和-OH进行配位,Er(Ⅲ)-CTS′的热稳定性低于CTS′。CTS′与Er(Ⅲ)-CTS′对革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌的最低抑菌浓度约为4g/L左右。Er(Ⅲ)-CTS′负载盐酸阿柔比星诱导HL60白血病细胞株早期凋亡率较盐酸阿柔比星提高2.98%。

甘草酸-壳聚糖偶联物的合成及体外细胞摄取研究

目的制备甘草酸-壳聚糖偶联物并研究HK-2细胞对偶联物的摄取,为肾脏特异性递药系统构建奠定基础。方法通过甘草酸活性酯与壳聚糖的氨基反应,将壳聚糖与甘草酸共价结合生成偶联物;研究偶联物在木瓜蛋白酶缓冲溶液中的释药行为;采用异硫氰基荧光素标记甘草酸-壳聚糖偶联物,激光共聚焦显微镜观察HK-2细胞对偶联物的摄取情况。结果经红外光谱、核磁共振波谱法测定,确证了甘草酸-壳聚糖偶联物的化学结构;紫外分光光度法测得偶联物中甘草酸结合率达29.3%;体外释药结果表明,偶联物在木瓜蛋白酶缓冲液中缓慢持续地释放药物;偶联物与HK-2细胞孵育后可较快地为细胞所摄取。结论本实验成功合成了甘草酸-壳聚糖偶联物,该偶联物可递送甘草酸进入HK-2细胞并有望在肾脏部位缓慢持续释放药物,为肾脏特异性递药系统构建奠定了基础。

人参皂苷Rg_3二元固体分散体的制备及体外特性研究

该文以低相对分子质量壳聚糖和泊洛沙姆188为联合载体,采用溶剂法制备人参皂苷Rg3固体分散体,进行体外溶出试验,并通过差示扫描量热法(DSC)、扫描电镜(SEM)和X-射线衍射法(X-RD)进行物相分析。结果表明,低相对分子质量壳聚糖和泊洛沙姆188按2∶1制备的人参皂苷Rg3固体分散体60 min药物的体外累积溶出率达到90%以上,且药物以非晶状态分散于载体中。因此,以低相对分子质量壳聚糖和泊洛沙姆188为联合载体制备的人参皂苷Rg3固体分散体能够显著提高药物的溶出度,具有实际应用价值。