MEF2C调控大鼠脊髓背根节感觉神经元P物质和低分子量神经丝微管蛋白的表达

目的:研究肌细胞增强因子2C(MEF2C)在大鼠脊髓背根神经节神经元细胞内的表达及其与P物质和低分子量神经丝微管蛋白合成的关系。方法:分离培养背根神经节神经元细胞,然后暴露于不同浓度的神经生长因子下24h,最后用实时聚合酶链反应技术检测P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因在背根神经节神经元细胞内的表达。通过化学转染方法将合成的3条siRNA-MEF2C分别转染PC12细胞株,并用实时聚合酶链反应技术筛选干扰效率最高的siRNA。采用化学转染方法干扰背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,在高浓度神经生长因子刺激背根神经节神经元细胞后采用实时聚合酶链反应技术检测干扰后背根神经节神经元细胞内P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因的表达。结果:P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达随刺激用神经生长因子浓度的升高而升高。使用化学转染方法成功地干扰背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,MEF2C较对照组下降52%,同时没有检测到对cAMP反应元件结合蛋白表达的影响。实验组背根神经节神经元细胞内P物质在RNA水平较对照组下降了39%,而低分子量神经丝微管蛋白在RNA水平较对照组下降了62%。结论:神经生长因子促进大鼠脊髓背根节感觉神经元内P物质与低分子量神经丝微管蛋白的合成。大鼠背根神经节神经元细胞内P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达受MEF2C调控。

中药神经再生素作用于背根神经节细胞过程中基因的表达变化

目的 探讨中药神经再生素 (NRF)作用的分子生物学机制。 方法 采用半定量PCR方法 ,观察和比较NRF组、NGF组和空白对照组中生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、低分子量神经丝蛋白 (NF L)、翻译延伸因子 2A3 2(EF Ts ,RRAJ5 16 1)和锌指样蛋白DDP2 (F196 315 )基因水平的表达变化。 结果 在NRF作用于离体培养的DRG细胞过程中 ,GAP 4 3、NF L、2A3 2和DDP2基因表达在不同时间呈不同程度的上调。 结论 NRF促神经生长的作用与NGF相似 ,可作用于蛋白翻译水平 ,促进神经细胞的生长 ;作用于细胞骨架蛋白水平 ,维持神经细胞的形态和神经细胞正常生理活动 ;作用于神经细胞特异的蛋白水平 ,具有维持细胞生存及促进神经细胞突起生长的作用 ;还可以作用于反式因子调控水平 ,影响相关基因的表达 。