嗜水气单胞菌低分子质量蛋白的相关研究

以水产养殖中鱼类致病细菌-嗜水气单胞菌为材料,采用DS法对该菌的低分子质量蛋白(LMW)进行分离提取,LMW蛋白的纯度为90%,通过LC MS/MS分析鉴定了97个蛋白,其中理论分子质量小于25 ku的蛋白有57个,这些蛋白在蛋白合成转录、细胞代谢调控等方面都具有重要功能.实验结果表明,该方法在研究LMW蛋白中具有广阔的应用潜力.

以低分子质量蛋白尿为主要表现的遗传性肾小管疾病

遗传性肾小管疾病隐匿起病,缺乏特异性临床表现,极易漏诊、误诊。其中有相当一部分患者将进展至终末期肾病。现通过介绍几种以低分子质量蛋白尿为主要特点的遗传性肾小管疾病,以提高对此类疾病的认识,避免不必要的治疗。

IgA肾病与低相对分子质量尿蛋白的关系

目的观察IgA肾病患者尿蛋白相对分子质量与肾小管间质损害及临床指标之间的关系,探讨低相对分子质量尿蛋白在IgA肾病发病机制中的作用。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测34例同步行肾活检诊断明确的IgA肾病尿蛋白相对分子质量。结果据SDS-PAGE法,尿蛋白可分为4组类型:小球性尿蛋白组,生理性尿蛋白组,混合性尿蛋白23×103组,混合性尿蛋白10×103组。IgA肾病患者肾小管间质损害评分、24小时尿蛋白定量及血清肌酐(Scr)水平比较,混合性尿蛋白10×103组均较23×103组升高(P<0.05)。结论 SDS-PAGE分型10×103组尿蛋白对判断IgA肾病肾小管间质损害程度有临床意义,其作为无创性检测手段,可以作为判断IgA肾病肾小管间质损害程度的指标。

甘肃旱地春小麦及部分重要骨干亲本麦谷蛋白亚基组成分析

为明确甘肃主栽旱地春小麦品种资源的优质麦谷蛋白亚基组成及分布情况,选取高分子质量麦谷蛋白亚基Ax1/2*、Dx5、Bx7、By8、Bx14和低分子质量麦谷蛋白亚基Glu-A3d、Glu-B3b,采用STS分子标记的方法,对82份甘肃近年来育成的旱地春小麦品种(系)及部分重要骨干亲本进行检测。结果表明,82份供试材料中优质HMW-GS以Ax1/2*、5+10和7+8为主,分布频率分别为57.3%、31.7%和72.0%,14+15的频率为4.9%,在2份材料中检测到稀有亚基By8,频率为2.4%。LMW-GS中Glu-A3d、Glu-B3b频率分别为80.5%和42.7%。Glu-1 3个位点具优质亚基的小麦品种(系)共11个,Glu-3 2个位点具优质亚基的小麦品种(系)共31份。8份材料在5个位点都具有优质亚基。研究结果为改良甘肃旱地春小麦面筋质量、准确筛选优质种质资源和加快育种进程提供了重要依据。

维吾尔族妇女宫颈病变组织中HPV感染与低相对分子质量蛋白酶体2和7基因启动子甲基化的关系

目的探讨维吾尔族妇女宫颈病变及其人乳头状瘤病毒（humanpa pillomavirus，HPV）感染与低相对分子质量蛋白酶体（low molecular-weight protein，LMP）基因启动子区甲基化水平的关系和意义。方法利用专业软件设计LMP2和LMP7基因启动子区含CpG岛特异性PCR引物，对SiHa宫颈癌细胞DNA进行亚硫酸氢盐修饰、目的片段扩增、质粒载体克隆和测序，确定该区域所含CpG序列甲基化情况；收集维吾尔族妇女正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）和宫颈鳞癌（cervical squamous cell carcinoma，CSCC）患者新鲜组织和石蜡组织标本78例，并提取DNA，采用Sequenom MassARRAYDNA技术平台（质谱分析），定量分析LMP2和LMP7基因启动子甲基化水平，同时以HPV分型芯片鉴定HPV亚型，分析基因甲基化与HPV感染的关系；应用RT—PCR和免疫组织化学方法检测LMP2、LMP7mRNA和蛋白的表达，并分析蛋白表达与基因甲基化的关系。结果LMP2和LMP7基因相应目的片段各含有22个CpG位点，在SiHa宫颈癌细胞基因组DNA中，只有LMP7有2个位点发生甲基化。宫颈病变病理过程伴随着LMP7基因CpG片段甲基化水平改变，其在CSCC和CIN组织的甲基化率（0．1864±0．0893和0．0728±0．0548）高于正常宫颈上皮组织（0．0652±0．0488），差异有统计学意义（P〈0．05）。随着宫颈病变的加重LMP7mRNA和蛋白表达逐渐下调，各组间表达差异具有统计学意义（P〈0．05），LMP7蛋白表达随着该基因甲基化率增高而降低（F=8．69，P=0．035）。而LMP2蛋白表达在3组间差异无统计学意义（P〉0．05）。HPV分型芯片检出12种HPV基因型，其中HPV16感染率构成比为52／78（66．7％），HPV16亚型阳性与宫颈病变进程及LMP7基因甲基化率升高趋势正相关（t=1．996，P=0．049）。结论LMP7基因启动子区CpG岛甲基化是一种宫颈癌病变特异性改变，与HPV16感染可能存在密切关系。

麦谷蛋白与面条品质关系的研究

研究了酸可溶麦谷蛋白、酸不溶性麦谷蛋白、高相对分子质量麦谷蛋白亚基、低相对分子质量麦谷蛋白亚基对面条质构品质的影响.结果表明:酸不溶性麦谷蛋白能增强熟面条的硬度、粘结性、粘合性、咀嚼性、最大剪切应力和拉断力;低相对分子质量麦谷蛋白亚基能增强熟面条的硬度、粘合性、咀嚼性、回复性、拉断力和拉伸应变.

蛋白酶体亚基LMP-2、Survivin、Caspase-3在稽留流产绒毛及蜕膜组织中的表达

目的:检测稽留流产绒毛及蜕膜组织中蛋白酶体亚基低分子质量多肽-2(proteasome subunit low molecu-lar weight polypeptide 2,LMP-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate specific protease 3,Caspase-3)、生存素(Survivin)的表达,旨在探讨稽留流产的发病机制。方法:采用免疫组织化学染色方法检测30例稽留流产(实验组)患者绒毛及蜕膜组织中LMP-2、Caspase-3、Survivin的表达,并以30例正常早孕人工流产绒毛及蜕膜组织为对照组。结果:稽留流产组绒毛及蜕膜中LMP-2、Survivin的表达均低于正常早孕组,Caspase-3的表达则高于正常早孕组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组的绒毛及蜕膜Caspase-3与LMP-2及Survivin的表达均呈负相关,LMP-2与Survivin的表达呈正相关(P<0.05)。结论:LMP-2、Survivin及Caspase-3的异常表达在稽留流产的发生中起重要作用。

1BL/1RS易位系小麦谷蛋白和醇溶蛋白亚基组成、含量与主要品质性状关系的研究

从106个小麦品种(系)中,鉴定出了17个1BL/1RS易位系小麦品种,用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析了这些易位系小麦品种的醇溶蛋白(Glia)、高分子质量谷蛋白(HMW)、低分子质量谷蛋白(LMW)的组成特点,并对其蛋白质含量、湿面筋含量、沉淀值、稳定时间、形成时间等加工品质性状进行了分析,以期明确易位系小麦对加工品质性状影响的机理。结果表明,易位系小麦品种的醇溶蛋白和谷蛋白含量与非易位系品种相比存在显著差异,在沉淀值、稳定时间、形成时间等面筋质量性状上也存在显著差异。但两种蛋白的比例差异不显著。同时统计分析表明醇溶蛋白含量对易位系品种的品质影响较小,而谷蛋白含量,尤其是LMW含量,是影响1BL/1RS易位系品种加工品质变差的重要因素。

急性戊型肝炎患者尿液中低相对分子质量蛋白浓度的临床研究

近年来，临床上常用测定尿液中的低相对分子质量蛋白作为检测肾小管病变或损害的手段之一。尿液中的低相对分子质量蛋白的种类很多，但含量微小，任何一种或几种低相对分子质量蛋白排出增多，称为低相对分子质量蛋白尿。低相对分子质量蛋白尿多数情况下是肾小管重吸收功能损伤的结果。本研究对急性戊型肝炎患者尿液中低相对分子质量蛋白的水平进行了测定，探讨其临床意义并对戊型肝炎是否存在对肾脏的免疫损伤作初步探讨。

中国海南黎族人群LMP2/LMP7基因多态性与肺结核病的关联性

目的:探讨低相对分子质量蛋白酶体(LMP)基因单核苷酸多态性(SNP)与肺结核病(PTB)易感性的关系,了解海南省黎族人群中LMP基因多态性的情况,为我国人类基因组多样性的研究提供理论依据。方法:应用PCR-RFLP技术对205例海南黎族PTB患者(病例组)和217例海南黎族健康人群(对照组)LMP2/LMP7 2个多态性位点(Codon60/Codon145)进行检测,并对其易感性进行分析。结果:LMP基因多态性位点在2组人群中具有多态性,LMP7均为C→A,LMP2均为C→T;病例组LMP7Codon145多态性位点纯合型Lys/Lys和杂合型Gln/Lys的基因型频数明显高于对照组。野生纯合型Gln/Gln的基因型频数与纯合型Lys/Lys比较,OR=3.77,95%CI[1.60,8.89](P<0.05);与杂合型Gln/Lys比较,OR=2.97,95%CI[1.80,4.90](P<0.01)。病例组LMP2基因多态性位点的基因频数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);LMP7基因的多态性对于PTB感染的发生有着显著的易感关联,在海南黎族人群中,其纯合、杂合形式分别增加结核患病风险为3.77和2.97倍。结论:对于结核杆菌感染的发生,LMP7基因的多态性是一个重要的易感危险因素。

核定位信号类短肽的生物医学应用

核蛋白定位信号(nuclear localization signal,NLS)是一段富含精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸的短肽,是介导蛋白通过核孔复合体入核的必要信号序列。NLS存在于真核细胞核蛋白及病毒蛋白中,鱼精蛋白是应用较为广泛的天然NLS类短肽。针对NLS能够介导DNA、蛋白质、纳米粒等进入细胞核的特点,国内外学者对其在生物医学中的应用进行了广泛研究。

LMP/TAP基因多态性与甲状腺癌易感的相关性研究

目的为探讨低相对分子质量蛋白酶体(LMP)和抗原处理相关载体(TAP)基因单核苷酸多态性(SNP)与甲状腺癌易感性的关系,为我国人类基因组多样性的研究提供理论依据。方法124例甲状腺癌患者设为病例组,另选取111例健康人群设为对照组,采用聚合酶链式反应(PCR)酶切片段长度多态性(RFLP)对LMP2/LMP7/TAP1-1/TAP1-2基因中研究最多的四个多态性位点片段(Codon60/Codon145/Codon333/Codon637)进行检测,并对其易感性进行分析。结果遗传多态性分析和单倍型联合分析结果均表明,四种多态性位点与甲状腺癌的发生无显著相关性(P>0.05)。结论说明选择分析的Codon60/Codon145/Codon333/Codon637这四种多态性位点片段与甲状腺癌的发生可能不存在关联性。

免疫组化CK7、CAM5.2、CEA、P63及AB/PAS在宫颈癌分型中的应用及相关性

目的观察免疫组化细胞角蛋白7(CK7)、低分子质量细胞角蛋白(CAM5.2)、癌胚抗原(CEA)、抑癌基因P63及阿利新蓝-过碘酸雪夫氏(AB/PAS)在宫颈癌分型中的应用及相关性。方法选取2014年1月~2016年10月本院收治的宫颈癌患者60例,患者行手术治疗获取宫颈癌组织,采用免疫组织化学法检测组织中CK7、CAM5.2、CEA、P63表达水平,对获取组织行AB/PAS特殊染色。结果 60例中鳞癌50例,腺鳞癌4例,腺癌6例。中、高分化鳞癌存在明显的分化现象;60例宫颈癌患者免疫组织中腺癌6例,腺鳞癌4例,低分化鳞癌35例,中分化鳞癌13例,高分化鳞癌2例。CK7阳性率为46.67%,P63阳性率为83.33%,CAM5.2阳性率为68.33%,CEA阳性率为100.0%;60例患者中,AB/PAS染色在腺癌中发生率为83.33%(50/60),腺鳞癌发生率为6.67%(4/60),低分化鳞癌发生率为8.33%(5/60),中分化鳞癌和高分化鳞癌发生率均为0。结论宫颈癌不同分型中CK7、CAM5.2、CEA、P63表达水平存在差异,联合AB/PAS染色在宫颈癌鉴别中有一定鉴别作用。

血清胱抑素C对早期肾损害的临床诊断价值

肾脏是人体主要的排泄器官,在物质的排泄、体液的控制、电解质平衡以及激素内环境的稳定等方面均起重要作用。由于其解剖与生理上的特点,是体内特别容易受药物毒副作用影响的器官之一。氯氮平为广谱抗精神病药。

儿童Dent病及临床相关问题

Dent病是一种罕见的X连锁遗传性肾小管疾病，其临床特征为低分子质量蛋白尿（LMWP）、高钙尿、肾钙化和／或肾石症，可有其他近端。肾小管功能异常和肾功能异常。现已知Dent病Ⅰ型致病基因为编码氯离子通道-5的CLCN5基因，Dent病Ⅱ型致病基因为编码磷脂酰肌醇5-磷酸酶的OCRL1基因。其肾脏病理类型常见局灶节段性硬化（FSGS）、系膜增生性肾小球。肾炎（MsPGN）、微小病变（MCD），30-40年可进展至慢性肾衰竭。作为Dent病关键点的LMWP，在儿童常呈肾病水平蛋白尿，但血清清蛋白正常，在临床上应注意与肾病综合征鉴别。当男童有LMWP伴高钙尿或肾钙化时应送检CLCN5和OCRLl基因检测，以避免误诊和漏诊Dent病。